The results of this study intended to clarify the apoptotic effects of curcumin on Epstein-Barr virus transformed human B lymphoma (EBV-B) cells are summarized as follows: It was found that curcumin induced endoplasmic reticulum(ER) stress as well as apoptotic cell death in EBV-B cells, although the magnitude of action was insignificant. When EBV-B cells activated by pokeweed mitogen (PWM) were treated with the same concentrations of curcumin, it was found that higher ER stress (GRP78, P-PERK, XBP-1, ATF6, and CHOP expressed) increased unfold protein response (UPR) and thus, apoptosis attributed to ER stress, compared to non-activated EBV-B cells In conclusion, it is expected that curcumin will play an important role for leukemia treatment.
In general, the blood cell culture is a common method for animal chromosome preparation. However, every animal and its cells have unique physiological characteristics and functions. Hence, it is very difficult to find the suitable method of chromosome preparation using animal lymphocyte culture. This study was carried out to fine the suitable method of chromosome preparation using lymphocytes cultures in mammalians and aves including cattle, rat, mouse and chicken. To seek the optimal method of lymphocyte culture in each animal, $2^3$ factorial experiment was designed. The design evaluated three main effects in culture duration, kinds of mitogen supplements and colcemid exposure time with two levels within each effect. The mitotic index and the score of chromosome morphology were analyzed. In results, the suitable methods of lymphocyte culture for chromosome preparation were 72 hours culture, pokeweed mitogen(PWM) supplement and 90 minutes of colcemid exposure in cattle, 72 hours culture, PWM supplement and 50 minutes of colcemid exposure in chicken, 96 hours culture, concanavalin A supplement and 90 minutes of colcemid exposure in rat, and 72 hours culture, PWM supplement and 50 minutes of colcemid exposure in mouse, respectively. In conclusion, kinds of mitogen, culture duration and colcemid exposure time significantly affected the mitotic index and chromosome morphology, in animal lymphocyte culture. The interaction effects between/among treatment factors were also statistically significant.
비태인이 산란계의 면역 반응에 어떠한 영향을 미치는지 알아보기 위하여 in vitro와 in vivo 시험을 시행하였다. 처리구당 18수씩 총 72수를 공시하였고, 비태인 0, 300, 600, 1,200 ppm 수준으로 산란계 사료에 첨가 급여하였다. 시험결과, in vitro 시험에서 비장 림프구 증식은 비태인 만을 처리하였을 때에는 증식 반응은 일어나지 않았으나 Con A와 PWM을 처리하였을 때 증식 반응은 현저하게 증가하였다. 또한 Con A만을 처리했을 때보다 Con A와 비태인을 동시에 처리했을 때 반응성이 현저하게 증가하였다. 그러나 PWM과 비태인을 동시에 처리했을 때는 PWM만을 처리했을 때와 비교해서 차이를 보이지 않았다. 사료에 비태인을 첨가 급여한 in vivo시험에서 Con A의 자극에 대한 비장 림프구 증식반응은 비태인의 첨가 수준에 따라 증가하는 경향을 보였으나 1,200 ppm 급여구에서는 대조구에 비하여 감소하는 경향을 보였다. 이러한 경향은 Con A와 함께 비태인(0.1 mM)을 처리했을 때도 동일하게 나타났다. PWM의 자극에 대한 반응은 Con A에 비하여 약하게 나타났으며 비태인 급여 수준에 따른 차이도 적게 나타났다. 비태인을 급여한 산란계 비장의 무게에서 처리구간에 통계적인 차이는 없었다. 비태인 첨가구는 대조구에 비하여 전체적으로 증가하는 경향을 보였고, 비태인 300 ppm 첨가구가 가장 높은 수치를 나타내었다. 비태인을 수준별로 급여하여 SRBC 항체가를 조사한 결과에서도 처리구간 유의적인 차이는 나타나지 않았다. 따라서 본 시험의 결과, 비태인의 처리는 in vivo 상에서 Con A로 비장 림프구의 증식을 유도한 경우 유의하게 비장 림프구의 증식을 증가시켰다.
