Myriococcum albomycesf가 생산하는 섬유소 분해효소군에 관한 연구로서 호소생산배지 및 조효소의 성질을 규명하고 몇 가지 효소군으로 정제한바 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 밀기울 고채해양의 각 효소 활성은 쌀겨고체배양 및 탈지대두박고체배양의 그것보다 강하였다. 2. 밀기울진탕, 쌀겨진탕배양 및 대두박진탕배양등은 상기의 고체배양보다 각 효소의 활성이 우수하였다. 3. $45^{\circ}C$에서 배양한 것이 배양기의 종류에 관계없이 $37^{\circ}C$ 및 $50^{\circ}C$에서 배양한 것보다 각 효소의 활성이 강하였다. 4. CMCase는 무기 질소원보다 유기 질소원을 첨가하므로서 더욱 생성이 촉진되었다. 5. 기본밀기울진탕배양기에 CMC, Avicel, 여지분말 등의 indncer를 첨가 하므로서 각 효소활성은 $1.5{\sim}3$배나 증가되었다. 6. CMC와 Avicel을 inducer로 하여 jar formentor에서 배양할 때 작 효소의 활성은 대개 5일째에 최고에 달하였다. 7. Cellulae 조효소의 최적 pH는 $4.0{\sim}4.5$, pH안정성은 $3.5{\sim}8.0$이였다. 그리고 최적온도는 $65^{\circ}C$ 부근으로 다른 사상균의 cellulase에 비하여 높으며 온도안정성도 $60^{\circ}C$에서 120분으로 거의 실활되지 않았다. 8. 조효소의 활성은 $Ca^{++}$, $Mg^{++}$으로 부활되며, $Hg^{++}$, $Cu^{++}$, $Ag^{+}$는 강한 저해체였다. 그리고 투석으로 약간 그 활성이 저하되었다. 9. 배양액을 여과하고 황산암모니움 분획, DEA-E-sephadex A-25, Amberlite CG-50 및 hydroxy-apatite column chromatography로 Avicel, CMC, 여지 분말에 대하여 활성이 다른 4개의 fraction을 분리 하고 이를 cellulase fraction I, fraction II-a, fraction II-b 및 fraction III라고 명명하였다. 10. 이들 4개의 fraction은 전기 영동, 초원심상 및 자외선흡수 등으로 보아서 단일의 단백질로 생각되었다. 11. Fraction I은 Avicelase활성이 강하고, fraction II-a는 cellobiase 활성이 강하였다. 그리고 fraction II는 CMCase 활성이 강하였으며, fraction III는 CMC 점도감소 활성이 강하였다. 12. 섬유소질을 각 fraction으로 가수분해한 최종산물은 cellobiose 및 glucose였다. 그리고 fraction I과 fraction II-a는 Avicel을 협동적으로 분해하였다. 13. Fraction I의 최적 pH 5.5, fraction II-a는 pH 5.0, fraction II-b는 pH 4.0, fractionIII는 pH $4.0{\sim}4.5$이며, 각 fraction의 pH 안정성은 pH $3.0{\sim}7.0$이였다. 14. Fraction I의 최적온도는 $50^{\circ}C$, fractionII-a는 $55{\sim}60^{\circ}C$, fraction II-b 는 $60^{\circ}C$, fraction III는 $55^{\circ}C$이며 각 fraction의 열안정성은 $55^{\circ}C$ 부근에서 120분으로 거의 실활되지 않고 fraction II-a는 $60^{\circ}C$에서도 특별히 안정하였다. 15. Fraction I과 fraction II-b 활성은 $Ag^{++}$, $Hg^{++}$에 의하여 저해되며 $Ca^{++}$, $Mg^{++}$으로는 부활되었다.
인삼 성분중 생리적 활성을 가지고 있는 oligopeptide를 검출하고 분리하기 위하여 물 추출액을 ultra-filtration 한 후 gel filtration, ion-exchange chromatography 및 thin layer chromatography 등을 행하였다. 인삼 물 추출액으로부터 고분자 물질을 제거한 ultra-filtrate는 epinephrine에 의해 유도된 fat cell의 lipolysis를 저해하는 antilipolytic activity를 보유하고 있었으며 Sephadex G-25 gel filtration에 의해 3개 fraction으로 나뉘어졌다. 이중 첫번째 fraction(S-FI)만이 peptide 성분을 함유하고 있었으며 saponin 및 당도 검출되었다. S-FI fraction은 $Dowex\;50{\times}2\;ion-exchange\;chromatography$에 의하여 6개의 $fraction(P-F1{\sim}P-F6)$으로 분리되었고 TLC검정 결과 P-F2 fraction이 peptide fraction으로 antilipolytic를 보유하고 있었으며 TLC로 분리한 6개 spot는 각각 가수 분해한 전후의 TLC pattern을 비교해 본 결과 모두 oligopeptide임이 밝혀졌다. S-FI fraction에 존재한 saponine과 당은 P-F1 fraction 에서 모두 용출되었다.
