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Development and Characterization of Expression Vectors for Corynebacterium glutamicum

  • Lee, Jinho
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제24권1호
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    • pp.70-79
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    • 2014
  • In an attempt to develop a variety of expression vector systems for Corynebacterium glutamicum, six types of promoters, including $P_{tac}$, $P_{sod}$, $P_{sod}$ with a conserved Shine-Dalgarno (SD) sequence from C. glutamicum, $P_{ilvC}$, $P_{ilvC}$ with a conserved SD-1 ($P_{ilvC-M1}$), and $P_{ilvC}$ with a conserved SD-2 ($P_{ilvC-M2}$), were cloned into a modified shuttle vector, pCXM48. According to analysis of promoter strength by quantitative reverse transcription PCR, $P_{sod}$ and $P_{sod-M}$ were superior to tac and ilvC promoters in terms of transcription activity in C. glutamicum. All of the promoters have promoter activities in Escherichia coli, and $P_{sod-M}$ displayed the highest level of transcriptional activity. The protein expression in constructed vectors was evaluated by measuring the fluorescence of green fluorescent protein (GFP) and SDS-PAGE. C. glutamicum harboring plasmids showed GFP fluorescence with an order of activity of $P_{ilvC}$ > $P_{ilvC-M1}$ > $P_{sod}$ > $P_{ilvC-M2}$ > $P_{sod-M}$, whereas all plasmids except pCSP30 with $P_{sod}$ displayed fluorescence activities in E. coli. Of them, the strongest level of GFP was observed in E. coli with $P_{sod-M}$, and this seems to be due to the introduction of the conserved SD sequence in the translational initiation region. These results demonstrate that the expression vectors work well in both C. glutamicum and E. coli for the expression of target proteins. In addition, the vector systems harboring various promoters with different strengths, conserved SD sequences, and multiple cloning sites will provide a comfortable method for cloning and gene expression, and consequently contribute to the metabolic engineering of C. glutamicum.

Physicochemical properties of sausage manufactured with carp (Carassius carassius) muscle and pork

  • Lee, Sol-Hee;Joe, Sung-Duck;Kim, Gye-Woong;Kim, Hack-Youn
    • Journal of Animal Science and Technology
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    • 제62권6호
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    • pp.903-911
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    • 2020
  • The purpose of this study was to compare the physicochemical properties of sausage manufactured with carp (Carassius carassius) muscle and pork. Sausages were prepared using either 100% pork sausage (P10), a mixture of 50% pork and 50% carp muscle (P5C5), or 100% carp muscle (C10). The quality of the sausage emulsion was determined by analyzing approximate composition, pH, instrumental color, cooking yield, water holding capacity (WHC), viscosity, and texture profile analysis (TPA). Moisture content of cooked C10 was significantly higher than that of P10 or P5C5 (p < 0.05); however, protein content of cooked P10 was significantly higher than that of C10 (p < 0.05). The pH of uncooked and cooked C10 was significantly higher than that of P10 and P5C5 (p < 0.05). The cooking yield, WHC, and texture profile analysis of C10 were higher than those of P10 and P5C5 (p < 0.05). In addition, the viscosity of uncooked C10 was higher than that of P10 and P5C5. These results suggest that carp muscle can enhance sausage quality with respect to pH, WHC, cooking yield, viscosity, and TPA.

C-P-N-D 생태계와 ICCT (Information, Communication, Contents Technology) (C-P-N-D Ecological System and ICCT (Information, Communication, Contents Technology))

  • 최창현
    • 디지털융복합연구
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    • 제12권3호
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    • pp.7-16
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    • 2014
  • 본 연구는 현행 ICT 거버넌스의 주요 논리를 분석하여 콘텐츠가 성장할 수 있는 '창조산업 생태계 및 친화적 콘텐츠 거버넌스 구축'을 위한 정책대안을 제시하는데 있다. 이를 위해 ICT 생태계가 주장하는 인터넷 중심의 콘텐츠(C)-플랫폼(P)-네트워크(N)-디바이스(D) 부문의 문제점을 진단하고, 이를 포괄하는 보다 거시적 개념으로서 콘텐츠산업 생태계(c-P-N-D에서 C-p-n-d로의 진화)'의 근거 논리를 전개하였다. 연구결과 ICT 생태계 주장의 논리는 IT 차원의 통합에 집중됨으로서 콘텐츠(C) 경쟁력의 원천과 핵심 속성(창작자, 창조성 등) 등이 경시되어, 콘텐츠(C) 부문이 P-N-D 각 부문보다 작은 개념으로 인식될 가능성이 매우 크다. 즉 콘텐츠(C)는 Large C가 아닌 Small c 개념으로 c-P-N-D 가치사슬체계로 간주되어 상대적으로 창의적 콘텐츠가 소홀하게 다루어질 우려가 있다. 따라서 콘텐츠 핵심인 창작이 순수예술과 함께 어우러진 문화적 감수성에서 발현될 수 있도록 'ICT생태계(c-P-N-D)에서 콘텐츠산업생태계(C-p-n-d)로의 진화'가 모색되어야 할 것이다.

