The expression of the neural cell adhesion molecule-180 (NCAM-180), which accumulates at contact sites between cells and may be responsible for the stabilization of cell contacts, was studied in the olfactory system and retina of developing and adult rats. From embryonic day 12 onwards, which was the earliest stage examined, the NCAM-180 pathway directing to the presumptive olfactory bulb was observed. In later stages, olfactory neurons and fasciculating axons in the olfactory epithelium and nerve fiber layer and glomeruli of the olfactory bulb expressed NCAM-180. From postnatal day 0, immunolabelling pattern of the olfactory epithelium and olfactory bulb were the same as that during later stages. NCAM-180 immunoreactivity was present on differentiating retinal cells and persisted on those cells throughout adulthood. However, contrary to the olfactory nerve which remained detectable in the adult, the optic nerve was only transiently expressed with NCAM-180 and was no longer detectable in the adult. The presence of NCAM-180 in olfactory tissues suggests their possible role in pathfinding, differentiation, fasciculation and synaptic plasticity. The continued presence of NCAM-180 in the olfactory system examined may underlie its continuous cell turnover and regenerative capacity. The continuous expression of NCAM-180 in ganglion cells, bipolar cells and photoreceptor cells, also suggests potential regenerating capability and some plastic functions for these cells in the adult. Since the expression of NCAM-180 by the optic nerve was restricted to the period of special histogenetic events, for example, during axonal growth and synaptogenesis, it is possible that the lack of NCAM-180 in the adult optic nerve might cause a nonpermissive environment for the regeneration and result in regenerative failure of this system.
Photoperiodism is an important adaptive phenomenon in various physiological parameters including reproduction to cope with seasonal changes. Involvement of extraretinal photoreceptors in the photoperiodism in non-mammalian vertebrates has been well established. In addition, circadian clock system is known to be involved in the photoperiodic time measurement. The pathway consists of light-input system, time measurement system (circadian clock), gonadotropin releasing hormone (GnRH) production in the hypothalamus, luteinizing hormone (LH) and follicle stimulating hormone (FSH) production in the pituitary, and final gonadal development. Recently, several laboratories reported photopigments newly cloned in the pineal, eyes and deep brain in addition to already known visual pigments in the retina. These are pinopsin, parapinopsin, VA-opsin, melanopsin, etc. All these photopigments belong to the opsin family having retinal as the chromophore. However, the function of these photopigments remains unknown. I reviewed the studies on the location of the photopigments by immunocytochemistry. I also discussed the results on the action spectra for induction of gonadal development in relation with the location of the photoreceptors. Various physiologically active substances distribute in the vertebrate brain. Such substances are GnRH, GnIH, neuropeptide Y, vasoactive intestinal peptide, c-Fos, galanin, neurosteroids, etc. I summarized the immunhistochemical studies on the distribution and the photoperiodic changes of these substances and discussed the route from the deep brain photoreceptor to GnRH cells.
Visual system of Korean Salamander(Hynobius leechi) was morphologically studied. Fertilized eggs in egg sacs were collected and were developed in sterile saline solution. Various sized larvae of 5-30mm in length were fixed. Specimens were paraffin sectioned and were observed under light microscope. In 5mm length larva, lens rudiment induced by optic cup was combined with sensory ectoderm. The shape of lens was changed as spherical in 12mm length larva, but the retinal layer did not differentiated into three layers. The differentiation of retinal layer was clear in 14-16mm length larva. The central region of lens fibers was degenerated. Iris and ciliary body were formed from the marginal zone of optic cup in 20mm length larva. Choroid was thicker in elder eye of 30mm length larva and cartilage developed at outer region of optic cup. The outer segment of photoreceptor cell layer grew longitudinally. Optic nerve was connected to the ventral part of brain through cartilage.
Light is a major environmental signal for entrainment of the circadian clock, but little is known about the phototransduction pathway triggered by light-activation of photoreceptive molecule(s) responsible for the phase shift of the clock in vertebrates. The chicken pineal gland and retina contain the autonomous circadian oscillators together with the photic entrainment pathway, and hence they provide useful experimental model for the clock system. We previously demonstrated the expression and light-dependent activation of rod-type transducin $\alpha$-subunit (Gtl$\alpha$) in the chicken pineal gland. It is unlikely, however, that the pineal Gt$_1$$\alpha$ plays a major role in the photic entrainment, because the light-induced phase shift is unaffected by bloking the signaling function of Gt$_1$$\alpha$. Here, we show the expression of G 11 $\alpha$, an $\alpha$-subunit of another heterotrimeric G-protein, in the chicken pineal gland and retina by cDNA cloning, Northern blot and Western blot analyses. GIl$\alpha$-immunoreactivity was colocalized with pinopsin in the chicken pineal cells and it was found predominantly at the outer segments of photoreceptor cells in the retinal sections, suggesting functional coupling of G11 $\alpha$ with opsins in the both the tissues. By coimmunoprecipitation experiments using the retina, we showed the light- and GTP-dependent interaction between rhodopsin and G11 $\alpha$. Upon ectopic expression of a Gq/ 11-coupled receptor in cultured pineal cells, pharmacological (non-photic) activation of endogenous G11 induced phase-dependent phase shifts of the melatonin rhythm in a manner very similar to the effect of light. These results suggested opsin-G11 pathway contributing to the photic entrainment of the circadian clock.
