본 연구에서는 C57BL/6J ob/ob 마우스를 이용하여 한국산 겨우살이 냉수 추출물(KME)의 항당뇨 활성을 조사하였다. 50 혹은 100 mg/kg의 KME를 1일 1회씩 경구투여 한 결과 KME 투여 개시 5일 후부터 ob/ob 마우스의 혈당이 유의하게 억제되었으며, 10일 후부터 안정된 억제 효과를 나타내고 대조군에 비해 20% 이상의 혈당강하 효과를 나타내었다. 경구 당부하 실험(OGTT)에서는 KME 경구투여 마우스에서 유효한 당부하 억제 활성이 관찰되었다. 또한 KME 경구 투여는 ob/ob 당뇨 마우스의 혈액 내 총 콜레스테롤과 중성 지질의 농도를 억제하는 것으로 나타났다. 한편 C2C12 근육세포를 이용한 in vitro 실험에서 KME를 처리함으로써 glucose uptake가 현저히 증가하였다. 한편 매우 흥미롭게도 KME를 처리한 C2C12 근육세포에 있어서 미토콘드리아 생성과 산화대사 조절물질인 peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator 1-${\alpha}(PGC-1{\alpha})$를 비롯하여 glucose transporter type 4(GLUT4), estrogen-related receptor-${\alpha}(ERR-{\alpha})$, nuclear respiratory factor-1(NRF-1) 그리고 mitochondrial transcription factor A(TmfA)와 같은 $PGC-1{\alpha}$ 관련 유전자들의 발현이 증가하는 것으로 확인되었다. 이 결과는 KME가 2형 당뇨에 대한 치료물질로서의 작용을 지니며 이러한 KME의 항당뇨 활성은 미토콘드리아 생성의 조절과 관련 있는 것으로 추정된다.
장구균은 사람의 구강, 질, 장내 등에 정상적으로 존재하는 세균이다. 본 연구에서는 구강에서 분리된 장구균중 Enterococcus durans로 동정된 분리균주 4주의 특성과 구강내 주요 세균인 Streptococcus mutans와 Streptococcus oralis와의 관계를 연구하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 분리균주에 대한 당 발효 검사와 생화학적 검사 결과, 비슷한 양상을 보였다. 2. 분리균주 모두 erythromycin, penicillin, tobramycin, ampicillin, teicoplanin, ciprofloxacin, vancomycin. gentamicin, kanamycin 및 streptomycin에 대해 감수성을 보였다. 3. S. mutans를 일회용 큐벧에서 단독 배양시 550 nm에서의 흡광도가 1.405이었으나. S. mutans와 4주의 분리균주 혼합 배양시에는 각각의 흡광도가 0.855, 0.867, 0.797, 1.083으로 감소되었다. 4. 비커 와이어 검사 결과, S. mutans 단독 배양시 형성된 인공치태의 평균 무게는 $1566{\pm}103mg$이었다. S. mutans와 4주의 분리균주 혼합 배양시에는 각각 $44{\pm}5mg,\;41{\pm}12mg,\;34{\pm}7mg,\;38{\pm}12mg$으로 현저히 감소되었다. 배양후 생균수는 S. mutans 단독 배양시 ml당 $2.0\times10^9$ 이었으나, S. mutans와 4주의 분리균주 혼합 배양시 S. mutans는 $2.0\times10^7$ 내지 $6.0\times10^7$으로 감소되었다. 5. S. oralis 단독 배양시 ml당 $2.1\times10^8$ 이었으나, S. oralis와 4주의 분리균주 혼합 배양시 S. oralis는 $1.4\times10^7$ 내지 $7.0\times10^7$으로 감소되었다. 6. 3주의 분리균주로 부터 약 60 kb의 plasmid를 분리 할 수 있었다. 이상의 결과를 종합하면 구강에서 분리된 E. durans는 S. mutans의 증식을 억제하여 인공치태 형성을 저지하였고, S. oralis의 증식은 약간 억제하였다.