우리나라 쌀의 점도 특성 (Viscogram Pattern of Korean Rice Flours)

  • 김성곤;김상순
    • Applied Biological Chemistry
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    • 제28권3호
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    • pp.142-148
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    • 1985
  • 일반계(35품종) 및 다수계(23품종) 쌀을 대상으로, 쌀가루의 아밀로그람 특성을 분석하고 단백질 및 아밀로스 함량과 쌀의 수분흡수 속도와 의 관련성을 조사하였다. 일반계 쌀은 최고점도 (P), $95^{\circ}C$에서 15분 후의 점도(H) 및 $50^{\circ}C$에서의 점도(C) 모두 다수계 쌀보다 낮은 값을 보였다. H/P는 일반계가, C/P 및 C/H는 다수계가 높은 값을 보였다. P와 H/P, C/P 및 C/H와의 관계는 모두 높은 부의 상관관계를 보였다. P는 일반계 쌀의 경우 단백질 및 아밀로스 함량과 각각 정의 상관 및 부의 상관을 보였다. H와 C는 단백질 함량 및 아밀로스 함량과 상관을 보이지 않았다. 아밀로그람 특성값은 수분흡수 속도와 상관관계를 보이지 않았다.

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Arylation of Styrene by Palladium Acetate-Phosphine Complexes

  • 황박영애;황성원
    • Bulletin of the Korean Chemical Society
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    • 제18권2호
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    • pp.218-221
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    • 1997
  • When phenylation of styrene was carried out in the presence of Pd(OAc)2 and PPh3 in benzene, trans-stilbene was obtained in good yield (566%) with high selectivity (98%) under mild condition (55 ℃, 50 psi O2, 20 h). Since trans-stilbene could be produced not only from benzene but also from phenyl group of PPh3 by migration of its phenyl group to Pd, the competitiveness of benzene and the migratory aptitude of aryl group of triarylphosphine toward styrene has been investigated with various phosphines (PR3: P(p-C6H4CH3)3, P(p-C6H4OCH3)3, P(p-C6H4F)3, P(p-C6H4Cl)3, P(C6H5)3, P(C6H11)3, P(OC4H9n)3, P(CH2C6H5)3 and P(C6F5)3). The yield and selectivity toward trans-stilbene are increased as the basicity of the phosphines increases. The composition of arylated olefin from arylphosphine, in turn, increases as the electronegativity of the substituent on the aryl group of arylphosphines increases.

북방산 개구리 난소의 Cytochrome $P450_{C17}$ 유전자 특성 (Characterization of Ovarian Cytochrome $P450_{C17}$ (17 ${\alpha}-hydroxylase$/17,20-lyase) in Rana dybowski)

  • 강해묵
    • 한국발생생물학회지:발생과생식
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    • 제10권2호
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    • pp.127-133
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    • 2006
  • 스테로이드 합성효소 중 $17\;{\alpha}-hydroxylase/17,20-lyase(P450_{C17})$는 progesterone을 $17\;{\alpha}-hydroxyprogesterone$을 거쳐 androstenedione으로 변환을 담당하는 효소이다. 양서류 난소에서 스테로이드 합성의 분자적 조절과정의 연구에 사용할 목적으로 북방산 개구리(Rana dybowskii) 난소에서 $P450_{C17}$ cDNA를 클로닝 하였다. 북방산 개구리 난포세포의 cDNA library 검색을 통해 분리된 약 2.5kb의 cDNA는 529개의 아미노산을 가진 단일 번역틀을 가지고 있었다. 개구리 $P450_{C17}$의 아미노산 서열은 Xenopus와는 76%, 닭과는 63%, 그리고 사람과는 약 45%의 동일성을 보여 주였고, 동시에 진화적으로 척추동물에서 매우 잘 보존된 아미노산 서열을 가지고 있었다. 노던 분석에서 개구리의 $P450_{C17}$ 전사체는 난소에서만 2.5kb와 3.6kb 크기의 두 종류가 발견되었다. 그리고 개구리 Rana $P450_{C17}$ cDNA는 비스테로이드 합성 세포인 COS-1세포에서 분명한 $17\;{\alpha}-hydroxylase/17,20-lyase$ 활성을 주었다. 따라서 클로닝된 개구리 $P450_{C17}$ 유전자는 양서류의 난소에서 스테로이드 합성의 분자적 기작을 연구하는데 매우 유용할 것으로 사료된다.

