The effects of hypothermic treatment ($32^{\circ}C$) on recovery from ischemia are controversial because the precise mechanisms of hypothermia remain unclear. We demonstrated previously that hypothermia induces beta-catenin-interacting protein 1 (CTNNBIP1) gene expression in vitro. In this study, we evaluated the effects of various hypothermic conditions, including lithium chloride treatment, on CTNNBIP1 gene expression. The results show that short-term hypothermic treatment resulted in relatively higher CTNNBIP1 gene expression than that of a longer treatment. These findings indicate that hypothermia controls CTNNBIP1 gene expression, which may provide clues to develop treatments to recover from and diagnose ischemia.
Park, Rackhyun;Lee, Kang Il;Kim, Hyunju;Jang, Minsu;Ha, Thi Kim Quy;Oh, Won Keun;Park, Junsoo
Natural Product Sciences
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v.23
no.3
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pp.157-161
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2017
Reserpine is a well-known medicine for the treatment of hypertension, however the role of reserpine in cell signaling is not fully understood. Here, we report that reserpine treatment induces the phosphorylation of AMP activated protein kinase (AMPK) at threonine 172 (T172) in PC12 cells. Phosphorylation of AMPK T172 is regulated by upstream signaling molecules, and the increase of phospho-T172 indicates that AMPK is activated. When we examined the FOXO3a dependent transcription by using the FHRE-Luc reporter assay, reserpine treatment repressed the FHRE-Luc reporter activity in a dose dependent manner. Finally, we showed that reserpine treatment induced the phosphorylation of AMPK as well as cell death in MCF-7 cells. These results suggest that AMPK is a potential cellular target of reserpine.
To develop a new antidementia acetycholinesterase (AChE) inhibitor from edible mushrooms, the inhibitory effects on AChE of water and ethanol extracts from various edible mushrooms were measured. Among the tested compounds, 70% ethanol extracts from Tremella fuciformis showed the highest AChE inhibitory activity, at 25.3% (IC50: 9.9 mg). Water extracts from the fruiting body of Pleurotus ostreatus (Heuktari) showed AChE inhibitory activity of 20.2% (IC50: 12.4 mg). However, the yield (40.8%) from Pleurotus ostreatus (Heuktari) was higher than that from Tremella fuciformis (5.0%). Therefore, we selected Pleurotus ostreatus (Heuktari) as the most promising candidate for a mushroom containing anti-dementia AChE inhibitors. The AChE inhibitor from Pleurotus ostreatus (Heuktari) was optimally extracted when its fruiting body was treated with water for 6 h at 30℃. The anti-dementia effects of the partially purified AChE inhibitor from Pleurotus ostreatus (Heuktari) were observed in PC12 nerve cells.
Charcot-Marie-Tooth disease (CMT) is blown as one of the inherited disorder of peripheral nervous system. Recently, it was found that point mutations in the neurofilament light subunit (NF-L) gene cause CMT. Neurofilaments (NFs) are heteropolymers consist of NF-L, NF-M and NF-H. To assess the relationship between CMT and NF-L mutation in cellular level, we performed phenotypic analysis of the mutant NF-L (E397K) using cultured cell lines. Vimentin-deficient human adrenal carcinoma SW13 (Vim-) cells have a potential to form the intermediate filaments when the cells are expressing both NF-L and NF-M. Our results show that co-expression of wild type NF-L with NF-M showed intermediate filament formation in SW13 (Vim-) cells, while E397K with NF-M did not. This result means that E397K mutant lost its ability to form the intermediate filament in vivo, and further suggests that the E397K mutation is closely related to CMT.
