Jo, Eun Ju;Kang, Bum Gwan;Jang, Kyoung Soo;Choi, Yong Ho;Kim, Jin-Cheol;Choi, Gyung Ja
Research in Plant Disease
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v.20
no.3
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pp.201-205
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2014
Damping-off, caused by Rhizoctonia solani and Pythium ultimum, is a very important plant disease and affects seeds and seedlings of many plant species worldwide. To investigate control efficacy of Serenade formulation (1.34%, SC) against Rhizoctonia and Pythium damping-off diseases, seeds of chili pepper and cucumber were sown in soils inoculated with R. solani and P. ultimum and Serenade formulation was applied by soil-drenching with 9-, 19-, and 39-fold dilutions. Control values of Serenade formulation on Rhizoctonia damping-off of chili pepper was 58% and 29% for 9- and 19-fold dilutions, respectively. In the case of cucumber Rhizoctonia damping-off, Serenade treatments showed similar control efficacy with damping-off of chili pepper. On the other hand, control efficacy of Serenade formulation on Pythium damping-off of cucumber was less than control effects on Rhizoctonia damping-off. Only Pythium damping-off of chili pepper treated with 9-fold dilution Serenade was statistically different with untreated control. This result suggest that Serenade formulation could be effectively used for controlling Rhizoctonia and Pythium damping-off diseases.
Cultivation of a biocontrol agent on a certain medium often results in reduced biocontrol efficacy and alters physiological state. In our previous study, Burkholderia gladioli strain B543 with long-term subculture on tryptic soy agar resulted in significantly reduced biocontrol ability against cucumber damping-off caused by P. ultimum. Therefore, we investigated the influence of laboratory culturing media on biocontrol activity and physiological state of Burkholderia gladioli strain B543 by using long-term repeated culture on a certain medium. When isolate B543 were successionally cultured on King's B agar (KBA), tryptic soy agar, nutrient agar (NA), or soil extract agar more than 20 times, the isolate cultured on KBA or NA showed a significantly enhanced biocontrol efficacy and higher population density in the rhizosphere of cucumber compared to that of the others. However, the isolates cultured on KBA more than 20 times showed the lowest production of protease, siderophore, or antifungal substance(s), measured by skim milk agar, Chrome-Azurol-S agar, and potato dextrose agar amended with 10% of the culture filtrate, respectively. Our results suggest that adaptation to proper culturing medium can alter biocontrol ability and physiological state, and we must consider laboratory media in optimizing the use of biocontrol agents.
An antagonistic bacterium, Pseudomonas flurorescens MC07 inhibited the mycelial growth of Rhizoctonia solani, Pythium ultimum, Fusarium oxysporum, and Phytophthora capsici in on potato dextrose agan (PDA) and other media. The strain MC07 conlonizes various plant roots and possesses antifungal activity. To determine the role of antifungal activity of the bacterium in disease suppression, a mutant Okm3-4 which lost its activity was isolated after screening 2,500 colonies generated by Omegon-Km insertions. The mutant Okm3-4 showed diminished growth inhibition of R. solani, P. ultimum, F. oxysporum, and Ph. capsici in vitro and had reduced suppressive effects on sesame damping.-off compared to the parental strain. In soils, accumulation of the pathogens by continuous cropping, 90% of sesame plants were killed by natural infection of damping-off whereas, only 29% of plants grown from seeds treated with MC07 were killed. On the other hand, 85% of plants died when sesame seeds were treated with the Okm3-4 cells. This indicated that antifungal activity of MC07 in vitro is directly responsible for the suppression of damping-off disease. Emergence rates of sesame seeds in pots containing diseased soil were 33%. However, MC07 treatments on seeds significantly improved emergence rates, which has similar effects of Benomyl treatment. The mutant Okm3-4 exhibited 53% of emergence rate. This indicated that antifungal activity of MC07 also affects the emergence rate of sesame seeds.
