This study was carried out to investigate the ACE inhibitory materials of Raja kenojei. Raja kenojei was sperated to fillet and viscera, and these were extracted with hot water. Antihypertensive activity was examined by mesearing angiotensin converting enzyme ACE inhibitory activity. ACE inhibitory activity of viscera at the concentration of 2% for Day 0 showed the highest value by 71.0%. But ACE inhibitory activity of fillet at 2% showed by 29%, which was lower antihypertensive activity than viscera. The protein content of viscerial hot water extracts in proximate composition showed the highest. And also, there was a large amount of aromatic and branched aliphatic amino acids in viscera than those in fillet. For the purification of antihypertensive material in visceral hot water extracts, it was separated and collected by Sephadex G-25 gel chromatography. The fraction (B) of 111 to 160 showed the highest ACE inhibitory activity by 65.1% at the concentration of 0.05%. But the other fractions (A and C) showed lower activity than B. These results demonstrate that crude hot water extracts of viscera from Raj kenojei may be useful as functional food ingredient with antihypertensive property.
A recombinant human erythropoietin (EPO), expressed in Chinese hamster ovary (CHO) cells, is glycosylated at Asn 24, Asn 38, Asn 83, and Ser 126. After release of the N-linked carbohydrate chains by $peptide-N^{4}-(N-acetyl-{\beta}-glucosaminyl)$ asparagine amidase F, the oligosaccharides were analyzed by FACE (Fluorophore-Assisted Carbohydrate Electrophoresis). The O-linked carbohydrate chain was separated by hydrazine, and analyzed by FACE. The monosacccharide composition of recombinant EPO showed man nose, fucose, galactose, N-acetylglucosamine, N-acetylneuraminic acid, and a trace of N-acetylgalactosamine, which are typical monosaccharides in the glycoproteins from the CHO cell. Sequences of N-linked and O-linked oligosaccharides were determined. The structure and composition of oligosaccharides attached to recombinant human EPO, expressed in the CHO cell, are identical to the reported oligosaccharide structure in human EPO isolated from urine.
To improve the preservation of Kimchi, we isolated Lactobacillus plantarum lytic enzyme-producing strain from soil, and the enzyme was purified and characterized. From the observation of cultural and morpho- logical characteristics, the isolated strain was identified as Metarrisium anisopliae (Metschn.) Sorok. The enzyme was purified to 75-folds with 40% yields through affinity adsorption and CM-Sephadex C-50 column chromatog- raphy. The optimum pH and temperature for lytic activity are 4.0 and 40$\circ$C, respectively, and the enzyme acitvity is stable between pH 3.0 and 9.0, and up to 50$\circ$C. The enzyme is a monomeric protein with molecular weight of 40,000 daltons by SDS-PAGE and gel filtration. The enzyme is endopeptidase which breaks the peptide linkage of Lactobacillus plantarum peptidoglycan. The lytic action spectra confirmed that Leuconostoc mesenteroides, a useful strain for the fermentation of Kimchi, is not lysed by the enzyme. The enzyme activity is inhibited by N-bromosuccinimide (NBS), which probably indicates the involvement of tryptophan residue in active site of the enzyme, and also inhibited by Ag$^{+}$. The amino acid composition analysis showed that the enzyme contains more acidic amino acids than basic ones, and composition of alanine, glycine, proline and tyrosines was very high.
Kim H.J.;Chang I.T.;Koak J.Y.;Heo S.J.;Yim S.A.;Jang J.H.
The Journal of Korean Academy of Prosthodontics
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v.42
no.3
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pp.301-306
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2004
Statement of problem. Fibronectin mediates its biological effects by binding to integrins on cell membranes through a consensus site including the Arg-Gly-Asp (RGD) sequence within tenth type III module. Purpose. The purpose of our study was to investigate the adsorption affinity of human recombinant fibronectin peptide (hFNIII 9-10) to titanium and to investigate the effect of the surrounding ionic composition on the adsorption process. Material and methods. As for evaluating the affinity of hFNIII 9-10 to Ti, titanium disks were incubated in 40, 80 and $120{\mu}g/ml$ hFNIII 9-10 solution at $37^{\circ}C$ overnight, repectively. As for evaluating the effect of surrounding ionic concentration, hFNIII 9-10 was dissolved in distilled water, phosphate buffered saline and RPMI 1640. Optical density (O.D.) was measured in ELISA reader. Results. The results were as follows; 1. The adsorption of hFNIII 9-10 showed significantly highest mean optical density (O.D.) value in $80{\mu}g/ml$. 2. The difference of ionic composition in DW, PBS and RPMI did not influence the adsorption amount of hFNIII 9-10.
Nielsen, Birthe V.;Abaye, Daniel A.;Nguyen, Minh T.L.
Mass Spectrometry Letters
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v.8
no.2
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pp.29-33
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2017
Understanding the mechanisms that control and concentrate the observed electrospray ionisation (ESI) response from peptides is important. Controlling these mechanisms can improve signal-to-noise ratio in the mass spectrum, and enhances the generation of intact ions, and thus, improves the detection of peptides when analysing mixtures. The effects of different mixtures of aqueous: organic solvents (25, 50, 75%; v/v): formic acid solution (at pH 3.26) compositions on the ESI response and charge-state distribution (CSD) during mass spectrometry (MS) were determined in a group of biologically active peptides (molecular wt range 1.3 - 3.3 kDa). The ESI response is dependent on type of organic solvent in the mobile phase mixture and therefore, solvent choice affects optimal ion intensities. As expected, intact peptide ions gave a more intense ESI signal in polar protic solvent mixtures than in the low polarity solvent. However, for four out of the five analysed peptides, neither the ESI response nor the CSD were affected by the volatility of the solvent mixture. Therefore, in solvent mixtures, as the composition changes during the evaporation processes, the $pK_b$ of the amino acid composition is a better predictor of multiple charging of the peptides.