Background: Prostate cancer is predominately a disease of older men, with a median age of diagnosis of 68 years and 71% of cancer deaths occurring in those over 75 years of age. While prostate cancer screening is not recommended for men >70 years, fit elderly men with controlled comorbidities may have a relatively long life expectancy. We compare the use of age related PSA with the detection of primary malignant circulating prostate cells mCPCs to detect clinically significant PC in this population. Materials and Methods: All men undergoing PC screening with a PSA >4.0ng/ml underwent TRUS 12 core prostate biopsy (PB). Age, PSA, PB results defined as cancer/no-cancer, Gleason, number of positive cores and percentage infiltration were registered. Men had an 8ml blood sample taken for mCPC detection; mononuclear cells were obtained using differential gel centrifugation and mCPCs were identified using immunocytochemistry with anti-PSA and anti-P504S. A mCPC was defined as a cell expressing PSA and P504S; a positive test as at least one mCPC detected/sample. Diagnostic yields for subgroups were calculated and the number of avoided PBs registered. Esptein criteria were used to define small grade tumours. Results: A total of 610 men underwent PB, 398 of whom were aged <70yrs. Men over 70 yrs had: a higher median PSA, 6.24ng/ml versus 5.59ng/ml (p=0.04); and a higher frequency of cancer detected 90/212 (43%) versus 134/398 (34%) (p=0.032). Some 34/134 cancers in men <70yrs versus 22/90 (24%) of men >70yrs complied with criteria for active surveillance. CPC detection: 154/398 (39%) men <70yrs were CPC (+), specificity for cancer 86%, sensitivity 88%, 14/16 with a false (-) result had a small low grade PC. In men >70 years, 88/212 (42%) were CPC (+); specificity 92%, sensitivity 87%, 10/12 with a false (-) had small low grade tumours. False (+) results were more common in younger men 36/154 versus 10/88 (p<0.02). With a PSA cutoff of 6.5ng/ml, in men <70yrs, 108 PB would be avoided, missing 56 cancers of which 48 were clinically significant. Using CPC detection, 124 biopsies would be avoided, missing only 2 clinically significant cancers. In men >70 yrs using a PSA >6.5ng/ml would have resulted in 108 PB with 34 PC detected, of which 14(41%) were small low grade tumours. Conclusions: The use of CPC detection in the fit elderly significantly decreases the number of PBs without missing clinically significant cancers, indicating superiority to the use of age-related PSA.
Park, Eun-kuk;Han, Kyung-Hoon;Heo, Jae-Hyeok;Kim, Nam-Ki;Bae, Mun-Hyoung;Seo, Young-Ha;Yong, Yoon-joong;Jeong, Seon-Yong;Choi, Chun-Whan
The Korean Journal of Food And Nutrition
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v.33
no.3
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pp.347-355
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2020
Cognitive impairment is considered to be key research topics in the field of neurodegenerative diseases and in understanding of learning and memory. In the present study, we investigated neuroprotective effects of Schisandra chinensis (SC) and Ribes fasciculatum (RF) extracts in hydrogen peroxide-induced neuronal cell death in vitro and scopolamine-induced cognitive impairment in Sprague Dawley® (SD) rat in vivo. Apoptotic cell death in neuroblastic PC12 cell line was induced by hydrogen peroxide for 1 hour at 100 μM. However, mixture of SC and RF treatment prevented peroxide induced PC12 cell death with no neurotoxic effects. For in vivo experiment, the effect of SC and RF extracts on scopolamine-induced cognitive impairment in SD rat was evaluated by spontaneous alternation behavior in Y-Maze test. After 30 min scopolamine injection, the scopolamine-induced rats presented significantly decreased % spontaneous alteration and acetylcholine level, compared to non-induced group. However, treatment of SC+RF extracts rescued the reduced % spontaneous alteration with acetylcholine concentration from hippocampus in scopolamine-induced rats. These results suggested that mixture of SC and RF extract may be a potential natural therapeutic agent for the prevention of cognitive impairment.
Gilson Khang;Jeon, Eun-Kyung;John M. Rhee;Lee, Ilwoo;Lee, Sang-Jin;Lee, Hai-Bang
Macromolecular Research
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v.11
no.5
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pp.334-340
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2003
In order to fabricate new sustained delivery device of nerve growth factor (NGF), we developed NGF-loaded biodegradable poly(L-lactide-co-glycolide) (PLGA, the mole ratio of lactide to glycolide 75:25, molecular weight: 83,000 and 43,000 g/mole, respectively) film by novel and simple sandwich solvent casting method for the possibility of the application of neural tissue engineering. PLGA was copolymerized by direct condensation reaction and the molecular weight was controlled by reaction time. Released behavior of NGF from NGF-loaded films was characterized by enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) and degradation characteristics were observed by scanning electron microscopy (SEM) and gel permeation chromatography (GPC). The bioactivity of released NGF was identified using a rat pheochromocytoma (PC-12) cell based bioassay. The release of NGF from the NGF-loaded PLGA films was prolonged over 35 days with zero-order rate of 0.5-0.8 ng NGF/day without initial burst and could be controlled by the variations of molecular weight and NGF loading amount. After 7 days NGF released in phosphate buffered saline and PC-12 cell cultured on the NGF-loaded PLGA film for 3 days. The released NGF stimulated neurite sprouting in cultured PC-12 cells, that is to say, the remained NGF in the NGF/PLGA film at 37 $^{\circ}C$ for 7 days was still bioactive. This study suggested that NGF-loaded PLGA sandwich film is released the desired period in delivery system and useful neuronal growth culture as nerve contact guidance tube for the application of neural tissue engineering.