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Assessment of Biochemical Profiles in Premenopausal and Postmenopausal Women with Breast Cancer

  • Yadav, Naval Kishor;Poudel, Bibek;Thanpari, C.;Koner, Bidhan Chandra
    • Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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    • 제13권7호
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    • pp.3385-3388
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    • 2012
  • Objective: The study was conducted to assess biochemical profiles in premenopausal and postmenopausal women having breast cancer. Materials and Methods: A hospital based case control study was carried out at Manipal Teaching Hospital (MTH), Pokhara, Nepal. The analysed variables were age, metabolic profile including total cholesterol, triglycerides, HDL-C, LDL-C, blood sugar, insulin concentration, C-peptide, HbA1c and selenium. Descriptive statistics and testing of hypothesis were used for the analysis using EPI INFO and SPSS 16 software. Results: In premenopausal women, significant differences were noted for total cholesterol (P value <0.001), triglycerides (P value 0.002), HbA1c level (P value <0.001), insulin concentration (P value 0.030), C-peptide concentration (P value 0.001), and selenium (P value <0.001) between cases and controls. Insignificant results were found for HDL-C (P value 0.749), LDL-C (P value 0.933), blood sugar (P value 0.59) and BMI (P value 0.746). Similarly, significant difference in total cholesterol (P value <0.001), triglycerides (P value 0.001), LDL-C (P value <0.001), HDL-C (P value 0.025), blood sugar (P value <0.001), insulin concentration (P value <0.001), c-peptide concentration (P value <0.001), HbA1c level (P value <0.001) and selenium (P value <0.001) were observed for postmenopausal patients and controls. Conclusions: Assessing metabolic changes and their management may be important for control of breast cancer and increased survival.

Pseudomonas aeruginosa P-5에 존재하는 polyhydroxyalkanoate synthase PhaC1과 PhaC2의 기질특이성 (Substrate chain-length specificities of polyhydroxyalkanoate synthases PhaC1 and PhaC2 from Pseudomonas aeruginosa P-5)

  • 우상희;이선희;이영하
    • 미생물학회지
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    • 제52권4호
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    • pp.455-462
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    • 2016
  • Pseudomonas aeruginosa P-5 균주는 홀수개의 탄소수를 갖는 지방산으로부터 3-hydroxyvalerate (3HV)와 medium-chain-length (MCL) 3-hydroxyalkanoates (3HAs) 단위체로 구성된 popolyhydroxyalkanoate (PHA) 공중합체를 생산하는 특이한 성질을 갖고 있다. 이 균주가 갖고 있는 2개의 MCL-PHA synthases ($PhaC1_{P-5}$$PhaC2_{P-5}$)의 탄소길이에 따른 기질특이성을 비교하기 위하여 각각의 유전자를 PHA 생합성능이 결여된 돌연변이주 Pseudomonas putida GPp104에 도입하고 발현시킨 결과, $PhaC2_{P-5}$는 3HV와 MCL 3HAs로 이루어진 공중합체를 생산하지만 $PhaC1_{P-5}$는 단지 MCL 3HAs로 구성된 공중합체를 생산하였다. 이는 $PhaC2_{P-5}$$PhaC1_{P-5}$과는 달리 보다 짧은 탄소길이의 3-hydroxyvaleryl Co-A를 기질로 인지하여 합성반응에 이용할 수 있음을 보여주는 것이다. 또한 $PhaC2_{P-5}$의 효소활성 및 기질특이성의 변화를 유도하기 위하여 위치지정 돌연변이생성을 수행하고 P. putida GPp104과 다른 PHA 생합성능 결여 돌연변이주인 Ralstonia eutropha $PHB^-4$에서 발현시킨 결과, $PhaC2_{P-5}$ 내 두 개 아미노산의 치환(Ser326Thr과 Gln482Lys)이 공중합체의 3HV 함량을 크게 증진시키는 효과를 보였다. 두 개 아미노산이 모두 치환된 $PhaC2_{P-5}$ 유전자($phaC2_{P-5}QKST$)를 갖는 P. putida GPp104를 nonanoic acid가 탄소원으로 함유된 배지에서 배양하였을 때, 모균주에 비해 공중합체 함량과 공중합체 내 3HV 함량이 각각 2.5배 및 3.5배 증가하였다. 따라서 $phaC2_{P-5}QKST$를 포함하는 재조합 균주는 개량된 물성의 신규PHAs 생산에 유용할 것으로 기대된다.