This study was designed to investigate the angiotensin convertin enzyme (ACE) inhibitory activity of skipjack/yellowpin tuna cooking broth. The cooking broth was pretreated with membrane filter (MW cut-off 5,000) to obtain the peptide fraction with ACE inhibition. the crude peptides fractionated with Amberlite IR-120 ($H^{+}$ form and followed by Bio-gel P-2, were separated into nine fractions (T-1 to T-9). The maximum inhibitory activity was observed in the fraction T-4 ($IC_{50}$ value, 0.619mg/ml). The abundant amino acids obtained from active fraction T-4 were phenylaanine, leucine and glutamic acid.
We have isolated and characterized a new insect chicken type (c-type) lysozyme gene from the common cutworm, Spodoptera litura. The full-length cDNA of Spodoptera lysozyme is cloned by rapid amplification of cDNA ends PCR (RACE-PCR). The isolated cDNA consists of 1039 bp including the coding region for a 142-amino acid residue polypeptide, which included a signal peptide of 21-amino acid residue and a mature protein of 121-amino acid residue. The predicted molecular weight of mature lysozyme and its theoretical isoelectric point from amino acid composition is 13964.8 Da and 9.05, respectively. The deduced amino acid sequence of Spodoptera lysozyme gene shows the highest similarity (96.7%) to Spodoptera exigua lysozyme among other lepidopteran species. Amino acid sequence comparison with other the c-type lysozymes, Spodoptera lysozyme has the completely conserved $Glu^{32}$ and $Asp^{50}$ of the active site and eight Cys residues are completely conserved in the same position as that of other lepidopteran lysozymes.
Lee, Hyoun Suk;Kim, In Seop;Yoon, Sung Joon;Lee, Kye Joon
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.23
no.5
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pp.602-608
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1995
The aim of the present research program was to construct an optimum fermentation system and to characterize the properties of cathepsin B inhibitor from Streptomyces chromofuscus SMF28. Glucose and casitone were proved to be good carbon source and nitrogen source, respectively. The production of inhibitor was high at lower concentration than 10 mM of inorganic phosphate. The optimum temperature and pH for the production of inhibitor were 30$\circ$C and pH 7, respectively. The production of inhibitor was related to mycelial growth and was affected by medium composition. The inhibitor in culture filtrate of S. chromofuscus SMF28 was purified by butanol extraction, silica gel chromatography, Amberlite IRC-50 (H$^{+}$ form) chromatography, preparative TLC, and preparative HPLC. From amino acid analysis and UV, IR, $^{1}$H-NMR spectroscopic analysis, the inhibitor was identified as a peptide containing valine and phenylalanine derivative.
The substance produced by Bacillus subtilis $480HS_{20}$ showed specific anti Puccinia graminis activity and narrow antimicrobial activity. The anti Puccinia graminis substance was found to be peptide antibiotic which had molecular weight of about 1,500 by sephadex LH-60 gel-filtration. The amino acid composition of the substance waas composed of Ser (1), Glu(3), Ile(1), Gyr(2) and His (1). The compound was yellowish powder and it's melting point was $214{\sim}216^{\circ}C$. UV spectrum in methanol showed single peak at 278(E 1% 1cm 15.2) and important peak at 3,350-3,320, 2,940, 1,635, 1,520-155, 1,240-1, $230cm^{-1}$ were observed in IR Spectrum. The substance was soluble in methanol but insoluble in water, ethyl acetate and chloroform. The antibiotic $480HS_{20}$ showed a little antimicrobial activity against Pyricularia aryzae but no antimicrobial activity was observed against Gram + and Gram - bacteria and molds except pyricularia oryzae.
Yuan, XianJun;Wen, AiYou;Desta, Seare T.;Wang, Jian;Shao, Tao
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.30
no.6
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pp.804-810
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2017
Objective: The objective of this study was to evaluate the effect of sodium diacetate (SDA) on fermentation profile, chemical composition and aerobic stability of alfalfa (Medicago sativa L.) silage. Methods: Fresh alfalfa was ensiled with various concentrations of SDA (0, 3, 5, 7, and 9 g/kg of fresh forage). After 60 days of the ensiling, the samples were collected to examine the fermentative quality, chemical composition and aerobic stability. Results: The application of SDA significantly (p<0.05) decreased silage pH with the lowest value in silage with 7 g/kg of SDA. The proliferations of enterobacteria, yeasts, molds and clostridia were inhibited by SDA, resulted in lower ethanol, propionic and butyric acid concentrations and dry matter loss in SDA treated silages than control. The increasing SDA linearly decreased free amino acid N (p<0.001), ammonia N (p = 0.018) and non-protein N (p<0.001), while linearly increased water soluble carbohydrate (p<0.001) and peptide N (p<0.001). It is speculated that SDA accelerated the shift from homofermentative to heterofermentative lactic acid bacteria during the silage fermentation, indicated by lower lactic acid production in SDA-9 than SDA-7 silages after 60 days of ensiling. Alfalfa silages treated with SDA at 7 g/kg had highest Flieg's point and remained stable more than 9 d during aerobic exposure under humid and hot conditions in southern China. Conclusion: SDA may be used as an additive for alfalfa silages at a level of 7 g/kg.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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