• 제목/요약/키워드: PBMC

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프랑킨센스 에센셜 오일 흡입이 OVA로 유도된 알러지성 천식 모델 생쥐에 미치는 영향 (The Effect of Nebulized Frankincense Essential Oil in an OVA-Induced Allergic Asthma Mouse Model)

  • 이혜연;김금란;강상모
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제38권1호
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    • pp.93-104
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    • 2010
  • 프랑킨센스 에센셜 오일(BSEO)이 알러지성 천식 생쥐 모델의 폐, BALF 및 PBMC 내 면역세포 변화에 미치는 영향을 조사하였다. 본 연구는 Balb/c 생쥐를 이용하여 실험 1일에 $100\;{\mu}g$ ovalbumin (OVA)을 복강 내 투여하고, 실험 14일에 $50\;{\mu}g$ OVA를 기도 내 투여하여 감작시킨 후 OVA를 반복 흡입시켜 천식을 유발하였다. 천식 유발 생쥐군에 0.3% BSEO를 8주간, 1주에 3회, 1회에 30분간 nebulizer로 흡입시켰고, 실험일로부터 총 12주 후에 살처분시켜 폐, 기관지 폐포 세척액 (bronchoalveolar lavage fluid; BALF), 말초혈액단핵세포 (peripheral blood mononuc1ear cell; PBMC)를 분리하여 조직 내의 면역세포 변화를 관찰하였다. 본 연구 결과 알러지성 천식 유발 생쥐에서 기관지 수축제에 대한 기도 과민성반응이 천연 아로마 에센셜 오일군인 Bergamot군, Eucalyptus군, Chamomile군, Marjoram군, 및 Frankincense군 중 Frankincense군에서 효과적으로 억제됨을 확인하였다. 또한 알러지성 천식유발로 증가한 폐무게, 총폐포수, BALF수, MNL, DLN수가 억제됨을 확인하였다. BSEO는 알러지성 천적 모델 생쥐의 폐 조직 내의 $CD3e^+/CD19^-$, $B220^+/CD23^+$, $CD11b^+/Gr-1^+$ 세포 비율을 억제하였으며 BALF 내의 $CD4^+/CD8^-$, $B220^+/CD23^+$, $CD3e^+/CCR3^+$ 세포비율을 억제하였다. 또한 PBMC내 $CD3e^+/CD19^-$, $CD3^+/CD69^+$, $B220^+/CD23^+$ 세포비율을 억제하였다. 이러한 결과는 BSEO가 각 조직내의 면역세포의 활성 억제를 통한 면역조절작용으로 알러지성 천식의 치료에 효과적일 것으로 사료되었다.

Comparison of immune cell populations in bronchoalveolar lavage cells and PBMC cytokine expressions in porcine reproductive and respiratory syndrome and porcine respiratory disease complex

  • Yang, Myeon-Sik;Jeong, Chang-Gi;Nazki, Salik;Mattoo, Sameer ul Salam;Lee, Sang-Myeong;Kim, Won-Il;Kim, Bumseok
    • 한국동물위생학회지
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    • 제42권4호
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    • pp.201-216
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    • 2019
  • Porcine reproductive and respiratory syndrome (PRRS) is characterized by reproductive failure in sows and respiratory distress in all age pigs. Porcine respiratory disease complex (PRDC) is a disease caused by opportunistic bacterial infection secondary to a weakened immune system by a preceding respiratory infection. In this study, we tried to compare the immune responses in PRRS and PRDC groups to clearly characterize the disease severity. Eighty-five pigs were infected with various Korean field PRRS virus strains. Infected animals were classified into PRRS (n=32) and PRDC (n=53) groups based on lung lesions such as interstitial pneumonia, suppurative pneumonia, and pleuropneumonia. The immune cell population of bronchoalveolar lavage cells (BALc) was evaluated on 14 and 28 days post infection (dpi) and PMBC cytokine expression was measured on 0, 3, 7, 14 dpi to investigate early inflammatory reactions. Pulmonary lesion severity was negatively correlated with alveolar macrophage (AM) in both PRRS and PRDC groups on 14 and 28 dpi. AM in BALc was less populated in PRDC group on 28 dpi compared to PRRS group. AM in BALc was significantly less populated in PRDC group on 28 dpi compared to 14 dpi. In addition, cytotoxic T lymphocyte (CTL) in BALc was higher populated in PRDC group on 14 dpi and 28 dpi compared to PRRS group. In the case of PBMC cytokine TNF-α, IFN-α, IL-1β, IFN-γ, FoxP3, and IL-2, the PRRS group showed higher expression than the PRDC group on 7 dpi, 14 dpi, 7 dpi, 14 dpi, 14 dpi, and 14 dpi, respectively. On the other hand, in the case of IFN-β, IL-6, IL-8, IL-4, and IL-17, the PRDC group showed higher PBMC cytokine expression at 14 dpi, 7 dpi, 14 dpi, 3 dpi, and 3 dpi, respectively, than the PRRS group. Based on these results, our study could characterize differential immune responses in pigs with PRRS or PRDC.

