• 제목/요약/키워드: Phosphopeptide

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우유 Casein 중의 Calcium Phosphopeptide에 관한 연구 (Studies on the Calcium Phosphopeptide in Milk Casein)

  • 이수원;황보식;양희진;남명수;유제현;정충일
    • 한국축산식품학회지
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    • 제22권1호
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    • pp.55-58
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    • 2002
  • 본 연구는 생리활성 casein phosphopeptide의 경제적인 생산방법과 CPP의 칼슘 가용화 능력을 검정하기 위하여 수행되었다. 먼저 정제된 CPP-III는 N 13.1%, P 2.3∼2.4%, N/P비 5.4∼5.6 정도로 CPP 순도가 매우 높은 것으로 나타났다. 경제적인 면을 고려하여 CPP-III보다는 순도가 떨어지는 CPP-I, CPP-II의 제조방법을 확립하였다. 한편 CPP의 칼슘가용화 능력을 생리적 pH 조건하에서 검정한 결과 CPP와 polygutamic acid는 Ca 침전 형성 저지효과가 현저하였으나, DPP는 효과가 없었다.

${\apha}$-Casein의 인산화 위치 규명을 위한 티타늄 다이옥사이드($TiO_2$) 방법의 최적화 (Optimization of $TiO_2$ Method to Identify the Phosphorylation Sites of ${\apha}$-Casein)

  • 김혜정;박자혜;백문창
    • 약학회지
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    • 제52권5호
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    • pp.407-411
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    • 2008
  • Phosphorylation plays the most important role in cell signaling mechanism. Various methods to identify the phosphorylation sites of proteins using tandem mass spectrometry (MS/MS) have been reported recently. Furthermore, the enrichment strategy such as Titanium dioxide ($TiO_2$) method should be combined with MS/MS analysis to effectively identify phosphorylation sites. It is necessary to optimize phosphopeptide-enrichment strategy, $TiO_2$ method in this study, due to the low amount of phosphorylated form followed by analyzing them by MS/MS. To evaluate the several conditions to enrich phosphopeptides using $TiO_2$ method, we used ${\apha}$-casein as a standard phosphoprotein and analyzed a representative phosphopeptide (VPQLEIVPNpSAEER) peak of MS spectrum. Batch is better than column method for binding and 300 g/l DHB in loading buffer is better than lower concentration of DHB. 3% TFA and pH 10.5 shows high efficiency of phosphopeptide-enrichment for washing and elution steps, respectively. Finally we identified various efficient conditions of phosphopeptide-enrichment method using $TiO_2$. This optimized method would assist in reliable identifying thousands of phosphorylation sites existed in low abundance from various complex proteins.

유산균의 Casein Phosphopeptide(CPP) 생산 및 단백질 분해 활성 (Casein Phosphopeptide (CPP)-Producing Activity and Proteolytic Ability by Some Lactic Acid Bacteria)

  • 조윤희;오세종
    • 한국축산식품학회지
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    • 제30권3호
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    • pp.443-448
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    • 2010
  • 유제품, 김치 및 신생아 분변 등에서 유산균을 분리하여 우유 casein을 분해시켜 배양상등액에 존재하는 serine의 함량을 측정함으로써 간접적으로 CPP 생산을 평가하였다. CPP 생산 능력은 OPA방법으로 측정했을 때 E. faecalis A-2 균주가 1.244 mg/mL로 가장 많은 peptide를 생산 하였다. 본 실험에 사용된 유산균의 경우, 세포내 효소와 세포외 효소로 각각 나누어 proteolytic 활성을 평가한 결과 세포내 효소에 의한 proteolytic 활성은 E. faecalis A-6 균주가 가장 높은 것으로 나타났으며, 세포외 효소에 의한 proteolytic 활성은 L. plantarum A-14 균주에서 가장 높게 나타났다. 가용성 칼슘함량은 Leuconostoc mesenteroides A-1(11 mg/dL), E. durans A-16(10.481 mg/dL), 그리고 L. planatarum A-3(10.356 mg/dL) 균주의 경우에는 대조구보다 높은 유리 칼슘함량을 나타내었다. 따라서 이러한 유산균을 이용한다면 소장 내에서 칼슘 흡수를 극대화시킬수 있는 장점이 있어 이들 유산균을 이용한 고칼슘 제품 개발이 가능할 것이다.

Streptococcus sp. 기원의 Protease를 이용한 Casein Phosphopeptides의 생산 (Production of Casein Phosphopeptides by Protease from Streptococcus sp.)