The immune system is partially under the control of the sympathetic and parasymphathetic nervous systems through the regulatory feedback loop. Methamphetamine (MA) is a neurotoxic chemical which affects the neurotransmitter system. The objective of this study was to investigate the immunotoxic effect of MA on the major immune target organ and lymphocyte proliferation to the various mitogens. Female Balb/C mice, 15 to 20 g, were injected subcutaneously with 0, 0.5, or 5 mg MA/kg for 14 consecutive days. In MA treated mice, the body weight gain and relative spleen and thymus weight were decreased in doserelated manner. Histopathologically, there was a paucity of lymphold follicles and germinal centers in the spleen, and thymic cortical atrophy with lymphophagocytosis was prominent. Apoptosis also occurred in germinal centers of spleen and thymic cortex. The threshold and peak of lymphocyte proliferation at various concentration of mitogens showed similar patterns. However, the response to lipopolysaccaride (LPS) and pokeweed mitogen (PWM) in the 5 mg MA/kg treated group showed threshold and peak proliferation at high concentration of mitogens (25${\mu}g$ LPS/ml for MA vs 15${\mu}g$ LPS/ml for control; 60${\mu}g$ PWM/ml for MA vs 45${\mu}g$ PWM/ml for control), which suggest that MA impairs T cell dependent-B cell function. This preliminary study indicated that MA affected the lymphold organs and immune function.
Takagi, M.;Tsuno, M.;Ohtani, M.;Acosta, T.J.;Miyamoto, A.;Miyazawa, K.;Sato, K.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제15권5호
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pp.615-621
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2002
We investigated the effects of the mitogen supplements of 3 types, pokeweed mitogen (PWM), phytohemagglutinin (PHA) and concanavalin A (ConA), to a whole blood culture system on the number of metaphase spreads obtained in perinatal bovine chromosome analysis. In addition, the supplementation of ${\beta}$-mercaptoethanol (${\beta}$-ME) and FBS was examined in such system. Significant differences (p<0.05) were seen in the number of metaphase spreads with PHA stimulation compared to both PWM and ConA stimulation. When examined the effects of ${\beta}$-ME supplementation, the number of metaphase spreads was significantly (p<0.05) increased at $30{\mu}M$${\beta}$-ME compared to control. When evaluated FBS supplementation during PWM stimulation, no significant effect of the supplementation was found. Finally, the effects of the cortisol concentration (10-20, 20-30 and >30 ng/ml) of the blood samples were examined. There was no significant effect of cortisol concentration (p>0.05) among these 3 cortisol concentration groups. The mean percentages of normal metaphase plates (2n=60) from each calf 1) with ${\beta}$-ME, 2) without ${\beta}$-ME and 3) with FBS stimulated with PWM were not significantly different (p>0.05). In conclusion, these findings may be useful in cytogenetic screening programs for not only perinatal calves but also for mature cattle.
This study aimed to investigate whether the antidiabetic drugs dipeptidyl peptidase 4 (DPP4) inhibitors such as evogliptin and sitagliptin affect the membrane DPP4 (mDPP4) enzymatic activity and immune function of T helper1 (Th1) cells in terms of cytokine expression and cell profiles. The mDPP4 enzymatic activity, cytokine expression, and cell profiles, including cell counts, cell viability, DNA synthesis, and apoptosis, were measured in pokeweed mitogen (PWM)-activated CD4+CD26+ H9 Th1 cells with or without the DPP4 inhibitors, evogliptin and sitagliptin. PWM treatment alone strongly stimulated the expression of mDPP4 and cytokines such as interleukin (IL)-2, IL-10, tumor necrosis factor-alpha, interferon-gamma, IL-13, and granulocyte-macrophage colony stimulating factor in the CD4+CD26+ H9 Th1 cells. Evogliptin or sitagliptin treatment potently inhibited mDPP4 activity in a dose-dependent manner but did not affect either the cytokine profile or cell viability in PWM-activated CD4+CD26+ H9 Th1 cells. These results suggest that, following immune stimulation, Th1 cell signaling pathways for cytokine expression function normally after treatment with evogliptin or sitagliptin, which efficiently inhibit mDPP4 enzymatic activity in Th1 cells.