LPS로 자극한 돼지 말초혈액 단핵구세포의 Nitric Oxide (NO) 생산 및 Activator Protein-1 (AP-1) 활성화에 있어 Fucoidan의 효과 (Effects of Fucoidan on Nitric Oxide Production and Activator Protein-1 Activation in Lipopolysaccharide-Stimulated Porcine Peripheral Blood Mononuclear Cells)

  • 박종찬;안창환;강병택;강지훈;정의배;양만표
    • 한국임상수의학회지
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    • 제32권4호
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    • pp.289-294
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    • 2015
  • Fucoidan은 갈조류로부터 추출되는 황산다당류로 다양한 생리학적 활성을 갖고 있다. 본 연구의 목적은 LPS로 자극한 돼지 말초혈액 단핵구세포(PBMCs)의 NO 생산에 있어 fucoidan의 효과를 검토하고, 이러한 효과가 iNOS의 발현과 AP-1의 활성화와 관련이 있는지를 조사하는데 있다. LPS 무처치 돼지 PBMCs에서 fucoidand의 처리는 NO 생산과 AP-1활성에 대해 효과를 보이지 않았다. 또한 iNOS와 AP-1의 mRNA 발현도 fucoidan 처치에 의해 영향을 받지 않았다. 그러나 LPS로 자극한 PBMCs에서는 NO 생산과 AP-1의 활성 그리고 iNOS와 AP-1의 mRNA 발현이 현저하게 증가하였다. 이와 같은 LPS에 의한 돼지 PBMCs의 NO 생산과 AP-1 활성증가는 fucoidan 첨가에 의해 감소되었다. 또한 fucoidan은 LPS에 의한 iNOS와 AP-1의 mRNA 발현증가도 억제시켰다. 이상의 결과는 fucoidan이 LPS 자극 돼지 PBMCs에서 iNOS 발현과 AP-1 활성의 억제와 함께 NO 생산을 하향 조절함으로써 항염증효과를 나타내는 것으로 사료되었다.

Anti-Tumor and Immunoregulatory Effects of Fermented Papaya Preparation (FPP: SAIDO-PS501)

  • Murakami, Shinki;Eikawa, Shingo;Kaya, Savas;Imao, Mitsuko;Aji, Toshiki
    • Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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    • 제17권7호
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    • pp.3077-3084
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    • 2016
  • Various beneficial effects have been described for fermented papaya preparation (FPP: SAIDO-PS501) based on its anti-oxidative and anti-inflammatory functions. The present study was designed to determine the effects of FPP on carcinogenesis in vivo, and immunomodulatory function in vitro. Mice were injected with RL male 1 cells subcutaneously or 3-methylcholantherene (MCA) intravenously to induce cancer and orally or intraperitoneally treated with FPP solution. Human peripheral blood mononuclear cells (PBMC) were obtained from healthy volunteers and patients with atopic dermatitis, treated with FPP, and subjected to measurement of cytokine production and changes in Foxp3-expressing regulatory T cell (Treg) stimulated with phytohemagglutinin (PHA). Administration of FPP suppressed tumor size and the incidence of malignancy. In vitro, treatment of PBMC with FPP induced IL-$1{\beta}$, $TNF{\alpha}$ and $IFN{\gamma}$ production. Moreover, FPP suppressed proliferation of PHA-stimulated Foxp3-expressing Treg. These results suggest that FPP has chemotherapeutic properties.

