The white rot fungi Phanerochaete chrysosporium(IFO 31249) Trametes sp and Pleurotus sp. were studied for their ability to degrade Polycyclic Aromatic Hydrocarbons(PAHs) using anthracene and pyrene as model compounds. The disapperarance anthracene and pyrene of from cultures of wild type strains. P chrysosporium Trametes sp. and Pleurotus sp was observed However the activities of ligninolytic enzymes were not detected in P chrysosporium cultures during degradation while ligninolytic enzymes were detected in both culture of Trametes sp. and Pleurotus sp. Therefore our results showed that PAHs was degraded under ligninolytic as well as nonligninolytic conditions. The results also indicate that lignin peroxidase(LiP) mananese peroxidase(MnP) and laccase are not essential for the biodegradation of PAHs by white rot fungi.
To investigate the biodegrading capability of several white-rot fungi isolated in Korea, biodegradation of BTX (benzene, toluene, xylene), phenanthrene and pyrene were tested in fungal cultures. Phanerochaete chrysosporium removed 20-30% of BTX mixture during 21 days of incubation in serum bottle. Coriolus versicolor KR-11W and Irpex lacteus mineralized 10.02 and 8.26% of totla phenanthrene, respectively, which were higher than in other studies with P. chrysosporium. These two strains also showed high mineralization rates (9.2-10.1%) for 4-ring pyrene. I. lacteus metabolized most of the added pyrene and 23.29% was incorporate dinto fungal biomass. Almost 50/5 of the pyrene was converted to polar metabolites and recovered from aqueous phase of culture. These results indicated that some white- rot fungi have higher biodegradability than P. chrysosporium and could be used in bioremediation of aromatic hydrocarbon contaminants in soil.
Wood-rotting basidiomycetous fungi are the most efficient degraders of lignin on earth. The white-rot fungus Phanerochaete chrysosporium has been used as a model microorganism in the study of enzymology and its application. Because of the ability of the white-rot fungus to degrade lignin, which has an irregular structure and large molecular mass, this fungus has also been studied in relation to degrading and mineralizing many environmental pollutants. The fungus includes an array of enzymes, such as lignin peroxidase (LiP), manganese-dependent peroxidase (MnP), cellobiose:quinone oxidoreductase, and $H_2O_2$-producing enzymes and also produces many other components of the ligninolytic system, such as veratryl alcohol (VA) and oxalate. In addition, the fungus has mechanisms for the reduction of degradation intermediates. The ligninolytic systems have been proved to provide reductive reactions as well as oxidative reactions, both of which are essential for the degradation of lignin and organopollutants. Further study on the white-rot fungus may provide many tools to both utilize lignin, the most abundant aromatic polymer, and bioremediate many recalcitrant organopollutants.
An unbleached hardwood kraft pulp was bleached in vitro with partially purified manganese peroxidase (MnP) from the fungus Phanerochaete sordida YK-624 without the addition of MnSO$_4$ in the presence of oxalate, malonate or gluconate known as manganese chelator, When the pulp was treated without the addition of MnSO$_4$, the pulp brightness increased by about 10 points in the presence of 2 mM oxalate, but the brightness did not significantly increase in the presence of 50 mM malonate. Residual MnP activity decreased faster during the bleaching with MnP without MnSO$_4$ in the presence of malonate than in the presence of oxalate. Oxalate reduced MnO$_2$ which already existed in the pulp or was produced from $Mn^{2+}$ by oxidation with MnP and thus supplied $Mn^{2+}$ to the MnP system. Thus, bleaching of hardwood kraft pulp with MnP, using manganese originally existing in the pulp, became possible in the presence of oxalate, a good manganese chelator and reducing reagent. Properties of partially purified MnPs from liquid cultures of white rot fungi, Ganoderma sp. YK-505, Phanerochaete sordida YK-624 and Phanerochaete chrysosporium were compared. MnP from Ganoderma sp. YK-505 was superior to MnPs from P. sordida YK-624 and P. chrysosporium in stabilities against high temperature and high concentration of $H_2O$$_2$. The MnP from Ganoderma sp. YK-505 differed in pH-activity profile from other MnPs. These data suggest that MnP from Ganoderma sp. YK-505 has different structure from those of other fungi. Bleaching of hardwood kraft pulp using the MnP from ganoderma sp. YK-505 is now in progress.
Kim, Mi-Sun;Huh, Eun-Jee;Kim, Hyun-Kyung;Moon, Kwang-Woong
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제8권2호
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pp.129-133
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1998
The white-rot fungi Phanerochaete chrysosporium ATCC 24725, Pleurotus ostreatus ATCC 32783, Lentinus edodes ATCC 24462, and Trametes versicolor ATCC 42530 were studied for their ability to degrade lignin, phenanthrene, and anthracene. Lignin in rice-straw was degraded by 14.4, 28.73, and 33.88% by P. chrysosporium, T. versicolor, and P. ostreatus, respectively. Approximately 12% and 83% of phenanthrene was degraded in 1 and 5 days, respectively, when the pre-grown mycelIium matrix of P. ostreatus. was incubated with 10 ppm of phenanthrene in modified Kirk's medium (nitrogen limited) at $25^{\circ}C$. Approximately 2%> and 61% of phenanthrene was degraded when the phenanthrene concentration was increased to 30 ppm. Similar trends were observed with phenanthrene using P. chrysosporium. Mycelial growth of T. versicolor was less inhibited at 30 ppm phenanthrene than for P. ostreatus and P. chrysosporium. Better degradation of phenanthrene by T. versicolor may be attributed to better mycelium growth. One hundred percent of 15 ppm anthracene was degraded in 10 days by both P. chrysosporium and T. versicolor. 40 ppm anthracene inhibited the mycelial growth of P. chrysosporium. lignin peroxidase activity, which was previously reported to be involved in initial phenanthrene oxidation, was also detected from the culture broth of the strains tested. The rates of lignin peroxidase production in the cultures were not consistent with the rate of PAH hydrolysis during incubation.
