Silymarin is an antihepatotoxic substance isolated from the fruits of silybum mariamum. Possibly due to their antioxidant and membrane stabilizing properties, the compounds was shown to protect various organs and cells against a number of insults (Kvasnicka et al., 2003). Among the main silymarin components, [silybin($SB_A,\;SB_B$, isosilybin ($ISB_A,\;ISB_B$) silydianin (SD) and silychristin (SC)], silybin is the major pharmacologically active compound. Korean Pharmaceutical Codex (2nd ed.) describes silybin as the main substance of Cardus Marianus extract as supportive treatment of chronic inflammatory liver disorders. The aim of this work was to analyze silybin from various preparations containing cardus marianus extract, nicotinamide, and riboflavin (CNR). Nine commercial products were tested using reversed-phase HPLC-PDA assay. The limits of detection and quantification were $0.2\;{mu}g/ml$ and $1\;{mu}g/ml$, respectively. Calibration curve showed a good linearity ($r^2$=1.00000) in the range of $1{\sim}500\;{\mu}g/ml$ of silybin standard solutions.
Cuscuta chinensis Lam. and Cuscuta japonica Choisy are parasitic plants. C. chinensis seeds were traditionally used for treatment of kidney and liver deficiencies. C. japonica seeds were used as tonic medicine to improve liver function and strengthen kidneys, treatment of high blood pressure, chronic diarrhea, and sore eyes. Cuscutae Semen are seeds of only C. chinensis in Korean Herbal Pharmacopoeia (K.H.P.). The developed HPLC-PDA method easily, accurately, and sensitively quantified using eight marker compounds [hyperoside (1), astragalin, (2), quercetin (3), kaempferol (4), chlorogenic acid (5), 3,4-di-O-caffeoylquinic acid (6), 1,5-di-O-caffeoylquinic acid (7), and 4,5-di-O-caffeoylquinic acid (8)]. In addition, the method may be used to distinguish seeds between C. chinensis Lam. and C. japonica Choisy. Furthermore, the result from the current study was applied to clarify samples between steam processed and unprocessed samples of C. chinensis by pattern analysis.
손바닥선인장으로부터 기능성식품 개발을 위하여 최적의 에탄올 추출물 탐색과 HPLC-PDA 분석방법에 의한 validation을 실시하였다. 지표성분으로 dihydrokaempferol (DHK)과 3-O-methylquercetin(3-MeQ)을 선정하여 표준화를 실시하였으며 검출법 확립을 위한 정량분석은 Luna RP-18 칼럼($4.6{\times}250mm$, $5{\mu}m$)을 이용하여 1% 인산용액과 아세토니트릴을 전개 용매로 사용하였다. 용출은 1.0 mL/min의 유속으로 기울기 용출(gradient elution) 방법을 이용하였으며, 280 nm 파장에서는 DHK를, 360 nm 파장에서는 3-MeQ를 검출한 피크 면적을 이용하여 검량곡선을 작성하여 분석하였다. 본 연구에서 확립한 분석법으로 특이성, 직선성, 정밀성, 정확성, 회수율을 검색하였다. DHK의 검량선으로부터 상관계수($R^2$) 0.9998의 우수한 직선성과 intra-day와 inter-day 분석에서 97% 이상의 회수율과 3% 미만의 RSD를 나타내 정밀성과 정확성을 입증하였다. 3-MeQ의 검량선으로부터 상관계수($R^2$) 1의 우수한 직선성과 intra-day와 inter-day 분석에서 95% 이상의 회수율과 7% 미만의 RSD를 나타내 정밀성과 정확성을 입증하였다. DHK의 검출한계는 $1.38{\mu}g/mL$, 정량한계는 $4.18{\mu}g/mL$로 나타났으며, 3-MeQ의 검출한계는 $3.49{\mu}g/mL$, 정량한계는 $10.6{\mu}g/mL$로 나타났다. 손바닥선인장 에탄올 추출물(OFSEs)은 70과 $80^{\circ}C$에서 50, 70, 80% 에탄올로 3, 4, 5, 6시간 동안 각각 추출하였으며, 지표물질의 검량곡선을 활용하여 각각의 OFSEs로부터 두 종의 지표물질 함량을 분석하였다. 본 시험법으로 분석한 지표물질의 함량은 $80^{\circ}C$에서 추출한 70% OFSE가 DHK $26.42{\pm}0.65mg/OFS100g$, 3-MeQ $3.88{\pm}0.29mg/OFS100g$의 함량을 나타내 가장 우수하게 나타났다. 다양한 OFSEs에 대하여 DPPH 자유 라디칼 소거효능과 쥐의 간 균질액을 이용한 지질과산화 저해 효능에 대한 항산화 효능은 지표물질의 함량이 가장 높은 70% OFSE에서 우수한 효능을 나타내 본 연구에서 확립한 원료 표준화를 위한 적합한 분석법임이 검증되었다. 따라서 본 연구를 통하여 HPLC-PDA를 이용한 손바닥선인장 에탄올 추출물의 DHK와 3-MeQ의 분석법은 개별인정형 건강 기능식품 기능성 원료 개발을 위한 유용한 자료로 활용될 것으로 생각한다.