Expression Profiles of Immune-related Genes in Fluoxetine-treated Human Mononuclear Cells by cDNA Microarray

  • Lee, Hee-Jae;Jin, Sheng-Yu;Hong, Mee-Suk;Li, Guang-Zhe;Kim, Jong-Woo;Kim, Beom-Sik;Chung, Joo-Ho
    • The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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    • 제7권5호
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    • pp.279-282
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    • 2003
  • To investigate the effect of fluoxetine, one of selective serotonin reuptake inhibitors (SSRIs), on the immune system, human peripheral blood mononuclear cells (PBMC) were treated with fluoxetine $(10^{-7}\;M)$ for 24 h, and immune-related genes were analyzed by cDNA microarray. Expression of the immunerelated genes such as CD107b (LAMP-2), CD47 receptor (thrombospondin receptor), CD5 antigen-like (scavenger receptor cysteine rich family), copine III (CPNE3), interleukin (IL)-18 (interferon-gammainducing factor), integrin alpha 4 (CD49d), integrin alpha L subunit (CD11a), IL-3 receptor alpha subunit, L apoferritin, and small inducible cytokine subfamily A (Cys-Cys) member 13 (SCYA13) was induced by fluoxetine. This result suggests that fluoxetine may affect the immune system, and provides fundamental data for the involvement of SSRIs on immunoregulation.

세균에 노출된 말초혈액 단핵구에서 Interleukin-8과 Monocyte Chemoattractant Protein-1의 형성에 관한 연구 (PRODUCTION OF INTERLEUKIN-8 AND MONOCYTE CHEMOATTRACTANT PROTEIN-1 BY PERIPHERAL BLOOD MONOCYTES STIMULATED WITH MICROBES)

  • 이정민;임미경
    • Restorative Dentistry and Endodontics
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    • 제25권2호
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    • pp.212-218
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    • 2000
  • The recruitment of leukocytes to a site of inflammation is dependent on a complex interplay of a number of cytokines. Monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1) is a potent chemoattractant for monocytes, whereas interleukin-8 (IL-8) has chemotactic activity for neutrophils, lymphocytes, and basophils. The purpose of this study was to determine the effects of several microbes found in infected root canal systems on the production of inflammatoy cytokines, interleukin 8 and monocyte chemoattractant protein-1 from human peripheral blood mononuclear cells (PBMC). Monocytes isolated from peripheral blood were stimulated by group A streptococci (GAS, ATCC 19615), Enterococcus faecalis (ATCC 29212), Streptococcus mutans (ATCC 10449), Streptococcus sanguis (clinical isolate), and Candida albicans (ATCC 90029) respectively. Each of these bacteria induced dose-dependent induction in IL-8 and MCP-1 determined by ELISA. IL-8 production by each bacteria was decreased in the range of the microbe-to-PBMC ratios of 0.1-1.0. Group A streptococci was the week inducer of MCP-1 production. These results suggest that different oral pathogens induce specific dose-dependent patterns of cytokine release. Such patterns may provide a means of control of the type of immune celles particularly with regard to inflammatory leukocyte recruitment.