Background: A previous study has shown that Euonymus alatus (EA) has an antidotic activities against inflammation, suggesting possibility that EA can exert this beneficial effects to liver injury by an initial protection against drug-induced hepatocyte demage. The present study was undertaken to evaluate the protective effect of EA-extract on experimentally induced hepatitis in ICR mice and to investigate some mechanisms responsible for its action. Methods: Water EA extract was used in this experiments. The mice received i.p. a dose of 700 mg/kg galactosamine (GalN) together with $5{\mu}g/kg$ of endotoxin (LPS), or received i.v. 12 mg/kg of concanavalin A (Con A). EA (4 mg/mouse) was administrated on day -2, -1 and 0 before induction of liver injury. Liver injury was assessed by measurement of serum alanin amino-transferase (SGPT) levels on 9 hr after GaIN.LPS, or 8 hr after con A administration. Results: Treatment with either GaIN or LPS alone did not cause hepatitis. However, simultaneous administration of GalN and LPS to mice resulted in LPS-dose dependent fulminant hepatitis. GaLN/LPS-induced liver injury was reduced when mice were given EA for 3 days before induction. This preventive effect of Ea was more prominent when EA was given by intraperitoneal route rather then by oral route. Pretreatment of EA or dexamethasone inhibited significantly $TNF{\alpha}$ production in GalL/LPS-injured mice. However, EA-treatment did not influence $TNF{\alpha}$-induced hepatitis in GalN-sensitized mice, suggesting that $TNF{\alpha}$ is likely to act as one of final mediators of endotoxin action and the protective effect of EA might be manifested chiefly by inhibition of endotoxin-induced $TNF{\alpha}$ production, not by blocking the $TNF{\alpha}$-action. Injection of Con A into mice evoked remarkable liver injury in a dose dependent fashion. This liver damage was reduced by EA-pretreatment. Dexamethasone significantly reduced both GalL/LPS-induced and Con A-induced liver damages, showing synergism with EA. However, indomethacin reduced only GalN/ LPS-induced hepatitis, not for Con A-induced hepatitis. Conclusion: These results led to the conclusion that EA may be able to contribute at least in part to prevent the drug-induced hepatotoxicity, and that its anti-hepatitis effects might be manifested directly by modulation of endogenous mediators, such as leukotriese D4, $TNF{\alpha}$ and free radical, and indirectly by regulation of immune mediated responses. Also these results suggested that EA could be developed as a potential antidotic agent.
Streptomyces subrutilus P5가 생산하는 철 함유 superoxide dismutase (FeSOD)에 의한 중금속 독성의 완화를 조사하였다. 0.1 mM의 납이온이 120분 처리되면 E. coli $DH5{\alpha}$의 생존율이 7%에 불과 하지만 $0.1{\mu}M$의 정제된 천연 FeSOD가 첨가되면 생존율이 39%로 높아졌다. 이러한 해독작용은 0.01 mM의 구리이온에 대해서도 나타나며(생존율이 6%에서 50%로 증가) 그 효과는 EDTA보다 강하였다. 6xHis-tagged FeSOD를 생산하는 재조합 E. coli M15[pREP4]는 0.1 mM의 납 이온이 60분 처리된 후의 생존율이 3%에서 19%로 증가하였다. 6xHis-tagged FeSOD는 분자당 123개의 납과 결합하였다. 따라서 FeSOD가 중금속을 세포와의 접촉으로부터 격리함으로써 중금속이 오염된 환경에서 세균의 생존력을 증가시킨 것으로 사료된다.
Purpose: At present, information regarding periodontal disease in geriatric patients is scarce. The purpose of this study was to quantify the periodontal pathogens present in the saliva of Korean geriatric patients and assess the relationship between the bacterial levels and the periodontal condition. Methods: Six putative periodontal pathogens were quantified by using a real-time polymerase chain reaction assay in geriatric patient groups (>60 years) with mild chronic periodontitis (MCP), moderate chronic periodontitis (MoCP), and severe chronic periodontitis (SCP). The copy numbers of Porphyromonas gingivalis, Tannerella forsythia, Treponema denticola, Aggregatibacter actinomycetemcomitans, Fusobacterium nucleatum, and Prevotella intermedia were measured. Results: It was found that the bacterial copy numbers increased as the severity of the disease increased from MCP to SCP, except for P. intermedia. For P. intermedia, it was found that samples in the MCP group yielded the largest amount. It was also found that the quantities of P. gingivalis, T. forsythia, and T. denticola, the so-called "red complex" bacteria, were lower than those of F. nucleatum, A. actinomycetemcomitans, and P. intermedia in all of the samples. Conclusions: Collectively, the results of this study suggest that the levels of P. gingivalis, T. forsythia, F. nucleatum, and T. denticola present in saliva are associated with the severity of periodontal disease in geriatric patients.
