Pseudomonas aeruginosa에 대한 항균물질을 찾기 위하여 한의학에서 전통적으로 사용되어 오던 34종류 약용식물로부터 에탄올 추출물들을 분리하여 항균활성을 조사하였다. Gardenia jasminoides, Arctium lappa, Citrus unshiu 및 Phellodendron amurense 등의 에탄올 추출물들이 P. aeruginosa ATCC 27853에 대해서 항균활성을 나타냈다. 이들 중 Gardenia jasminoides의 에탄올 추출물은 P. aeruginosa에 대해 강한 항균활성을 나타냈다. 앞으로 이들 약용식물들의 추출물들이 P. aeruginosa에 대한 천연항균물질로서 사용될 수 있을 것으로 기대된다.
Pseudomonas aeruginosa는 기회 감염성 병원균으로, Cystic fibrosis, 미생물 감염성 각막염,화상 부위 2차 감염 등의 다양한 질병을 초래한다. 정족수 인식(쿼럼 센싱)이라고도 알려져 있는 세포간 신호전달 기전이 이러한 감염에서 중요한 역할을 하기 때문에 P. aeruginosa의 정족수 인식 시스템들이 집중적으로 연구되어 왔다. P. aeruginosa의 정족수 인식 시스템들을 소개하는 많은 문헌들이 주로 두 개의 주요 acyl-homoserine lactone (AHL) 계열 정족수 신호물질들인 N-3-oxododecanoyl homoserine lactone (3OC12)과 N-butanoyl homoserine lactone (C4)에 초점을 맞추어 설명하고 있지만, 실제로는 몇 가지 새로운 신호물질들이 발견되어져 왔고, 그들이 P. aeruginosa의 병독성과 신호전달에 중요한 역할을 할 수 있음이 제안되어져 왔다. 그 중 하나가 PQS(Pseudomonas quinolone signal; 2-heptyl-3-hydroxy-4-quinolone)인데, 이 물질은 현재 P. aeruginosa의 잘 규명된 주요 신호물질로 인식되고 있다. 이에 더하여, 최근의 연구들은 또 다른 가능성 있는 P. aeruginosa신호물질들을 제안해 왔는데, diketopiperazines (DKPs)과 pyocyanin이 그들이다. DKPs는 환형 dipeptide로써 이를 구성하는 아미노산의 종류에 따라 다양한 구조를 가진다. P. aeruginosa의 배양액에서 검출된 몇몇 DKPs들이 기존에는 AHL에만 특이적으로 반응한다고 알려졌던 Vibrio 랸�N갸 LuxR biosensor를 활성화 시킬 수 있다는 것이 발견되어 새로운 신호물질로 제안되었다. Pyocyanin (1-hydroxy-5-methyl-phenazine)은 P. aeruginosa가 생산하는 여러 phenazine 화합물들 중의 하나로써, 특징적인 청록색을 띄는 산화-환원 활성물질이다. 이 물질도 정체 성장기 동안 일부 정족수 인식의 조절을 받는 유전자들의 발현을 증가시키는 최종 신호 인자로 최근 제안되었으며, 그 신호는 또 다른 전사 조절 인자인 SoxR에 의해 매개된다고 제안되었다. 본 논문에서는 P. aeruginosa에서 새롭게 발견, 제안되고 있는 이들 신호 전달 물질들에 대해 자세히 다루어 보기로 한다.
Jeong, Yu Sun;Huh, Sunghyun;Kim, Ji Cheol;Park, Ji Ye;Lee, ChaeEun;Kim, Min-Sik;Koo, JaeHyung;Bae, Yoe-Sik
BMB Reports
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제55권8호
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pp.395-400
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2022
Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa) is a well-known Gramnegative opportunistic pathogen. Neutrophils play key roles in mediating host defense against P. aeruginosa infection. In this study, we identified a metabolite derived from P. aeruginosa that regulates neutrophil activities. Using gas chromatography-mass spectrometry, a markedly increased level of 2-undecanone was identified in the peritoneal fluid of P. aeruginosa-infected mice. 2-Undecanone elicited the activation of neutrophils in a Gαi-phospholipase C pathway. However, 2-undecanone strongly inhibited responses to lipopolysaccharide and bactericidal activity of neutrophils against P. aeruginosa by inducing apoptosis. Our results demonstrate that 2-undecanone from P. aeruginosa limits the innate defense activity of neutrophils, suggesting that the production of inhibitory metabolites is a strategy of P. aeruginosa for escaping the host immune system.