Erythropoietin (EPO), a hematopoietic factor, is required for normal erythrocyte developments, but it has been demonstrated to have many other functions, and its receptor is localized in other tissues. In the present study, we investigated whether EPO can promote other cell proliferation and possible molecular mechanisms. EPO restored the inhibition of the RAW264.7 and PC12 cell growth by fetal bovine serum (FBS) withdrawal in a dose dependent manner, but not that of other cell types tested. The restoring effect of EPO was completed when the RAW264.7 cells were cultured in the medium containing as low as 3% of FBS, and 10 U/mL EPO could replace FBS. The restoring effect of EPO in the RAW264.7 cells was associated with the increased of c-Fos and c-Jun expression as well as AP-1 activation. These data demonstrate that EPO can stimulate RAW264. 7 cell as well as PC12 cell growth even when the cells were cultured without FBS or in the presence of small amounts of FBS in the medium, and this stimulating effect is associated with the activation of AP-1 transcription factor.
The effect of KamiTongJonHaaATang extracts on hypercholesterolemia, platelet aggregation, pulm onary thrombosis, KCN-induced coma, forcal brain ischemia, cytotoxicity of PC12 cells induced by amyloid ${\beta}$ protein(25-35), and NO production in RAW cells stimulated lipopolysaccharide were investigated, respectively. The results were summarized as follows; 1. KTJHAT extracts showed a significant decrease of serum total cholesterol, triglyceride, phospholipid, LDL-cholesterol, and VLDL-cholesterol in hypercholesterolemia induced by 2% cholesterol diet in NZW rabbit. 2. KTJHAT extracts induced a significant inhibition of human platelet aggregation induced by thrombin and ADP but did not affect human platelet aggregation induced by collagen. 3. KTJHAT extracts showed a protective effect on pulmonary thrombosis induced by collagen and epinephrine. 4. KTJHAT extracts prolonged the duration of KCN-induced coma. 5. KTJHAT extracts showed a significant decrease of brain ischemic area and edema in MCA occlusion. Also, KTJHAT extracts showed a decrease of neurologic grade in hind limb but did not affect neurologic grade in fore limb. 6. KTJHAT extracts showed a protective effect on cytotoxicity of PC 12 cells induced by amyloid ${\beta}$ protein(25-35) in a dose dependent manner. 7. KTJHAT extracts showed a significant decrease of NO production in RAW cells induced by lipopolysaccharide. These results suggested that KTJHAT extracts might be usefully applied for prevention and treatement of thrombosis and brain damage.
Although nucleolar protein nucleostemin (NS) is essential for cell proliferation and early embryogenesis and expression has been observed in some types of human cancer and stem cells, the molecular mechanisms involved in mediation of cell proliferation and cell cycling remains largely elusive. The aim of the present study was to evaluate NS as a potential target for gene therapy of human breast carcinoma by investigating NS gene expression and its effects on SKBR-3 cell proliferation and apoptosis. NS mRNA and protein were both found to be highly expressed in all detected cancer cell lines. The apoptotic rate of the pcDNA3.1-NS-Silencer group ($12.1-15.4{\pm}3.8%$) was significantly higher than those of pcDNA3.1-NS ($7.2-12.0{\pm}1.7%$) and non-transfection groups ($4.1-6.5{\pm}1.8%$, P<0.01). MTT assays showed the knockdown of NS expression reduced the proliferation rate of SKBR-3 cells significantly. Matrigel invasion and wound healing assays indicated that the number of invading cells was significantly decreased in the pcDNA3.1-NS-siRNA group (P<0.01), but there were no significant difference between non-transfected and over-expression groups (P>0.05). Moreover, RNAi-mediated NS down-regulation induced SKBR-3 cell G1 phase arrest, inhibited cell proliferation, and promoted p53 pathway-mediated cell apoptosis in SKBR-3 cells. NS might thus be an important regulator in the G2/M check point of cell cycle, blocking SKBR-3 cell progression through the G1/S phase. On the whole, these results suggest NS might be a tumor suppressor and important therapeutic target in human cancers.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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