출토복식은 조선시대 복식문화를 알 수 있는 중요한 자료들이다. 그 중에서도 염직물들은 복식의 문화사적 연구뿐만 아니라 보존과학적 연구 및 유물복원을 위해 꼭 필요한 자료들이다. 그러나 매장환경에서 오랜 기간 동안 영향을 받으면서 색은 변퇴색되었으며 발굴 후에도 점차 퇴색되어가므로 본래의 색을 추정하기가 어렵다. 이에 본 연구에서는 적색, 황색, 자색, 청색의 천연염색포 표준시료를 제작하여 고속액체크로마토그래피(High Performance Liquid Chromatography with Photodiode Array Detector, 이하 HPLC-PDA)에 의해 분석하고, 같은 방법으로 출토염직물에 남아있는 색소를 추출하여 분석함으로써 출토직물의 염료분석을 시행하였으며 당시의 색을 추정하기 위해 전자현미경(Scanning electron microscope 이하 SEM)에 연결된 에너지 분산형 원소분석장치(Energy Dispersive X-ray Spectroscopy 이하 EDX)를 이용하여 매염제 분석을 시행하였다. 본 실험을 위해 16~17세기 출토직물편으로 대전시 송천동 출토 은진송씨 송문창 출토직물 2점과 대전시 목달동 출토 여산송씨 송희종 출토직물 1점 등 3점을 사용하였으며, 분석결과 alizarin, purpurin, indigo, ellagic acid 등의 색소가 검출되어 꼭두서니-쪽의 중복염색, 꼭두서니 염색, 석류-쪽의 중복염색 등의 결과를 얻을 수 있었으며 매염제로는 모든 유물에서 Al이 검출되었다.
Le, Duc Dat;Nguyen, Duc Hung;Zhao, Bing Tian;Min, Byung Sun;Song, Si Whan;Woo, Mi Hee
Natural Product Sciences
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제25권2호
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pp.122-129
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2019
The roots of Phlomis umbrosa (Turcz.) (Phlomidis Radix) have been traditionally used to treat cold, reduce swelling and staunch bleeding. Four iridoids (1 - 3 and 5) and six phenylethanoid derivatives (4, and 6 - 10) were isolated from the roots of P. umbrosa. A simple, sensitive, and reliable analytical HPLC/PDA method was developed, validated, and applied to determine 10 marker compounds in Phlomidis Radix. Furthermore, the isolates were evaluated for cytotoxic and anti-oxidant activities as well as DPPH-HPLC method. Among them, compounds 4 and 6 - 9 displayed potent anti-oxidant capacities using DPPH assay with $IC_{50}$ values of $27.7{\pm}2.4$, $10.2{\pm}1.1$, $18.0{\pm}0.8$, $19.1{\pm}0.3$, and $19.9{\pm}0.6{\mu}M$, and compounds 6, 8, and 9 displayed significant cytotoxic activity against HL-60 with $IC_{50}$ values of $35.4{\pm}3.1$, $18.6{\pm}2.0$, and $42.9{\pm}3.0{\mu}M$, respectively.