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내독소에 의한 말초혈액 단핵구의 IL-1beta, IL-6, TNF-alpha와 TGF-beta 생성에 관한 연구 (Lipopolysaccharide-induced Synthesis of IL-1beta, IL-6, TNF-alpha and TGF-beta by Peripheral Blood Mononuclear Cells)

  • 정성환;박춘식;김미호;김은영;장헌수;기신영;어수택;문승혁;김용훈;이희발
    • Tuberculosis and Respiratory Diseases
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    • 제45권4호
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    • pp.846-860
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    • 1998
  • 연구배경: 내독소는 생체 내에서 단구와 내피세포에 강한 자극을 주나 호중구, 림프구, 호염기구, 섬유모세포 등 여러 세포에도 자극효과가 있어 염증반응이 시작된다. 그중 대식세포는 내독소의 자극을 받아 활성화되면 interleukin-1 (IL-1), IL-6, tumor necrosis factor-alpha (TNF-$\alpha$)를 분비하여 조직손상을 일으킨다. 내독소의 작용기전은 CD14 의존성 경로와 비의존성 경로의 두 개로 나뉘어진다. 체내로 들어온 내독소는 혈청 내에서 내독소 운반에 관여하는 LPS-binding protein(LBP)과 결합하여 혈중내에서 세포와 결합되거나 조직으로 이동되어 조직내 세포와 결합하게 된다. 그러나 고농도의 LPS는 CD14항원에 비의존적으로 대식세포를 자극 할 수 있는 것으로 알려져 있다. 현재까지 LPS자극에 의한 대식세포의 CD14 항원 의존성 IL-1, IL-6, TNF-$\alpha$의 형성과정은 많이 밝혀져 있으나, 내독소에 의한 TGF-$\beta$의 형성 여부는 밝혀져 있지 않으며, CD14 항원 비의존성으로 IL-1, IL-6, TNF-$\alpha$ TGF-$\beta$가 형성되는 과정도 별로 밝혀져 있지 않다. 본 연구에서는 혈청이 없는 상태 (LBP가 없는 상태)에서, 즉 LPS 자극시 LBP-CD14 비의존성으로 말초혈액단핵구에서 형성된 proinflammatory cytokines인 IL-1, IL-6, TNF-$\alpha$과 섬유화 cytokine인 TGF-$\beta$의 생성유무를 규명하고자 하였다. 방 법: 정상인의 헤파린 처리된 말초혈액정맥혈을 비중 1.077의 Ficoll-Hypaque 용액 위에 중첩시킨 후 500g에서 30분간 원심분리하여 말초혈액단핵구를 얻었다. 분리된 말초혈액단핵구를 우태아혈청이 없는 RPMI에 부유시킨 후 $37^{\circ}C$, 5% $CO_2$ 보온기에서 0.1 ${\mu}g$, 1 ${\mu}g$, 10 ${\mu}g$, 100 ${\mu}g/ML$의 LPS와 1, 2, 4, 8, 12, 24, 48 시간 혼합 배양 후 상층액을 분리하여 IL-6, TNF-$\alpha$, TGF-$\beta$의 측정 cytokines의 양을 bioassay로 측정하였다. 세포층은 slide에 고정시킨 후 단 클론 항체를 이용한 이중 면역조직화학염색법과 RNA probe를 이용한 in situ hybridization에 이용하였다. 결 과: 실험사약내 내독소 존재 여부에 대한 검증결과 내독소 함유량은 10 ng/mL 이하로 되어 있어 본 실험에서는 10 ng/mL 이상의 농도로 실험을 하였기 때문에 오염된 내독소는 실험에 영향이 없었을 것으로 사료되었다. 말초혈액단핵구에서 LPS 자극에 의하여 IL-6는 1시간째부터 형성되기 시작하였으며 96 시간까지 지속적으로 상승하였고 LPS용량의존성으로 형성됨을 알 수 있었다. TNF-$\alpha$는 LPS 자극 4시간째부터 상승하기 시작하여 시간이 갈수록 생성양은 증가하며 72 시간째까지 지속적으로 형성되었다. TGF-$\beta$형성도 LPS 용량에 의존성을 보이며 8시간째 일차로 TGF-$\beta$의 형성이 증가 한 후 12 시간째는 오히려 감소하였다가 시간이 지남에 따라 다시 증가하여 2차로 96 시간에 최대 형성을 보였다. 각각 cytokine의 24시간째 생성양은 IL-6의 경우 $1{\times}10^5/mL$의 말초혈액단핵구에서 10 ${\mu}g/mL$의 LPS에 의해서 19.8 ng 이 생성되었고 LPS 자극이 없는 상태의 자연생성능도 3.2 ng이었으며, $1{\times}10^6/mL$의 말초혈액단핵구에 의해서 자연 생성양은 증가하여 24시간째에 0.38 ng/mL, 10명/mL의 농도에서 24시간째 4.1 ng/mL의 TNF-$\alpha$의 생성능을 보였다. TGF-$\beta$의 경우 $2{\times}10^6/mL$의 말초혈액단핵구에 의하여 34.4 pg/mL가 생성되었고 자연생성능은 5.2 pg/mL의 생성농을 보였다. 말초혈액단핵구의 IL-1$\beta$, IL-6, TNF-$\alpha$, TGF-$\beta$ 단백과 m-RNA 발현 IL-1$\beta$, IL-6, TNF-$\alpha$단백은 주로 단구세포에서, TGF-$\beta$ 단백은 단구세포와 림프구에서 발현되었으며, CD14항원 발현과는 상관이 없었다. TNF-$\alpha$, IL-1$\beta$, IL-6, TGF-$\beta$ m-RNA 양성세포는 주로 세포질이 풍부한 것으로 보아 단구세포로 사료되었다. TGF-$\beta$의 경우 단구세포외에도 세포질이 적은 림프구에서도 약하게 양성반응을 보여 링프구에서도 분비될 가능성을 보여 주었다. 결 론: 내독소로 말초혈액 단핵구를 자극시 IL-6, TNF-$\alpha$는 조기에 분비되기 시작하며 TGF-$\beta$는 후기에 분비되기 시작하여 96시간까지 지속적으로 분비된다. 주 분비세포는 IL-1$\beta$, IL-6, TNF-$\alpha$의 경우 단구세포가 되며 TGF-$\beta$도 단구세포가 주세포가 되나 림프구도 분비에 관여한다.