본 연구에서는 백색부후균의 리그닌 분해 효소 시스템을 이용하여, 다양한 균주 중에서 목질계 바이오매스 유기용매 전처리 과정에서 발생한 리그닌(유기용매 리그닌)의 생분해에 적합한 우수 균주를 선별하고자 하였다. 우선 분양받은 15개의 백색부후균을 대상으로 shallow stationary cultur (SSC)배지와 malt extract broth (MEB)배지에 유기용매 리그닌의 첨가에 따른 Remazol Brilliant Blue R (RBBR)의 흡광도 변화를 측정하였다. RBBR 탈색능 결과, SSC 배지에서 Ceriporiopsis subvermispora, Ceriporia lacerate, Fomitopsis insularis, Phanerochaete chrysosporium, Polyporus brumalis, Stereum hirsutum 등 6종의 백색부후균에서 급격한 흡광도 변화를 나타냈다. 배양 초기에 급격한 흡광도 변화를 나타낸 6개의 백색부후균을 대상으로 균체 외 단백질 농도 및 리그닌 분해 효소 활성을 측정하였다. 선발된 6개의 균 중에서 S. hirsutum과 P. chrysosporium은 유기용매 리그닌을 첨가한 실험구에서 높은 단백질 농도가 측정되었다. 반면, 리그닌 분해 효소 활성은 F. insularis에서 배양 6일째에 manganese peroxidase (MnP) 활성이 1,545 U/mg, laccase 활성은 1,259 U/mg으로 최고 활성을 나타냈다. 결론적으로, 균체 외 단백질 농도 및 리그닌 분해 효소 활성이 전반적으로 높았던 $STH^*$와 MnP 및 laccase의 활성이 가장 높은 FOI가 유기용매 리그닌 생분해에 유리하게 작용할 것으로 판단된다.
The effect of nutrient nitrogen on the degradation of pentachlorophenol (PCP) by Phanerochaete chrysosporium in a liquid culture was investigated. PCP disappeared at almost the same rate in both nutrient nitrogen-sufficient (NS) and -limited (NL) sttionary cultures. However, more pentachloroanisole (PCA) was accumulated in the NS culture than in the NL culture. The effect of nitrogen on the degradation of PCA was also tested in both cultures. PCA disappeared faster in the NL culture than in the NS culture, indicating that the lower accumulation of PCA during the degradation of PCP in the NL culture was due to the faster degradation of PCA in the NL culture than in the NS culture. In another experiment, PCA was added to shaking cultures rather than stationary cultures to search for any other metabolite(s). While no other metabolite but PCA was found in the NS stationary culture, 2,4,5,6-tetrachloro-2,5-cyclohexadiene-1,4-dione(TCHD) was found as the only indentifiable product in the NL shaking culture. Thus, PCP would appear to be metabolized to TCHD via PCa or directly oxidized to TCHD by lignin peroxidase. Since all the above results indicate that no innocuous metabolite was formed during the degradation of PCP by the fungus, it is quite feasible to use the fungus in the biotreatment of PCP.
This study was carried out to know the possibility of simultaneous utilization of laccase from white-rot fungus with cellulase on enzymatic hydrolysis of cellulosic substrate from autohydrolyzed oak wood. Laccases from 3 white-rot fungi, Pleurotus ostreatus. Ganoderma lucidum, and Phanerochaete chrysosporium, were isolated, purified and measured their activities. The highest activity was shown in Pleurotus ostreatus and the lowest in Phanerochaete chrysosporium. Laccase from Pleurotus ostreatus has optimum pH of 5.94, Km value of 3.209 mM and appeared to be stable at relatively wide pH range, 4.7-8.72. Temperature stability showed that 60% activity was preserved after 40 minutes at $50^{\circ}C$. Laccase from Ganoderma lucidum reached to the maximum activity during 15-20 day incubation. This enzyme has optimum pH of 6.45, Km value of 6.71 mM and pH range of 5.0-9.0 for stabilization. 95% activity was preserved at $30^{\circ}C$ and 58% activity at $50^{\circ}C$. Concerned to the enzymatic hydrolysis of cellulosic substrate with both enzymes, cellulase and laccase, simultaneously, mixed culture filtrates and mycellium extracts were shown higher hydrolysis rates than those of Trichoderma viride. There were no significant differences in the extent of hydrolysis among various mixed culture filtrates and mycellium extracts.
백색부후균류에 의한 poly R-478, congo red 및 methylene blue 등 3 가지 염료의 탈색을 여러 가지 배양조건에서 분석한 결과 국내에서 분리한 구름버섯 (Coriolous versicolor KR-11W 와 C. versicolor KR-65W) 2균주가 정치배양시 가장 우수한 효과를 나타내었다. C. versicolor KR-11W는 poly R-478을 13일만에, congo red를 7일만에 100%, methylene blue를 7일만에 90%까지 탈색시켰다. C. versicolor KR-65W는 poly R-478을 15일만에 100%, congo red를 7일만에 85%, methylene blue를 7일만에 100% 까지 탈색시켰다. 대조구로 사용한 Phanerochaete chrysosporium IFO 31249는 poly R-478 을 15일만에 약 35%, congo red를 7일만에 85%, methylene blue를 7일만에 95%까지 탈색시켰다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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