Despite a number of recent studies on appendix its function appears to remain unknown. The present studies were undertaken in order to extend and confirm the previous studies concerning the role of appendix in immune response. An early hemagglutinin response of mercaptoethanol sensitive antibody(IgM antibody) in rabbit injected intravenously(i.v.) with 200mcg of bovine gamma globulin(BGG) was abolished by lethal whole body irradiation(900 r), but preserved in animals whose appendix and bone marrow were shielded during irradiation. Late formation of mercaptoethanol resistant antibody(IgG antibody) and the development of memory in bone marrow shielded animals were not affected by irradiation of the appendix. Formation of either IgM or IgG antibody to sheep red blood cells(SRBC) injected i.v. as determined by direct plaque forming cell(DPFC) technique in spleen were effectively abolished by appendectomy, thymectomy, or both followed by irradiation. When bone marrow was shielded in combination with autologous appendix reconstitution, DPFC response was about 5 times greater than the sum of two. Lysed appendix cells failed to restore the response. Lethally irradiated rabbits restored with combination of autologous appendix and thymus cells showed DPFC responses which were essentially normal. Three pools of appendix were obtained by manual separation technique and were stimulated with soluble concanavalin A(Con A), phytohemagglutinin-P(PHA) and pokeweed mitogen(PWM). Rabbit appendix cells responded to Con A, PHA and PWM. Cells of thymus dependent area(TDA) of the appendix were relatively enriched in their response to T cell mitogens compared to dome and follicle cells. The PHA/Con A responsive ratio of appenix TDA subpopulation was high, indicating that Con A responsive cells have a wider distribution among appendix. This finding showed that interfollicular area of the appendix is thymus-dependent. The present studies confirmed other evidence that the rabbit appendix cells itself are unable to form antibody and T lymphocytes in appendix TDA may be heterogenous, and that the appendix cells are synergistic with either bone marrow or thymus cells in the early hemagglutinin on splenic antibody response to BGG or SRBC.
우백혈병 바이러스감염 B 세포주(BL2M3 및 BL312)의 배양상층액에 대한 자기세포들의 증식반응을 검토하였다. 그 결과 BL2M3 및 BL312세포의 배양상층액을 자기세포인 BL2M3세포에 첨가했을 때 농도에 비례하여 현저한 증식을 유도하였다. 이것은 배양 4-5일차, 배양상층액의 첨가농도는 50-60%,세포수는 5x$10^4$-5x$10^{5}$ /ml에서 최적의 증식반응을 보였다. 우태아혈청(FBS) 무첨가 BL2M3 및 BL312세포의 배양상층액에 대해서도 BL2M3세포는 동일한 증식반응을 보였다. 한편 BL2M3 및 BL312세포의 배양상층액을 BL312세포에 첨가했을 때는 BL2M3세포의 경우에 비해 현저하지 않았다. 또한 BL2M3 및 BL312세포의 배양상층액은 말초혈액 림프구에 대해서도 pokeweed mitogen(PWM)첨가 유무에 관계없이 증식을 유도하였다. 그러나 PWM자극 말초혈액 단핵세포의 배양상층액은 BL2M3 및 BL312세포에 대해서 전혀 증식을 유도하지 못했다. 이상의 결과로부터 우백혈병 바이러스감염 B세포주 특히 BL2M3세포는 세포자신이 증식인자를 분비하고 그것과 반응하여 증식하는 소위 autocrine growth 양상을 보이는 것으로 판명되었다.
The experiments were conducted to determine effects of a mixture of conjugated linoleic acid (CLA) isomers on T cell subpopulations and responsiveness to mitogen of splenocytes in male broiler chicks. In experiment 1, birds (8-d old) were fed basal, CLA-(CLA) and safflower oil-supplemented (SA) diets which were formulated by supplementary 10 g CLA or safflower oil/kg to the basal diet for 14 d. Broiler starter diet, which mainly consisted of corn and soybean meal, was served as the basal diet. Proliferative response and interleukin (IL)-2-like activity stimulated by concanavalin (Con) A at a concentration of $10{\mu}g/ml$ of splenocytes in chicks fed the CLA diet were greater than in chicks fed the SA diet, but not at $20{\mu}g$ Con A/ml. Percentage of CD3-positive T cells in splenocytes did not differ between chicks fed the SA diet and CLA. Ratio of CD4-positive T cells to CD8- positive T cells was significantly affected by dietary fat source. In experiment 2, broiler chicks (1-d old) were fed the same diets as in experiment 1 for 14 d. Results of splenocyte proliferation to Con A were similar to those in experiment 1, but phytohemaggulutinin (PHA)- or pokeweed mitogen (PWM)- induced splenocyte proliferation did not differ between the CLA and SA fed groups. Supplementation with SA or CLA to the basal diet tended to have a depressive effect on the proliferation, with the greater effect being that of SA. In experiment 3, effect of an addition of CLA to splenocyte culture medium on splenocyte proliferation was determined. An addition of CLA to the culture medium resulted in reduction of the splenocyte proliferation to Con A, but an addition of linoleic acid. When PWM and PHA were used as mitogen, the inhibitory effect of CLA and linoleic acid on the proliferation did not differ. The results suggested that the effect of dietary CLA on splenocyte proliferation was similar to that of SA, although the effect of dietary CLA on sub-populations was slightly different from that of dietary SA. Further studies are needed to clarify whether use of CLA would be beneficial for maintaining or enhancing T cell immunity in chicks.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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