  • 임근형;이병우;박기문;손세형;유주현
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제21권5호
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    • pp.468-472
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    • 1993
  • For the production of Casein Phosphopeptide(CPP) inhibiting the insolubility of calcium, 10% sodium caseinate was treated with 1.5% of protease from Streptococcus sp.. Optimal conditions and productivity for the CPP production, and properties of the CPP were compared with tryptic hydrolysates of sodium caseinate. Optimum conditions of pH, temperature and reaction time were 8.0, 50C, 4 hrs, respectively. Under these conditions the productivity of CPP was 23% and Molecular weight of CPP was ranged from 3, 000 to 17, 000. The results also showed that the insolubility of calcium was completely inhibited by using 1.5 times of CPP for the amount of calcium.

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A Multidimensional System for Phosphopeptide Analysis Using TiO2 Enrichment and Ion-exchange Chromatography with Mass Spectrometry

  • Cho, Kun;Yoo, Ji-Sun;Kim, Eun-Min;Kim, Jin-Young;Kim, Young-Hwan;Oh, Han-Bin;Yoo, Jong-Shin
    • Bulletin of the Korean Chemical Society
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    • 제33권10호
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    • pp.3298-3302
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    • 2012
  • Although offline enrichment of phosphorylated peptides is widely used, enrichment for phosphopeptides using $TiO_2$ is often performed manually, which is labor-intensive and can lead to irreproducible results. To address the problems associated with offline enrichment and to improve the effectiveness of phosphopeptide detection, we developed an automated online enrichment system for phosphopeptide analysis. A standard protein mixture comprising BSA, fetuin, crystalline, ${\alpha}$-casein and ${\beta}$-casein, and ovalbumin was assessed using our new system. Our multidimensional system has four main parts: a sample pump, a 20-mm $TiO_2$-based column, a weak anion-exchange, and a strong cation-exchange (2:1 WAX:SCX) separation column with LC/MS. Phosphorylated peptides were successfully detected using the $TiO_2$-based online system with little interference from nonphosphorylated peptides. Our results confirmed that our online enrichment system is a simple and efficient method for detecting phosphorylated peptides.

케이신 포스포펩티드/키토올리고당 나노 복합체 형성과 특성 연구 (Formation and Characterization of Casein Phosphopeptide/Chitosan Oligosaccharide NanoComplex)

  • 백윤서;하호경;이지홍;이미령;이원재
    • Journal of Dairy Science and Biotechnology
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    • 제36권3호
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    • pp.164-170
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    • 2018
  • 본 연구에서는 CPP와 CSO를 사용하여 약 187~282 nm 크기의 균일한 구형의 나노 복합체를 성공적으로 제조하였다. 나노 복합체는 제조 공정 요인인 CPP 농도와 pH 조절을 통해 입자 크기, 다분산 지수, 그리고 표면 전하와 같은 나노 복합체의 물리화학적 특성을 조절할 수 있음을 확인하였다. 또한 CPP/CSO 나노 복합체의 분말화 공정을 통해 분말화 된 나노 복합체의 식품 적용성을 증진시킬 수 있음을 알 수 있었으며, food-grade 물질인 CPP와 CSO를 사용하여 제조한 나노 복합체는 향후 잠재적인 칼슘 전달체로써 식품 산업에 이용될 수 있을 것으로 기대된다.

Casein phosphopeptide를 생산하는 김치 유래 유산균의 분리 및 특성 연구 (Isolation and Characteristics of Lactic Acid Bacteria Producing Casein Phosphopeptides from Kimchi)

  • 이미경;권효정;변옥희;방보연;김유진;박정민;배동훈
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제44권1호
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    • pp.68-73
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    • 2016
  • 본 연구에서는 전국 가정집에서 제조한 김치로부터 분리한 유산균들 중에서 protease 활성 및 CPP 생산 능력이 가장 높은 균주인 strain 0301을 동정하였고 해당 균주의 특성과 CPP 생산 최적 조건을 조사하였다. 0301은 $0.6-0.8{\mu}m$ 크기의 gram 양성 구균이며, 16s rDNA 염기서열 분석 결과 Enterococcus faecalis MG-379로 동정 명명하였다. E. faecalis MG-379 균주를 2% fructose를 첨가하고 pH 6.0인 배지에서 37oC에서 36시간 배양하였을 때 CPP 생산 능력이 최대였으며, ICP를 이용하여 측정한 결과 2227.5 mg/kg으로, 비교 균주인 Enterococcus faecalis KCCM 40450에 비해 약 2배 가량 높은 CPP 생산 능력을 갖는 것으로 나타내었다.