This study introduced a chick embryos’ infection model to elucidate the pathogenesis mechanism of Pseudomonas aeruginosa, which causes serious diseases in human after ingestion of P. aeruginosa-contaminated animal originated foods. The embryonic chick model is able to give a rapid and relatively inexpensive method to assess bacterial pathogenicity compared to embryos of other vertebrates. Embryos were infected with P. aeruginosa and elastase-deficient P. aeruginosa. After infection with P. aeruginosa cells, total bacterial cell numbers and gelatinase activities in the embryos were compared. Thereafter, precartilage condensation and chondrogenesis were assessed by peanut agglutinin (PNA) binding on day 3 and by Alcian blue staining for sulfated proteoglycans on day 5, respectively. P. aeruginosa significantly increased in embryos, resulting in abnormal limb development, whereas P. aeruginosa defective in elastase activity partly impaired proliferation. In addition, P. aeruginosa-infected chick embryos significantly stimulated the production of matrix metalloproteinases. Several analyses showed that elevated proteases suppressed the proliferation and survival of chondrogenic cells. The results show that this infection model was a useful assay to determine the virulence mechanism of P. aeruginosa in human after intake of microbiologically contaminated foods.
본 연구에서는 천연물 유래 항균소재로써 노각나무의 이용 가능성을 알아보기 위해 노각나무 가지, 줄기, 잎을 에탄올에 추출한 다음 P. aeruginosa에 대한 추출물의 항균활성을 조사하였다. 노각나무 부위별 추출물(1 mg/disc) 중 잎과 줄기 추출물이 P. aeruginosa에 대해 항균활성을 나타내었으며, 잎 추출물의 항균활성이 가장 우수하였다. P. aeruginosa에 대한 노각나무 잎 추출물의 MIC는 0.8 mg/ml였고 정균작용을 나타내었다. 노각나무 잎 추출물이 0.2-2.0 mg/ml 농도로 처리된 배양액에서 P. aeruginosa의 바이오필름 형성은 추출물의 농도가 증가할수록 농도의존적으로 억제되는 경향을 보였다. 또한 주사전자현미경으로 노각나무 잎 추출물(0.8 mg/ml)이 P. aeruginosa의 바이오필름 형성에 미치는 영향을 관찰한 결과에 의하면 추출물 대신 DMSO를 처리한 대조구에서는 세포 주변에서 EPS와 바이오필름이 관찰되었지만 추출물을 처리한 처리구의 세포 주변에서는 EPS와 바이오필름이 관찰되지 않았다. qRT-PCR을 이용하여 P. aeruginosa의 QS 관련 유전자인 lasI와 rh1I mRNA 발현 변화를 qRT-PCR로 확인한 결과, 노각나무 잎 추출물이 0.2-2.0 mg/ml의 농도로 처리된 배양액에서 lasI와 rh1I mRNA 발현은 추출물의 농도가 높아질수록 농도의 존적으로 억제되는 것을 확인할 수 있었다. 이상의 결과를 종합하면 노각나무 잎 추출물은 P. aeruginosa에 대한 항균활성과 바이오필름 형성 억제능이 우수하기 때문에 천연물 유래 항균소재로써 이용 가능성이 높을 것으로 판단된다.
In order to develop an effective means to treat P. aeruginosa infections, we have purified P. aeruginosa outer membrane proteins (OMPs)-specific human IgG antibody. In this study, we investigated the protective activity of the purified anti-OMPs IgC against P. aeruginosa infection in a rabbit endophthalmitis model. Rabbits were inoculated by an intravitreal injection with P. aeruginosa, and treated with a single dose of 1 mg anti-P. aeruginosa OMPs IgG. All the control rabbits predominantly developed edematous responses and opacity in the eyes, but the rabbits treated with the antibody showed only very limited degree of edema. Aliquots of the vitreous humor were extracted and analyzed for the number of viable bacteria and endotoxin level. The results showed that the anti-OMPs IgC significantly reduced the bacterial count compared with the control group, and that the endotoxin level of the vitreous from the IgG-treated rabbits was more than 70-fold lower 6 h after the administration than the control animals. These data suggested that the anti-P. aeruginosa OMPs IgG is effective in inhibiting the bacterial growth and thereby in reducing endotoxin levels in the vitreous, warranting further development of the anti-P. aeruginosa OMPs IgG as a therapeutic means for treating Pseudomonas endophthalmitis.
Of the 500 Actinomycetes isolates obtained from soil, one isolate grown on maltose as the sole carbon source produced compound BHK-P19, which inhibited the growth of multiple drug resistant P. aeruginosa 0245. Ultraviolet radiation mutagenesis curtailed production of BHK-P19. Mutation of the BHK-P19 producer using N-methyl-N'-nitro-N-nitroso-guanidine obviated the antibacterial activity to P. aeruginosa 0245, but not towards P. aeruginosa 0225. The mixing of BHK-P19 and BHK-S5 culture extracts inhibited P. aeruginosa 0254, 0225 and 1113. The combined application of BHK-P19 culture extract and Schizandra chinensis Baillon extract inhibited P. aeruginosa 0254, 0225, 0826, 1113, 1378, 1731 and 2492. Use of various concentrations of BHK-P19 culture extract and ampicillin markedly increased antibacterial activity against multi-drug resistant P. aeruginose 1113.