Objectives: We aimed to compare the quality of sleep, tongue diagnosis, oral microbiology differences in insomnia of Liver qi stagnation (LQS) and Non-Liver qi stagnation (NLQS). Methods: 56 patients were classified as LQS or NLSQ type insomnia through the insomnia differentiation questionnaire. The depression scores between the groups were compared through beck depression inventory (BDI), and the sleep quality was compared through Pittsburgh sleep quality index (PSQI) and Insomnia Severity Index (ISI). We analyzed the sleep efficiency, total sleep time, total awake frequency, total and average awake time through actigraph. For the tongue diagnosis, the distribution of tongue coating in six areas were measured through Winkel tongue coating index (WTCI). Linear discriminant analysis was performed to observe the differences in composition of microbial strains between the groups. Results: The scores of BDI, ISI and PSQI were significantly higher in LQS group. The total sleep time in LQS group was significantly less than that of NLQS group. Among the areas of tongue, according to the WTCI, the amount of tongue coating in zones A and C was significantly small. In oral microbial analysis, there was no significant difference between the groups at the phylum level. At the genus level, Prevotella, Veillonella, and Streptococcus were predominant in LQS group, whereas Prevotella, Neisseria, and Streptococcus in NLQS group. Conclusions: It was meaningful that insomnia was more likely in LQS group than in NLQS group, and the composition of oral microorganisms was significantly different, which could lead to the diseases caused by stress.
Candida albicans에 의한 구강 감염(캔디다증)은 구강 점막에 빈번하게 발생하며 잘 알려진 질병이다. 구강 캔디다증은 생명을 위협하는 정도의 곰팡이 감염증은 아니나, 특정상황에서 개인에게 심각한 위험을 초래할 수도 있다. 마이크로 RNA는 세포 내에서 다른 타겟 유전자를 저해하는 작은 크기의 RNA 분자이며 단백질을 코딩하지는 않고 번역과정을 억제하는 조절자로서의 역할을 하고 있다. 본 연구는 C. albicans의 마이크로RNA를 처음으로 동정하고 그러한 마이크로RNA가 지닌 기능을 조사하기 위함이다. 이를 위하여 C. albicans의 small RNA를 차세대 염기분석법을 통하여 분석하고 그러한 RNA들의 2차 구조를 생물정보학적 방법으로 조사하였다. 분석한 small RNA들은 마이크로 RNA라고 불리울 수 있는 특징들을 가지고 있었으며, 특별히 높게 발현되고 있는 두개의 마이크로 RNA 정도 크기의 RNA가 CBP1 유전자의 3' 말단 비번역구역(UTR)에서 반대방향으로 발현하는 것을 밝혀 내었다. 우리는 이러한 C. albicans의 RNA가 CBP1 유전자를 타겟으로 하여 조절하는지 알아보기 위해 RNA를 인위적으로 합성한 후 세포 내로 주입하고, 형광형미경으로 도입 사실을 확인하였다. 하지만 4시간과 8시간 후에 CBP1의 발현 변화는 관찰되지 않았다. 따라서, 이러한 결과는 C. albicans가 마이크로RNA에 의한 RNA 간섭(RNAi) 작용이 다른 진핵세포와는 다르게 작용하는 것을 알 수 있다.