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Identification of CM1 as a Pathogenic Factor in Inflammatory Diseases and Cancer

  • Bae, Se-Yeon;Kim, Hyem-In;Yu, Yeon-Sil;Lee, Na-Eun;Kong, Joo-Myoung;Kim, Hang-Rae;Hwang, Young-Il;Song, Yeong-Wook;Kang, Jae-Seung;Lee, Wang-Jae
    • IMMUNE NETWORK
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    • 제11권3호
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    • pp.175-181
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    • 2011
  • Background: CM1 (centrocyte/-blast marker 1) was defined by a mAb against concavabalin-A (ConA) activated PBMC. It is expressed in germinal center of human tonsil and on the surface of activated PBMC as well as cancer cells. Recently, increased productions of pro-inflammatory mediators were detected from activated PBMC by CM1 ligation. Methods: However, there is a limitation to explain the exact role of CM1 on inflammation and its related mechanisms, since the identity of CM1 is still not clarified. In our previous study, we have already confirmed that soluble form of CM1 was produced by Raji. Therefore, we performed Q-TOF analysis after immunoprecipitation of concentrated Raji culture supernatant using anti-CM1 mAbs. Results: As a result, we found that CM1 is identical to enolase-1(ENO1), a glycolytic enzyme, and we confirmed that results by silencing ENO1 using siRNA. It was also confirmed through competition assay between anti-CM1 and anti-ENO1 mAbs. Finally, we investigated the possible role of CM1 in inflammatory response and cancer. The ligation of CM1 on Raji cells with anti-CM1 mAbs induces the extensive production of prostaglandin $E_2(PGE_2)$. In addition, the increased activity of matrix metalloproteinase (MMP)-2/9 was shown in NCI-N87, stomach cancer cell line by CM1 stimulation. Conclusion: CM1 is identical to ENO1 and it might be an important role in the regulation of inflammatory responses.

