Objective: Preservation of the periodontal ligament (PDL) is vital to the success of tooth autotransplantation (TAT). Increased PDL volumes and facilitated tooth extraction have been observed upon orthodontic preloading. However, it is unclear whether any changes occur in the expressions of bone biomolecules in the increased PDL volumes. This study aimed to determine the expressions of runt-related transcription factor 2 (RUNX2), alkaline phosphatase (ALP), receptor activator of nuclear factor kappa-B ligand (RANKL), and osteoprotegerin (OPG) in PDL upon preloading. Methods: Seventy-two premolars from 18 patients were randomly assigned to experimental groups that received a leveling force for 1, 2, or 4 weeks or to a control unloaded group. Following extraction, PDL volumes from 32 premolars of eight patients (21.0 ± 3.8 years) were evaluated using toluidine blue staining. The expressions of the biomolecules in the PDL from 40 premolars of ten patients (21.4 ± 4.0 years) were analyzed via immunoblotting. Results: The median percentage of stained PDL was significantly higher at 2 and 4 weeks after preloading than in the unloaded condition (p < 0.05). The median RUNX2 and ALP expression levels were significantly higher at 2 and 4 weeks after preloading than in the unloaded condition (p < 0.05), whereas the median RANKL/OPG ratios were significantly higher at 1 and 4 weeks after preloading (p < 0.05). Conclusions: Orthodontic preloading for 4 weeks enhances PDL volumes as well as the expressions of RUNX2, ALP and the RANKL/OPG ratio in the PDL, suggesting this loading period is suitable for successful TAT.
Objectives The main purpose of this study was to evaluate the bone healing effect of Pahyeolsandong-tang (PHT)(Poxiesanteng-tang) extract in tibia fracture-induced mice. Methods PHT was extracted using a solution of 35% ethanol in 60℃ for 8 hours. Mice were randomly divided into 4 groups (normal, control, PHT 50 and PHT 100). Mice of experimental groups were medicated with PHT 50 or 100 mg/kg for 7 to 21 days. To clarify the effect of bone fracture healing, relative messenger RNA (mRNA) expressions of osteocalcin (OCN), runt-related transcription factor 2 (Runx2), osterix (OSX), Sox9, collagen type II alpha 1 chain (Col2a1), receptor activator of nuclear factor kappa-B ligand (RANKL), osteoprotegerin (OPG) were examined. Results In in vitro experiment, relative mRNA expression of OCN, Runx2, Col2a1 was significantly increased in PHT treated group to compare with control differentiation group. In in vivo experiment, relative mRNA expression of OCN, Runx2, OSX, Sox9, Col2a1, RANKL, OPG was significantly increased in PHT treated group. Conclusions This study showed that PHT accelerates bone fracture healing through the activation of osteoclasts and osteoblasts. It was showed that PHT significantly promotes osteoblasts differentiation by osteoblast differentiation markers such as OCN, Runx2, Col1a2. Also it was investigated that PHT had stimulatory effect on osteoblasts function through enhancing OCN, Runx2, OSX, Sox9, Col2a1 and, osteoclasts function through enhancing RANKL and OPG markers. PHT effectively promotes bone fracture healing process through activation of osteoblasts and osteoclasts.
Background: This study investigates the effect of alendronate-treated osteoblasts, as well as the effect of low-level laser therapy (LLLT) on the alendronate-treated osteoblasts. Bisphosphonate decreases the osteoblastic activity. Various treatment modalities are used to enhance the bisphosphonate-treated osteoblasts; however, there were no cell culture studies conducted using a low-level laser. Methods: Human fetal osteoblastic (hFOB 1.19) cells were treated with $50{\mu}M$ alendronate. Then, they were irradiated with a $1.2J/cm^2$ low-level Ga-Al-As laser (${\lambda}=808{\pm}3nm$, 80 mW, and 80 mA; spot size, $1 cm^2$; NDLux, Seoul, Korea). The cell survivability was measured with the MTT assay. The three cytokines of osteoblasts, receptor activator of nuclear factor ${\kappa}B$ ligand (RANKL), osteoprotegerin (OPG), and macrophage colony-stimulating factor (M-CSF) were analyzed. Results: In the cells treated with alendronate at concentrations of $50{\mu}M$ and higher, cell survivability significantly decreased after 48 h (p < 0.05). After the applications of low-level laser on alendronate-treated cells, cell survivability significantly increased at 72 h (p < 0.05). The expressions of OPG, RANKL, and M-CSF have decreased via the alendronate. The RANKL and M-CSF expressions have increased, but the OPG was not significantly affected by the LLLT. Conclusions: The LLLT does not affect the OPG expression in the hFOB cell line, but it may increase the RANKL and M-CSF expressions, thereby resulting in positive effects on osteoclastogenesis and bone remodeling.