가시오가피에서 Polyacetylene 성분 중 falcarinol을 탐색하기 위해 TLC, HPLC/PDA, GC, GC/MS를 이용하여 falcarinol 표준품과 소분획물 사이의 비교 분석을 통하여 가시오가피에서 falcarinol을 동정하였다. 가시오가피 추출물을 silica gel column상에서 용매의 극성차이에 의해 6개의 분획물을 얻었고, 6개의 분획물과 falcarinol 표준품과의 TLC 상에서 전개시킨 결과 fraction 6 분획물에서 falcarinol과 동일 band의 물질을 분리하였다. Fraction 6의 분획물과 falcarinol 표준품을 HPLC/PDA로 분석한 결과 falcarinol 표준품의 peak와 동일 retention time의 peak를 fraction 6에서 분리하여 200-340nm 상에서 UV spectrum을 관찰한 결과 동일한 UV spectrum pattern을 보이는 것을 확인하였다. 이는 전형적인 polyacetylene 화합물의 UV spectrum pattern이었으며, 기존에 보고된 falcarinol의 UV spectrum과도 동일하였다. GC로 TMS 유도체화 전,후의 retention time을 확인한 결과 표준품과 fraction 6에서 동일한 결과를 보였다. TMS 유도체화 후에는 7.5분에서 8.5분으로 약 1분 정도 retention time이 증가하였고, detection 감도 또한 증가하였다. Falcarinol 표준품과 fiaction 6 분획물을 TMS 유도체화 후에 GC/MS로 mass fragment ion을 분석한 결과 표준품과 동일한 경향을 보였고 이는 기존의 보고와도 일치하였다(16). 본 실험결과들로 미루어 가시오가피에도 polyacetylene 성분인 falcarinol 존재하는 것으로 확인되었다.
Yen, Nguyen Thi;Thu, Nguyen Van;Zhao, Bing Tian;Lee, Jae Hyun;Kim, Jeong Ah;Son, Jong Keun;Choi, Jae Sui;Woo, Eun Rhan;Woo, Mi Hee;Min, Byung Sun
Bulletin of the Korean Chemical Society
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제35권7호
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pp.1956-1964
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2014
To provide the scientific corroboration of the traditional uses of Akebia quinata (Thunb.) Decne., a detailed analytical examination of A. quinata stems was carried out using a reversed-phase high performance liquid chromatography (RP-HPLC) method coupled to photodiode array detector (PDA) for the simultaneous determination of four phenolic substances; cuneataside D (1), 2-(3,4-dihydroxyphenyl)ethyl-O-${\beta}$-D-glucopyranoside (2), 3-caffeoylquinic acid (3) and calceolarioside B (4). Particular attention was focused on the main compound, 3-caffeoylquinic acid (3), which has a range of biological functions. In addition, 2-(3,4-dihydroxyphenyl)ethyl-O-${\beta}$-D-glucopyranoside (2) was considered as a discernible marker of A. quinata from its easy confuse plants. The contents of compounds 2 and 3 ranged from 0.72 to 2.68 mg/g and from 1.66 to 5.64 mg/g, respectively. The validation data indicated that this HPLC/PDA assay was used successfully to quantify the four phenolic compounds in A. quinata from different locations using relatively simple conditions and procedures. The pattern-recognition analysis data from 53 samples classified them into two groups, allowing discrimination between A. quinata and comparable herbs. The results suggest that the established HPLC/PDA method is suitable for quantitation and pattern-recognition analyses for a quality evaluation of this medicinal herb.
Semi-micro-HPLC using a column-switching technique was developed for simultaneous determination of vitamin A and E contents in infant formula. Vitamin A and E were extracted by PDA - HPLC with reversed phase column using organic solvent and their contents in Certified Reference Material (CRM) and infant formula were determined and compared with hydrolysis method and rapid extraction. Developed method has many advantages of simple and rapid sample preparation and simultaneous determination of vitamin A and E by micro-HPLC using reversed phase column.
Zhao, Bing Tian;Song, Si Whan;Le, Duc Dat;Ma, Eun Sook;Son, Jong Keun;Woo, Mi Hee
분석과학
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제32권6호
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pp.217-224
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2019
In this study, to evaluate the effectiveness and safety of oral therapy using Gastrodiae Rhizoma, a new HPLC-PDA analysis method was developed for the simultaneous quantitation of the three major components: (1) gastrodin, (2) gastrodigenin, and (3) p-hydroxybenzaldehyde, in steam processed and unprocessed tubers of Gastrodia elata Blume. The clear separation of the three components was achieved on a C18 column (250 × 4.6 mm, 5 ㎛) by gradient elution using water (including 0.1 % formic acid) and acetonitrile as the mobile phase. The flow rate was 1.0 mL/min, and the UV detector wavelength was set at 270 nm. The results demonstrate satisfactory linearity, recovery, precision, accuracy, stability, and robustness. The established HPLC-PDA method was applied to quantify three major compounds in 59 samples of G. elata Blume tubers. Finally, the steam processed and unprocessed tubers of G. elata Blume were successfully distinguished by pattern recognition analysis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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