Park, Gwee-Kyo;Lim, Jong-Hui;Kim, Sang-Dal;Shim, Sang-Hee
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.22
no.3
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pp.326-330
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2012
Antifungal metabolites were isolated from a culture of Pseudomonas aurantiaca IB5-10. Chemical structures of the metabolites were elucidated as phenazine-1-carboxylic acid (PCA; 1), 2-hydroxyphenazine (2-OH-PHZ; 2), and cyclo-(L-Pro-L-Val; 3), respectively, based on spectroscopic methods. Among them, 3 was isolated for the first time from this strain. The antifungal activities of 1-3 were evaluated against a variety of plant pathogens. To the best of our knowledge, the antifungal activities of 3 against plant fungal pathogens have been evaluated for the first time in this work. PCA (1) showed the most potent antifungal activities against Phytophthora capsici, Rhizoctonia solani AG-1(IA), and Pythium ultimum with MICs (${\mu}g/ml$) of less than 1.0, 1.3, and 2.0, respectively. On the other hand, 2-OH-PHZ (2) showed potent antifungal activity against R. solani AG-1(IA) with the MIC (${\mu}g/ml$) of 2.0, whereas it showed moderate antifungal activity against P. ultimum with the MIC (${\mu}g/ml$) of 50.0. In addition, 3 showed antifungal activity against only R. solani AG-1(IA).
Microorganisms near the plant rhizosphere usually inhabit the surface or the inside of the plant roots and have a direct effect on plant growth by secreting plant growth promoters or antagonistic materials which protect the root zone system from various pathogens. This study was carried out to identify and isolate the antagonistic materials after isolation of microorganisms showing high antagonistic activities, in hopes of contributing to the development of sustainable agriculture and the preservation of agricultural environments. A number of antagonistic bacteria were isolated from paddy soil. Among isolates, RRj 228 showed plant growth promotion and antagonistic activity. RRj 228 was identified as Pseudomonas sp. according to the results of physiological properties and genetic methods. On the basis of the results of anti-fungal spectrum against several pathogens by RRj 228, the antagonistic effect of the isolate against Botrytis cinerea, Pythium ultimum, Phytopthola capsici, and Rhizoctonia solani, especially against red-pepper anthracnose caused by Colletotrichum acutatum, was remarkable. The experiment evaluating the biological control effect by RRj 228 revealed that the $ED_{50}$ value by the RRj 228 culture against C. acutatum, R. solani and P. ultimum were 0.14 mg/ml, 0.16 mg/ml and 0.29 mg/ml, respectively. An antagonistic substance was isolated and purified by several chromatographies from the RRj 228 culture. The $^1H$ and $^{13}C$ assignment of the antagonistic substance was achieved from two-dimensional $^1H-^1H$ COSY, HMQC, and HMBC. Finally, the antagonistic substance was identified as Phenazine-1-carboxylic acid ($C_{13}H_8N_2O_2$, M.W.=224).
To develop multifunctional microbial inoculant, microorganisms with antagonistic activity and biofertilizing activity were screened. Pantoea agglomerans and Bacillus megaterium from our laboratory culture collection, and strain MF12 from soil near poultry farm in Miryang were selected. On the basis of morphological, physiological studies and 16S rDNA sequence analysis, isolate MF12 was identified as the Bacillus pumilis. Three strains were studied for insoluble phosphate solubilization, indole-3-acetic acid (IAA) and siderophore production, ammonification ability, hydrolytic enzyme production and antifungal activity against phytopathogenic fungi. P. agglomerans did not produce any visible clear zone on agar plate containing 0.5% $Ca_3(PO_4){_2}$ as a sole phosphorus source. However, this strain could solubilize insoluble phosphate in liquid medium. All strains produced IAA ranged from $3{\sim}639{\mu}g/ml$ depending on culture time and had ammonification ability. Among three strains, only P. agglomerans produced siderophore. P. agglomerans produced pectinase and lipase, B. megaterium produced amylase, protease and lipase while B. pumilis produced protease and lipase. P. agglomerans showed antifungal activities against phytopathogenic fungi, Fusarium oxysporum and Colletotrichum gloeosporioides. B. pumilis showed antifungal activities against Botrytis cinerea, Sclerotinia sclerotiorum and Phythium ultimum.