Purpose: (-)-epigallocatechin-3-gallate (EGCG) has been reported to exert anti-inflammatory and antibacterial effects in periodontitis. However, its exact mechanism of action has yet to be determined. The present in vitro study evaluated the anti-in-flammatory effects of EGCG on human periodontal ligament fibroblasts (hPDLFs) and human periodontal ligament stem cells (hPDLSCs) affected by bacterial lipopolysaccharide (LPS) extracted from Porphyromonas gingivalis. Methods: hPDLFs and hPDLSCs were extracted from healthy young adults and were treated with EGCG and/or P. gingivalis LPS. After 1, 3, 5, and 7 days from treatment, cytotoxic and proliferative effects were evaluated using a 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide assay and bromodeoxyuridine assay, respectively. And then, the gene expressions of hPDLFs and hPDLSCs were observed for interleukin (IL)-$1{\beta}$, IL-6, tumor necrosis factor (TNF)-${\alpha}$, osteoprotegerin (OPG), receptor activator of nuclear factor kappa-B ligand (RANKL), and RANKL/OPG using real-time polymerase chain reaction (PCR) at 0, 6, 24, and 48 hours after treatment. The experiments were performed with the following groups for hPDLFs and hPDLSCs; 1) No treat, 2) EGCG alone, 3) P. gingivalis LPS alone, 4) EGCG+P. gingivalis LPS. Results: The 20 ${\mu}M$ of EGCG and 20 ${\mu}g/mL$ of P. gingivalis LPS had the lowest cytotoxic effects, so those concentrations were used for further experiments. The proliferations of hPDLFs and hPDLSCs increased in all groups, though the 'EGCG alone' showed less increase. In real-time PCR, the hPDLFs and hPDLSCs of 'EGCG alone' showed similar gene expressions to those cells of 'no treat'. The gene expressions of 'P. gingivalis LPS alone' in both hPDLFs and hPDLSCs were highly increased at 6 hours for IL-$1{\beta}$, IL-6, TNF-${\alpha}$, RANKL, and RANKL/OPG, except the RANKL/OPG in hPDLSCs. However, those increased gene expressions were down-regulated in 'EGCG+P. gingivalis LPS' by the additional treatment of EGCG. Conclusions: Our results demonstrate that EGCG could exert an anti-inflammatory effect in hPDLFs and hPDLSCs against a major pathogen of periodontitis, P. gingivalis LPS.
Kim, Jung-Keun;Kim, Se-Won;Kim, Hae-Young;Lee, Byung-Eui;Ko, Seon-Yle
International Journal of Oral Biology
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제32권1호
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pp.23-34
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2007
We performed the present study to investigate whether Rehmannia glutinosa Libosch (RG) extracts (RGX) and Eleutherococcus senticosus Max (ES) extracts (ESX) play any roles in bone metabolism. We examined cellular activities of bone cells by measurement of osteoblastic cell viability, osteoprotegerin (OPG) secretion from osteoblasts, osteoclastogenesis, and osteoclastic activity. There is no cytotoxicity from osteoblasts after treatment with RGX and ESX. The secretion of OPG from the osteoblasts showed marked increases after treatment with RGX and ESX. In addition, RGX and ESX treatment decreased the number of tartrate-resistant acid phosphatase-positive multinucleated cells and the resorption areas. RGX and ESX, when mixed at optimal ratios, induced synergic effects, in vitro. OPB, which showed synergic effects, is the extract of natural ingredients RG and ES mixed at a raw material weight ratio of 4 : 1. It can be suspected that extracts of RG and ES mixtures contains active ingredients involved in bone tissue metabolism and may be effective in improving osteoporosis.