이 연구의 목적은 indocyanine green (ICG)과 근적외선 diode 레이저의 사용이 다종 우식원성 바이오필름에 미치는 항균 효과를 조사하는 것이다. Streptococcus mutans, Lactobacillus casei, Candida albicans를 포함하는 다종 바이오필름이 ICG와 808 nm 근적외선 diode 레이저를 사용하여 서로 다른 조사 시간에 따라 처리되었다. Colony-forming unit (CFU)을 측정하였고, 바이오필름의 정성적 평가를 위해 공초점 레이저 주사 현미경(Confocal laser scanning microscopy, CLSM) 관찰을 시행하였다. 또한 광열 치료의 효과를 평가하기 위해 온도 측정이 시행되었다. ICG와 근적외선 diode 레이저를 사용한 군에서 CFU의 감소량이 통계적으로 유의하였으나, L. casei와 C. albicans에서는 시간에 따른 항균 효과의 유의한 차이는 관찰되지 않았다. CLSM 관찰에서도 유사한 세균 감소를 확인할 수 있었다. ICG와 근적외선 diode 레이저를 사용한 군은 ICG 없이 광조사를 시행한 군보다 더 높은 온도 상승을 보였으며, 측정된 온도는 열 치료의 온도 범위와 유사하였다. 결론적으로, ICG와 근적외선 diode 레이저는 다종 우식원성 바이오필름에 항균 효과를 보였다. 우식 예방을 위한 보조 수단으로 사용될 가능성을 가지나, 임상적인 적용을 위해서는 적용 프로토콜에 관한 연구가 필요하다.
이 연구의 목적은 부유 및 바이오필름 상태의 Mutans streptococci에서 치태와 치석 착색제로 치과 진료실에서 사용하는 식용색소인 에리스로신에 대한 감수성을 조사하는 것이다. 세균은 호기성 조건에 배양하였고, 에리스로신은 $0.02-10000{\mu}g/L$의 농도로 희석하였다. 부유 상태 S. mutans의 최소 억제 농도(MIC)와 최소 살균 농도(MBC)를 측정하였다. 세균을 배양하여 바이오필름을 형성한 후, 최소 바이오필름 억제 농도(MBIC) 및 최소 바이오필름 박멸 농도(MBEC)를 측정하였다. MIC와 MBC는 $19.5{\mu}g/L$로 동일하게 측정되었으며 따라서 에리스로신은 부유 상태의 S. mutans에 대해 살균 효과를 가지는 것으로 나타났다. MBIC, MBEC 값은 각각 $313{\mu}g/L$, $2500{\mu}g/L$로 측정되었다. 측정된 MIC, MBC, MBIC는 실제로 치과에서 사용되는 농도에 비해 낮은 값이며 따라서 인체에 무해한 농도에서 S. mutans를 억제할 수 있을 것으로 보인다.
이 연구는 Streptococcus mutans 바이오필름에 대한 에리스로신 매개 광역동 치료에서 potassium iodide (KI)의 효과를 평가하는 In vitro 실험이다. S. mutans ATCC 25175를 배양하여 hydroxyapatite disk에 바이오필름을 형성하였다. 광감각제인 에리스로신을 20 μM, KI를 각각 10, 50, 100 mM로 희석하여 적용한 뒤 광역동 치료를 시행하였다. 생존한 세균의 수는 colony forming units (CFU)/mL로 산정하였으며 Bonferroni 사후 분석을 통해 그룹 간 차이의 유의성을 확인하였다. Confocal laser scanning microscopy (CLSM)을 이용하여 세포 생존율을 시각적으로 평가하였다. 실험 결과 KI를 적용한 후 광역동 치료를 시행한 실험군에서 KI의 농도의 관계 없이 현저한 CFU의 감소가 관찰되었다(p < 0.05). 또한 10 mM KI에 비해 100 mM KI를 적용한 실험군에서 유의한 CFU의 감소가 관찰되었다(p < 0.05). CLSM 관찰 시에도 동일한 결과를 확인하였다. KI는 모든 농도에서 S. mutans 바이오필름에 대한 에리스로신 매개 광역동 치료의 효과를 유의하게 향상시켰다. 이는 바이오필름 상태의 균주에 대한 광역동 치료의 낮은 감수성을 보완할 수 있지만, 추가적인 연구를 통한 최적의 임상 프로토콜 확립이 필요하다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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