Pseudomonas aeruginosa is an aerobic, Gram-negative, glucose-nonfermenting bacterium, which has emerged as a serious opportunistic pathogen. Recently, outbreaks of carbapenem resistant P. aeruginosa give rise to significant therapeutic challenges for treating nosocomial infections. The genes of metallo-${\beta}$-lactamase (MBL), a powerful carbapenemase, are carried as a part of the mobile gene cassettes inserted into integrons playing an important role in rapid dissemination of antibiotic resistance genes among bacterial isolates. In this study, we investigated the prevalence of integron in imipenem resistant P. aeruginosa isolates. A total of 61 consecutive, non-duplicate, and imipenem resistant P. aeruginosa strains were isolated from a university hospital in the Chungcheong province of Korea. We employed repetitive extragenic palindromic sequence-based PCR (rep-PCR) method for the selection of clonally different P. aerusinosa strains. PCR and DNA sequencing were conducted for the detection of integrons. Twenty-one clonally different P. aeruginosa strains were isolated. Only one (P28) of the strains harbored $bla_{VIM-2}$ that was found as gene cassettes in class 1 integrons. Four of 21 carbapenem resistant P. aeruginosa strains harbored class 1 integron containing aminoglycoside resistance determinant. All of the integrons detected in the study contained more than one resistance gene cassette, which can mediate resistance to multiple antibiotics. To prevent further spreading of the multi-drug resistant P. aeruginosa, conseguent monitoring and clinical polices are required.
Pseudomonas aerugionsa is a commonly isolated nosocomial pathogen. DNA fingerprinting of P. aerugionsa is examined by randomly amplified polymorphic DNA (RAPD). In this study, P. aeruginosa were isolated from environmental and clinical specimens and the molecular typing of the microorganisms was investigated by RAPD. Thirty strains of P. aeruginosa were selected from the strains isolated formerly and submitted for type identification to the University Hospital. 15 strains of P. aeruginosa were received from Chungnam University Hospital and 14 strains from Gyeongsang University Hospital. DNA of P. aeruginosa was extracted by Qiagen genomic DNA kit. PCR mixtures were set up and incubated, Reactions mixtures were made to be optimal for P. aeruginosa. RAPD typing analysis was carried out by the multivariate statistical program (MVSP) V3.0. RAPD type I was the most common pattern and included 23 strains. Most of strains from Gyeongsang University Hospital belonged to RAPD type lb and 15 strains from Chungnam University Hospital to RAPD type I or II. RAPD typing of P. aeruginosa isolated from the environmental and clinical specimens was very simple and reproducible.
광역학 요법(photodynamic therapy)은 특정 파장의 빛에 의해 활성화되는 광민감제(photosensitizer)를 사용하여 세포 내 산소를 활성화시키는 치료 방법으로, 항생제 내성균에 의한 상처 감염의 치료에 유망한 접근 방법이다. 일반적으로 건강한 사람에게 비병원성인 녹농균(Pseudomonas aeruginosa, P. aeruginosa)은 특정 병원성 징후를 보이지 않지만, 피부 손상이나 면역력이 저하된 사람들에서는 패혈증과 같은 심각한 질병을 유발할 수 있다. 항생제는 P. aeruginosa 감염에 대한 전통적인 치료법이나 약물 오용으로 인한 항생제 내성의 증가는 이러한 감염을 관리하는 데 큰 어려움을 준다. 본 연구에서는 P. aeruginosa의 억제제로서 광민감제(PhotoMed, Methyl pheophorbide A, Radachlorin®)와 다이오드 레이저를 이용한 광역학 치료 효과를 조사하는 것을 목표로 했다. P. aeruginosa 현탁액과 광민감제(PhotoMed, Methyl pheophorbide A, Radachlorin®)를 페트리 접시에 접종하여 30분 후 다이오드 레이저를 사용하여 3 J/cm2의 에너지 밀도로 조사했다. 그 결과, P. aeruginosa는 PhotoMed에서 79.65%, Methyl pheophorbide A에서 47.36%, Radachlorin®에서 40.91%의 사멸률을 보였다. 이번 연구는 P. aeruginosa를 억제하기 위한 가장 효과적인 접근법이 PhotoMed와 다이오드 레이저를 이용한 광역학 치료임을 보여준다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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