Human bone marrow-derived mesenchymal stem cells (hBMMSCs) must differentiate into osteogenic cells to allow for successful bone regeneration. In this study, we investigated the effects of different combinations of three soluble osteogenic differentiation-inducing factors [L-ascorbic acid (AC), ${\beta}$-glycerophosphate (${\beta}G$), and bone morphogenic protein-2 (BMP-2)] and the presence of a hydroxyapatite (HA) substrate on hBMMSC osteogenic differentiation in vitro. hBMMSCs were cultured in medium containing various combinations of the soluble factors on culture plates with or without HA coating. After 7 days of culture, alkaline phosphatase (ALP) activity, calcium deposition, and osteoprotegerin (OPG) and osteopontin (OPN) expression were measured. The effects of individual and combined factors were evaluated using a factorial analysis method. BMP-2 predominantly affected expression of early markers of osteogenic differentiation (ALP and OPG). HA had the highest positive effect on OPN expression and calcium deposition. The interaction between AC, ${\beta}G$, and HA had the second highest positive effect on ALP activity.
Osteoporosis is a progressive bone disease characterized by low bone mass which is caused by disturbance in the balance between the activities of osteoblasts and osteoclasts. Postmenopausal osteoporosis is one of the most common disorders in women after menopause, which is linked to an estrogen deficiency and characterized by an excessive loss of trabecular bone. Rubus coreanus has been used for their various pharmacological properties in Asia as a traditional medicine. To investigate the effect of unripe fruits of R. coreanus 30% ethanol extract (RCE) on osteoblast-like cells (MG63) differentiation, we examined the effects of RCE on in vitro osteoblastic differentiation markers, alkaline phosphatase (ALP) activity and receptor activator of nuclear factor ${\kappa}$-B ligand (RANKL) and osteoprotegerin (OPG) expression. The high concentration (50 and $100{\mu}g/mL$) of RCE markedly increased ALP activity, whereas decreased the RANKL/OPG. We also investigated the effect of RCE on M-CSF plus RANKL-induced differentiation of pre-osteoclast cells (RAW 264.7). RCE treatment remarkably inhibited M-CSF/RANKL-induced formation of osteoclast-like multinuclear cells from RAW 264.7 cells. Moreover, the inhibitory effect of RCE was reduced by selective estrogen receptor-${\alpha}$ antagonist. Our research suggests that suggested that unripe fruits of R. coreanus may act beneficial effects on bone mass by regulating both osteoblast and osteoclast.
Bone homeostasis is maintained by a balance between activities of osteoblasts(bone forming cells) and osteoclasts (bone resorbing cells). The activities of these cells are closely regulated by multiple factors including hormones and cytokines. The cessation of estrogen at menopause disrupts the balanced regulation and is the main cause of osteoporosis in postmenopausal women. Recent molecular biological studies led to a discovery of tumor necrosis factor(TNF) and TNF receptor families genes that play critical roles in the regulation of osteoclast formation and function. RANKL (receptor activator of nuclear factor kappa B ligand; also called ODF, TRANCE, and OPGL) expressed on cells supporting osteoclast is essential for osteoclast differentiation, activation, and survival. RANK, the counter-receptor for RANKL, is expressed on progenitor and mature osteoclasts. The interaction between RANKL and RANK is requlated by a soluble decoy receptor OPG (osteoprotegerin). Gene knock out studies of these molecules showed profound effects on bone. These results prompted development of new strategies for treatment of bone diseases. Inhibition of osteoclast activity by blocking the RANKL-RANK interaction using OPG is being attempted. Research on the signaling pathways of RANK is also actively carried out. Screening natural products that inhibit the RANKL-RANK interaction or the activity of obteoclasts would be another effective means to a new drug target for bone resorbing diseases.
대두 종자크기에 대한 QTL의 consistency을 알아보기 위하여 F$_{2}$, F$_{3}$ 세대에서의 분석결과를 요약하면 댜음과 같다. 세 개의 마크 OTL09a, OPM07a, OPAC12 가 F$_{2} 세대에서 종자 크기에 대한 QTL과 높은 유의성을 나타내었고, F$_{3}$ 세애데는 네 개의 마크 OTL09a, OPG19a, OPL09b, OPP11가 유의성을 나타내었다. 두 개의 마크 OPL09a, OPL09b 가 두 세대에서 유의성을 나타애어 종자 크기에 대한 QTL의 consistency가 인정되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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