산란계 사료중 미역과 뱅코마이신이 산란계의 생산성에 미치는 영향

  • 최도열;임진택;박인경;최준영;이혜정;이범규;이호연;박재우;고태송
    • 한국가금학회:학술대회논문집
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    • 한국가금학회 2005년도 제22차 정기총회 및 학술발표회
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    • pp.74-75
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    • 2005
  • 미역사료는 산란계의 질소 균형을 뱅코마이신 사료보다 유의하게(p<0.01) 높였으나 뇨산태 질소 배설량은 두 사료사이에 유의차가 없었다. 체중당 또는 대사 체중($kg^{0.75}$)당 ME 이용성은 미역사료와 뱅코마이신 사료에서 기초사료보다 낮으나, 실험 사료간 유의한 차이는 없었다. 산란계는 미역사료를 가장 많이 섭취(p<0.05)하였고, 산란일량은 미역사료에서 높았으며, 계란 생산성은 실험기간의 경과에 따라 유의하게 감소하였고(p<0.0001), 실험사료 사이에 유의차(p<0.001)가 있었다. 난각 두께는 미역사료가 기초사료보다 높았다. 하우 유니트는 미역사료에서 기초사료보다 높았고, 뱅코마이신 함유사료 급여 시 가장 낮았다. 미역 사료를 급여한 닭은, 기초사료에 비해서, 난백 CuZnSOD 활성, 적혈구의 MnSOD 활성과 혈장 과산화물 분해효소의 활성을 높였으나 혈장 과산화물 농도는 감소시켰고 PHA-P 자극에 의한 PBMC 증식도를 증가시켰다. 본 성적은 미역 2.0%사료는 산란계체내 단백질 합성 증가와 계란 생산성과 품질을 높이며, 이것은 계란과 혈액내 항산화계 조절과 혈액내 면역 세포 활성의 조절과 관계가 있다는 것을 나타내었다.

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Fucoidan에 의한 개 말초혈액 단핵구세포에서 생산된 TNF-${\alpha}$의 다형핵백혈구에 대한 탐식능과 순간산소과소비력의 증가효과 (Fucoidan Increases Phagocytic Capacity and Oxidative Burst Activity of Canine Peripheral Blood Polymorphonuclear Cells Through TNF-${\alpha}$ from Peripheral Blood Mononulear Cells)

  • 김수현;강지훈;양만표
    • 한국임상수의학회지
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    • 제28권2호
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    • pp.183-189
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    • 2011
  • 개 말초혈액 다형핵 백혈구(PMNs)의 탐식능력과 순간산소과소비력 (OBA) 에 대한 fucoidan의 효과를 검토하였다. Fucoidan 그 자체는 PMNs의 탐식능력과 OBA에 직접적인 효과를 보이지 않았다. 그러나 fucoidan으로 배양한 PBMCs의 배양상층액은 PMNs의 탐식능력과 OBA를 농도의존적으로 증가시켰다. 또한, TNF-${\alpha}$에 의한 PMNs의 탐식능력과 OBA의 측정 결과도 fucoidan으로 배양한 PBMCs 배양상층액의 그것과 유사하였다. 이러한 탐식능력과 OBA의 활성은 anti-TNF-${\alpha}$ pAb를 처리했을 때 억제되었다. PBMCs 배양 상층액 속의 TNF-${\alpha}$의 양을 정량한 결과 대조군에 비해 증가되었으며, PBMCs의 TNF-${\alpha}$ mRNA 발현 정도도 fucoidan을 첨가한 경우 증가되었다. 이상의 결과로부터, fucoidan은 개 말초혈액 PMNs의 탐식능력과 OBA에 대하여 면역자극 작용을 가지고 있으며, 이것은 fucoidan의 자극에 의해 PBMCs에서 생산되어 분비되는 가용성 물질인 TNF-${\alpha}$에 의해 나타나는 것으로 사료되었다.