Five hundred strains of actinomycetes were screened for inhibitory activity against the phytopathogenic fungi; Alternaria alternata, Botryotinia fuckeliana, Colletotrichum acutatum, Colletotrichum gleosporioides, Corticium sasaki, Cylindrocarpon destructans, Fusarium oxysporium, Magnaporthe grisea, Phytophthora infestans, Phytium ultimum, and Thanatephorus cucumeris. The strain CNU-A91231 (Korea Agricultural Culture Collection #20938) showed a strong activity against the phytopathogenic fungi and it was identified as Streptomyces griseofuscus based on the sequence of 16s rDNA. Practical and simple media for the strain S. griseofuscus CNU-A91231 was developed at the conditions ($28^{\circ}C$ and pH 6 with aeration) for efficient bacterial growth. Alanine, glutamine, proline and ammonium ion were good nitrogen sources for the bacterium. Addition of the major salts including Na, Cl, Ca, P, K, and Mg into molasses did not increase the growth of S. griseofuscus. Addition of fertilizers containing amino acids significantly enhanced growth of the bacterium. The optimal medium was formulated as molasses + 1% of glutamate fermentation waste powder. All the conditions and components used in this study did not affect the antifungal activity of S. griseofuscus. The bacterium and the medium in this study can be used as a bio-antifungal agent for plant farming.
Cepacidine A was previously isolated as a novel antifungal antibiotic from the culture broth of Pseudomonas cepacia AF2001. It exhibits a potent in vitro antifungal activity against various plant pathogenic fungi, such as Plasmopora veticola on grapes, Septoria nodorum and Fusarium culmorum on wheat, as well as Colletotrichum lagenarium on cucumbers. Accordingly, this study was conducted to evaluate the potential crop protection activity of strain P. cepacia AF2001. The strain was tested in semi-greenhouse biocontrol assays, and showed an excellent biological activity against Pythium ultimum in cotton and cucumbers; however, only a minor activity against Rhizoctonia aolani in cotton was observed. Furthermore, the nematodes Haemonchus contortus and Trichostrongylus only exhibited a moderated activity in the in vitro larval development assay with no activity in the in vivo animal model.
Lee, Gun-Joo;Han, Joon-Hee;Shin, Jong-Hwan;Kim, Heung Tae;Kim, Kyoung Su
The Korean Journal of Mycology
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v.41
no.2
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pp.112-117
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2013
Phytophthora capsici is one of major limiting factors in production of pepper and other important crops worldwide by causing foliage blight and rot on fruit and root. Increased demand for the replacement of fungicides has led to searching a promising strategy to control the fungal diseases. To meet eco-friendly agriculture practice, we isolated microorganisms and assessed their beneficial effects on plant health and disease control efficacy. A total of 360 bacterial strains were isolated from rhizosphere soil of healthy pepper plants, and categorized to 5 representative isolates based on colony morphology. Among the 5 bacterial strains (GJ-1, GJ-4, GJ-5, GJ-11, GJ-12), three bacterial strains (GJ-1, GJ-11, GJ-12) presented antifungal activity against P. capsici in an fungal inhibition assay. In phosphate solubilization and siderophore production, the strain GJ-1 was more effective than others. The strain GJ-1 was identified as Bacillus sp. using 16S rDNA analysis. Bacillus sp. GJ-1 was also found to be effective in inhibiting other plant pathogenic fungi, including Rhizoctonia solani, Pythium ultimum and Fusarium solani. Therefore, the Bacillus sp. GJ-1 can serve as a biological control agent against fungal plant pathogens.
The purpose of this study was to verify the antifungal properties of various herbal medicines belonging to the Ranunculaceae family and to find an extraction method effective in inhibiting fungal growth. When antifungal activity was measured in a liquid medium with extracts obtained by either hot water extraction or organic solvent extraction of the herbal medicines Clematis apiifolia, Coptis chinensis, and Pusatilla chinensis, effective results were obtained from the chloroform extract. In addition, fungal growth inhibition experiments were performed on unicellular fungi, Candida albicans, Candida tropicalis, and Candida lusitaniae, and on filamentous fungi, such as Pythium ultimum, Aspergillus fumigatus, and Fusarium oxysporum, using disk diffusion experiments on solid media. It was confirmed that P. chinensis extract has excellent antifungal properties against Candida spp. and C. apiifolia extract against filamentous mold. Finally, GC-MS analysis was performed to explore the useful antifungal substances present in the extract. As a result of the study, thurbergenone from C. apiifolia and 16-hydroxycleroda-3, 13(14)-dien-15, 16-olide (16-HCDO) from C. chinensis were confirmed as antifungal candidates. In conclusion, it was confirmed that C. apiifolia, C. chinensis, and P. chinensis have antifungal activity against various fungi, and in GC-MS analysis, all herbal medicines were confirmed to have different antifungal candidates. These results indicate that the Ranunculaceae family has evolved in several directions for fungal resistance traits.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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