The ether fraction obtained from dry fruit of Cornus officinalis was investigated for the anti-inflammatory action, acute toxicity and central nervous system activities. From several pharmacological examinations, it was found that the ether fraction suppressed considerably carrageenin edema at the dose of 600mg/kg p.o. in rats, inhibited the granuloma formation in rats as given 100mg/kg p.o. for 7 days and decreased the swelling of both of complete adjuvant injected and noninjected (contralateral) paws of the rats at the dose of 100mg/kg p.o. given for 14 days. The $LD_{50}$ of the fraction are estimated to be more than 2,000mg/kg p. o. and 642mg/kg i. p. in mice. And the fraction did not show any sedative, stimulative, analgesic and anticonvulsant action but exhibited hypothermic action. These results might be concluded that the ether fraction of Corni fructus showed anti-inflammatory action in both of acute and chronic type models without any considerable central nervous depressant activity and exhibited very weak acute toxicity in mice.
Portulaca oleracea L. is known to have many biological benefits such as anti-oxidant, anti-inflammatory, anti-allergic and anti-tumor. The objective of this study is to explore the neuroprotective effect of P. oleracea L. against glutamate-induced oxidative stress in mouse hippocampal HT22 cells. P. oleracea L. 70% ethanol extract and solvent fractions have the potent neroprotective effects on glutamate-induced nerotoxicity by induced the expression of heme oxygenase (HO)-1 in HT22 cells. Especially, ethyl acetate fraction showed higher protective effect. In HT22 cell, P. oleracea L. treatment with ERK inhibitor (PD98059) and c-JUN N-terminal kinase (JNK) inhibitor (SP600125) reduced P. oleracea L. ethyl acetate fraction induced HO-1 expression and P. oleracea L. ethyl acetate fraction also increased ERK and JNK phosphorylation. Furthermore, we found that treatment of P. oleracea L. caused the nuclear accumulation of Nrf2. In conclusion, the ethyl acetate fraction of 70% ethanol extract of P. oleracea L. significantly protect glutamate-induced oxidative damage by induction of HO-1 via Nrf2, ERK and JNK pathway in mouse hippocampal HT22. Taken together these finding suggest that P. oleracea L. ethyl acetate fraction is good source for taking active compounds and may be a potential therapeutic agent for brain disorder that induced by oxidative stress and neuronal damage.
효소에 의한 단백질 분해로 우리 밀의 저 알레르겐화를 시도하기 위한 기초 연구로서 금강밀에서 gluten fraction을 추출하여 동물 실험을 통하여 경구 섭취된 gluten에 대한 항체 생성을 유도하였다. Gluten fraction은 UTH buffer로 추출하여 10-50kDa 사이의 분자량에서 여러 밴드가 확인된 분획을 얻었으며 약 25 kDa, 34 kDa 그리고 45 kDa 부근의 밴드가 주요하게 나타났다. 그리고, 경구 투여로 유도된 gluten에 대한 항체는 ELISA와 western blot의 항원-항체 반응을 실시하여 anti-gluten lgG, IgE를 확인하였다. 또한 경구 투여의 투여 시간 경과에 따라 항체가는 상승하였다. 추출된 gluten fraction은 bromelain, papain, ficin 그리고 b.p. protease 각 효소의 최적 pH와 온도에서 가수 분해하여 gluten fraction의 알레르겐 저감화를 시도하였다. 효소 분해 후 gluten fraction의 저분자화 정도는 anti-gluten 하체에 대한 ELISA를 실시하여 검토하였다. 그 결과 bromelain, papain, ficin의 경우보다 b.p. protease을 처리한 경우가 ELISA value를 크게 저하시켰다. 이것은 gluten fraction이 b.p protease 효소 가수분해에 의해 생성된 항체가 인식하는 amino acid 서열 (epitope)이 분해되었음을 나타낸 것이다. 마지막으로 b.p. protease의 분해능력을 1mg, 2mg, 3mg/10mL로 첨가량을 달리하여 검토한 결과 첨가량에 따른 변화는 거의 나타나지 않았다. 따라서 금강밀의 gluten fraction 10mL에 b.p protease 1mg으로 4시간 처리하여 단백질을 분해하여 우리밀의 항원성 저하 가능성이 탐색되었다.