RELATING GALOIS POINTS TO WEAK GALOIS WEIERSTRASS POINTS THROUGH DOUBLE COVERINGS OF CURVES

  • Komeda, Jiryo;Takahashi, Takeshi
    • 대한수학회지
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    • 제54권1호
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    • pp.69-86
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    • 2017
  • The point $P{\in}{\mathbb{P}}^2$ is referred to as a Galois point for a nonsingular plane algebraic curve C if the projection ${\pi}_P:C{\rightarrow}{\mathbb{P}}^1$ from P is a Galois covering. In contrast, the point $P^{\prime}{\in}C^{\prime}$ is referred to as a weak Galois Weierstrass point of a nonsingular algebraic curve C' if P' is a Weierstrass point of C' and a total ramification point of some Galois covering $f:C^{\prime}{\rightarrow}{\mathbb{P}}^1$. In this paper, we discuss the following phenomena. For a nonsingular plane curve C with a Galois point P and a double covering ${\varphi}:C{\rightarrow}C^{\prime}$, if there exists a common ramification point of ${\pi}_P$ and ${\varphi}$, then there exists a weak Galois Weierstrass point $P^{\prime}{\in}C^{\prime}$ with its Weierstrass semigroup such that H(P') = or , which is a semigroup generated by two positive integers r and 2r + 1 or 2r - 1, such that P' is a branch point of ${\varphi}$. Conversely, for a weak Galois Weierstrass point $P^{\prime}{\in}C^{\prime}$ with H(P') = or , there exists a nonsingular plane curve C with a Galois point P and a double covering ${\varphi}:C{\rightarrow}C^{\prime}$ such that P' is a branch point of ${\varphi}$.

인삼 뿌리썩음병균 Cylindrocarpon destructans의 후막포자 발아에 미치는 배양온도 및 pH의 효과 (Effect of Incubation Temperature and pH on Chlamydospores Germination of Cylindrocarpon destructans Causing Root Rot of Panax ginseng)

  • 조대휘;유연현
    • Journal of Ginseng Research
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    • 제25권3호
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    • pp.136-140
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    • 2001
  • 배양온도 및 배지의 pH가 인삼 뿌리썩음병균 Cylindrocarpon destructans 후막포자의 발아에 미치는 영향을 배지별로 조사한 결과는 다음과 같다. 배양온도별 후막포자 발아율은 Czap다 solution agar(CSA) 배지가 potato dextrose agar(PDA) 보다 높았다. CSA 배지의 경우에는 배양온도 5~3$0^{\circ}C$에서 후막포자의 발아가 가능하였으며 15~$25^{\circ}C$에서 발아율은 53.2~62.7%로서 발아적정 온도범위로 측정되었다. 후막포자 발아 최적 배양온도는 2$0^{\circ}C$로 발아율은 62.7%이었고, 3$0^{\circ}C$에서는 6.9%의 매우 저조한 발아율을 보였다. PDA배지에서는 5~$25^{\circ}C$에서 후막포자가 발아 가능하였고, 3$0^{\circ}C$에서는 발아가 관찰되지 않았다. 10~2$0^{\circ}C$에서 발아율이 43.6~47.9%로서 발아적정 온도범위로 측정되었다. 후막포자 발아최적 배양온도는 2$0^{\circ}C$로 발아율은 47.9%이었다. C. destructans 후막포자는 CSA 배지의 pH 5.2~8.1 조사범위 전체에서 발아되었으며 발아적정 pH 범위는 pH 6.4~8.1이었다. PDA배지의 경우는 pH 5.2~7.4의 조사범위 전체에서 발아가 확인되었으며 발아적정 pH 범위는 pH 5.2~6.0 이었다. C. destructans 후막포자를 21일간 배양한 후 생성된 균총의 색상을 배지 pH별로 조사한 결과, CSA 배지의 경우 pH 5.2~6.0 범위에서 연한 갈색, pH 6.4~8.1 에서 백색의 균총을 형성한 반면, PDA 배지에서는 pH 5.2~7.1에서 C. destructans의 전형적인 암갈색 균총을 형성하였고 pH 7.2에서는 갈색균총을 형성하였다.

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