Journal of the Korean Institute of Electrical and Electronic Material Engineers
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v.20
no.1
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pp.80-85
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2007
We report the electro-optical properties of the sensory rhodopsin II using a near-field scanning microwave microscope(NSMM). Rhodopsin was known as a photoreceptor pigment with a retinal as a chromophore via a protonated Schiff base and consists of seven ${\alpha}-helical$ transmembrane segments. The sensory rhodopsin II, expressing E. coli UT5600 with endogenous retinal biosynthesis system and purified with $Ni^{-2}-NTA$ affinity chromatography in the presence of 0.02 % DM (Dodecyl Maltoside) from Natronomonas pharaonis. We measured the absorption spectra and the transients difference of sensory rhodopsin II from Natronomonas pharaonis using a UV/VIS spectrophotometer with Nd-Yag Laser (532 nm). The absorption spectra of NpSR II showed a typical rhodopsin spectrum with a left shoulder region and the photointermediates spectra of NpSR II-ground state (${\lambda}max=498\;nm$), NpSR II-M state (${\lambda}max=390\;nm$), and NpSR II-O state (${\lambda}max=550\;nm$) during the photocycle. The observed photocycle reaction was confirmed by measuring the microwave reflection coefficient $S_{11}$ at an operating frequency of f=3.93-3.95 GHz and compared with the results of a photocycle of NpSR II.
Purpose: This study was done to understand the visual system of bat by analyzing the distribution of middle/long (ML) opsin cone photoreceptors in the retina of the greater horseshoe bat. Methods: Experiments have been performed by standard immunocytochemical techniques on retina of the greater horseshoe bat Rhinolophus ferrumequinum. Results: The estimated numbers of ML cones were $27,336{\pm}2,130$ cells and the mean density of them was $7,854{\pm}268cells/mm^2$ among the four retinas. S opsin was appeared a little immunoreactivity in the outer segments of outer nuclear layer of cones. Conclusions: From the well organized spatial distributions of ML opsin and the immunoreactivity of S opsin in the retinas, the greater horseshoe bats have the functions not only reacting in the photopic vision but being able to distinguish the colors.
Ascidians are lower chordates, and their tadpole-like larvae share a basic body plan with vertebrates. To study photoreceptive systems in ascidians, we have isolated and characterized cDNA clones for three opsins, five G protein ${\alpha}$ subunits (G${\alpha}$), catalytic and regulatory subunits of cGMP phosphodiesterase (PDE), and arrestin from the ascidian Ciona intestinalis tadpole larva. Ci-opsin1 and Ci-opsin2 are vertebrate-type opsins, while Ci-opsin3 is a retinal photoisomerase similar to retinochrome and mammalian RGR. Both Ci-opsin1 and arrestin are specifically localized in the photoreceptor cells of the ocellus, whereas Ci -opsin2 is not expressed in the photoreceptors, but is co-localized in another population of neurons in the brain with PDE (Ci-PDE9 and Ci-PDE$\delta$). Ci-opsin3 is present in the entire region of the brain. Though five different cDNAs encoding Ga have been cloned, no transducin-type G protein has been found yet. Interestingly, one of G${\alpha}$i isoform is conspicuously expressed in the entire region of the brain. The Ci-opsin3 gene expression was observed in a broad area of the brain vesicle as well as in the visceral ganglion. Genes encoding ascidian homologs of CRALBP and ${\beta}$-CD, whose function is required for the mammalian visual cycle, are co-expressed with Ci-opsin3 in the brain vesicle and visceral ganglion. Localization of Ci-opsin3, CRALBP, and ${\beta}$-CD in a broad area of the brain suggests that the brain of the ascidian larva has a visual cycle system similar to that of the vertebrate RPE. Based on these data, we discuss the evolution of vertebrate visual systems.
Concentrated releases of zinc into water usually results from discharges associated with industrial purpose. The released zinc into soil is corroded and released into water. In aquatic environment, exess zinc is toxic to the organisms and causes the growth inhibition and malformation of them as a heavy metal. In this study, excess zinc toxicity was tested by FETAX (frog embryo teratogenetic assay with Xenopus)as in vivo system. Xenopus embryos at st.9 were exposed to $100{\sim}900\;{\mu}M$ of zinc for 7 days and 81% of individuals were survived in 100 ${\mu}M$, and 25% were survived in 1000M of zinc solution. In external malformations, swelled belly and intestinal dysplasia were common, and all of tested individuals showed these malformations in 200 ${\mu}M$ or higher concentration of zinc. In 400 ${\mu}M$ or higher concentration, all of tested tadpoles showed faded heart. Also, hypo-pigmentation, lens hernia and loose digestive track were very frequently found in 100 ${\mu}M$ of zinc. The histological study with paraffin section of zinc treated tadpoles showed following abnormalities; regeneration of photoreceptor on retina, reduced vitreous chamber in eye, reduction of red blood cells in heart, abnormal liver, swelling of pronephric cell, muscle dysplasia and palatal papilloma. These abnormalities may be caused by the degeneration of mitochondria, inhibition of cell adhesion, and the formation of leghemoglobin by zinc due to the substitution of $Ca^{2+}$ by $Zn^{2+}$. The body length was reduced due to the excess zinc. From a statistical result, body lengths of 300 ${\mu}M$ or higher concentrative g개ups was significantly reduced comparing that of control group. Recently, many spontaneous malformations and reduction of amphibians are reported, From the results of present study, excess zinc mi호t be a factor of amphibian reduction, and the control of zinc discharges is very important.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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