In this paper we calculate the subgroup size necessary for detecting the change of percent defective with several detection probabilities for orginal population fraction nonconforming p, changed population fraction nonconforming $p^*$, and the ratio k=$p^*$/p in the usage of p control charts. From our calculation we can know the error level of normal a, pp.oximation in detection probability calculation and recommend the subgroup size with lower error levels of normal a, pp.oximation, and then we show the reasonable subgroup size necessary for p, $p^*$, k, and the detection probability of the change of fraction nonconforming in a process. The information that we here show in tables will be useful when p control chart users decide the subgroup size in the p control chart users decide the subgroup size in the p control chart.
Aspergillus nidulans로부터 추출한 naringinase를 정제하여 물리화학적 성질을 검토하였다. 1) 효소는 유안침전, DEAE-Sephadex A-25, Sephadex G-100 column chromatography를 사용하여 정제하였으며 정제결과 두 개의 fraction이 나타남을 발견하였고 Fraction I의 비활상 조효소의 781배 종가함을 나타내었다. 2) 효소의 반응 최적 pH와 온도는 위의 두 fraction에서 같은 결과를 나타내었다. 최적 pH는 5.0 이었으며 최적온도는 4$0^{\circ}C$이었다. 3) 조효소액, Fraction I 및 Fraction II의 분해생물은 paper chromatography를 통해 조사한 결과 naringenin, glucose및 rhamnose 임이 밝혀졌다. 4) Andrew의 gel filtration 법에 의한 분자량을 측정한 결과 Fraction I은 약 78,000, Fraction II 는 약 26,000으로 추정되었다. 5) 효소의 안정성에 미치는 pH의 영향은 pH 5.2에서 15분간 처리로 6$0^{\circ}C$에서 50%가 실활되었으며 7$0^{\circ}C$에서는 거의 다 실화되었다. 6) 효소반응에 미치는 금속이온의 영향은 Fe$^{2+}$ 가 약간의 활성을 조해하였을 뿐 별로 영향이 없었다. 7) 효소의 기질에 대한 친화성에서 Km 값이 2.3X$10^{-6}$ g/ml 로 추정되었다
Attempts were made to see if we could cut more pBR322 in the presence of ginseng saponin fraction in connection with possibly for shortening the enzymatic reaction time and the amount of the enzyme to be used. The following results were obtained restriction endonucleases such as AccI, XhoII, SaII, and HincII were observed to cut pBR322 efficiently at 10-1% ginseng saponin fraction. In case of BamHI, 10-2% ginseng saponin fraction was observed to the most effective concentration. Such cumulative results suggest that ginseng saponin fraction would play important role as far as the cleavage of pBR322 for short period by endonucleases is concerned.
The cyutotoxic effects of hot water soluble polysaccharides extract(PS) from the mushroom, Lentinus edodes, and in combinations with vitamin A or vitamin E on life span of ICR mice bearing P388 cancer cells and in vitro against P388 cancer cells were examined. The chemical components of PS and fractions were analyzed and survival time and cell number of P388 treated with extract fractions with and without vatamin A or E supplementation were also measured. The results obtained were summarized as follows; The extract of fraction B was shown to have the highest antitumor activity against P388 implanted in ICR mice. The antitumor fraction B was consisted of 82.0% of polysaccharide and 4.2% of protein. All three fractions seemed to have in vivo antitumor activity against P388, and fraction B showed the highest activity, In vitro P388 cell growht was inhibited 76%, 89%, 54% by the addition of fraction A, B and C respectively. Vitamin A or E did not appear to have any accelerating effects on either in vivo or in vitro cell cytotoxicity when each of them was combined with the PS and fractions. All three fractions contained more than 68% of polysaccharides. The fraction B showed the highest value of 88% in polysaccharides. Monsaccharides of the fraction B were identified as galactose(59.1%), glucose(29.2%), fructose(2.8%) and uronic acid(4.2%). Hydrolysis of protein from the fraction B was didentifed to have 17 kinds of defined and 5 undifined amino acids. The inhibitory effects of the hot water extracts from mushroom against cancer cell growth of P388 were stronger than the control group. And the survival time of ICR mice was shown to be 161% between the control group and the experimental groups.
In vitro antimutagenicity of Bacillus natto islolated from Natto, Japanese traditional fermented food, was investigated using umu-test. Mutagenicity of S9-activated metabolites of Trp-P-2 and IQ for Salmonella typhimurium TA 1535/pSK1002 was remarkably inhibited by addition of bacterial cells and their cytoplasmic fraction. Desmutagenicity by cytoplasmic fraction increased with increasing concentration of the fraction. Bioantimutagenic effect of cytoplasm on Salmonella typhimurium SD-100 did not show bioantimutagenic activity against mutated bacterial cells induced by Trp-P-2. Cytoplasmic fraction exhibited 17% bioantimutagenicity due to desmutation caused by IQ.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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