The objective of this research was to provide the characterization and method for producing anti-E. coli O157:H7 antibodies in egg-laying hens and to determine if the antibody can restrain the proliferation of E. coli O157:H7 in-vitro. Selected antigenic fractions (whole cell, outer membrane protein and lipopolysaccharide (LPS)) from E. coli O157:H7 were injected to hens in order to produce anti-E. coli O157:H7 antibodies. The immune response and the egg yolk antibodies of laying hens against the whole cell, outer membrane protein and LPS antigens were monitored by ELISA. The level of antibodies against whole cell antigen monitored through ELISA sharply increased after the initial immunization, and it was found to be maximum on day 49 however, the level was maintained up to day 70. Antibodies (5 mg/ml) directed against the whole cell inhibited E. coli proliferation 10-13 times more than outer membrane protein or LPS. The antibody response against the whole cell antigens appeared to have higher activity in restraining the proliferation of E. coli O157:H7 than antibody against outer membrane protein or LPS. Results reflected that increasing the IgY's in the egg yolk could prevent greater economic losses due to human and animal health from pathogenic bacteria i.e. E. coli O157:H7.
Twenty three strains of Escherichia (E) coli O157 : H7 isolated from Korea, Japan, USA were analyzed by pulsed-field gel electrophoresis (PFGE) of XbaI-digested chromosomal DNA and multiplex polymerase chain reaction. Various PFGE patterns of E. coli O157 : H7 were found on the same farm. Most of the E, coli O157 : H7 strains had shiga-like toxin (slt) II gene only (43.5%) or both slt I and slt II genes(30.4%). eaeA gene was highly conserved in the E. coli O157 : H7. There was no correlation between PFGE and slt gene patterns. The results indicate that various genotypes of E. coli O157 : H7 have spread throughout the country and genomic DNA patterns generated by PFGE are highly specific for different strains and have significant value in epidemiologic investigations of infectious disease outbreaks.
This study was investigated about the antibacterial effects of aqueous garlic extract (AGE) against Escherichia coli O157:H7 (E. coli O157:H7), Salmonella typhimurium (S. typhimurium) and Staphylococcus aureus (S. aureus). The minimum inhibitory concentration (MIC) of AGE against E. coli O157:H7, S. typhimurium, and S. aureus was 24, 48 and 24 mg/mL, respectively. In addition, the minimum bactericidal concentration (MBC) of AGE against E. coli O157:H7, S. typhimurium, and S. aureus was all of 96 mg/mL. The growth of E. coli O157:H7 was significantly inhibited at the concentration of AGE 24 mg/mL at 24 hr post-incubation (p < 0.01), but that of S. aureus was not significantly inhibited at the same concentration. However, the growth of S. aureus at the concentration of AGE 96 mg/mL was significantly inhibited at 24 hr post-incubation compared to that of untreated bacteria (p < 0.01). At the concentration of AGE 48 (p < 0.05) and 96 mg/mL (p < 0.001), the growth of S. typhimurim was significantly inhibited at 24 hr after incubation compared to that of untreated bacteria. With the results of this study, AGE can be used as alternative to antibiotics and chemical food preservatives.
Treatments of irradiation alone and/or in combination with heat were investigated for the sterilization of Escherichia coli O157: H7. D values of the strain were 129.2 min at $50^{\circ}C$, 27.1 min at $55^{\circ}C$, and 2.4 min at $60^{\circ}C$. The survival effect of E. coli O157:H7 during heating at various media was investigated. On heating at temperature of $60^{\circ}C$ for 10 min, the strain was generally more resistant in the media containg such chemical substrates such as 0.03 M cysteine, 1% sodium citrate or 5% sucrose, whereas this strain was appeared weaker in the chemical substrates added group such as 1% meat extract, 1% casein or 1% casamino acid. In the case of irradiation alone, $D_{10}$ value of E. coli O157:H7 was 0.116 kGy, and inactivation factors were $17{\sim}25$ at doses of 2 to 3 kGy. Pre-and post-irradiation heating showed the same $D_{10}$ value about 0.07 kGy. And Inactivation factors were $25{\sim}41$ at doses of 2 to 3 kGy. Therefore, combination treatment with heat and irradiation significantly increased in inactivation rate by increasing radiation sensitivity of E. coli O157:H7.
Namgung, Min;Lim, Yeon-Jeong;Kang, Min Kyu;Oh, Chang-Sik;Park, Duck Hwan
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.29
no.12
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pp.1975-1981
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2019
Recently, outbreaks of food-borne diseases linked to fresh produce have been an emerging public health concern worldwide. Previous research has shown that when human pathogens co-exist with plant pathogens, they have improved growth and survival rates. In this study, we have assessed whether Escherichia coli O157:H7 benefits from the existence of a phytopathogenic bacterium and the underlying mechanisms were further investigated. When Pseudomonas syringae pv. tomato DC3000 (Pst DC3000) and E. coli O157:H7 were co-inoculated by either dipping or infiltration methods, the populations of E. coli O157:H7 increased; however, no effect was observed when type three secretion system (T3SS) mutants were used instead, suggesting that E. coli O157:H7 benefits from the presence of Pst DC3000. In addition, this study confirmed that the E. coli O157:H7 populations increased when they occupied the tomato leaf intercellular space; this colonization of the interior of the leaves was possible due to the suppression of the PAMP-triggered immunity (PTI) by Pst DC3000, in particular with the AvrPto effector. In conclusion, our data support a plausible model that E. coli O157:H7 benefits from the presence of Pst DC3000 via AvrPto suppression of the PTI resistance.
The antagonistic activity of probiotic strains (Bifidobacterium animalis BB-12, Bifidobacterium bifidum A, Bifidobacterium longum B6, Lactobacillus acidophilus ADH, Lactobacillus paracasei ATCC 25598, and Lactobacillus rhamnosus GG) against nalidixic acid resistant ($NA^R$) Escherichia coli O157:H7 MF1847, E. coli O157:H7 H2439, E. coli O157:H7 ATCC 43894, and E. coli O157:H7 C7927 was investigated using the agar-overlay, well diffusion, and broth culture tests. L. paracasei ATCC 25598 was the most effective probiotic strain in terms of in vitro antagonistic activity against $NA^R$ E. coli O157:H7, followed by L. rhamnosus GG, B. longum B6, and L. acidophilus ADH. The use of selected probiotic strains could be an effective pre-harvest intervention strategy to reduce the risk of $NA^R$ E. coli O157:H7 by maintaining a balanced microflora in animals and might provide many potential benefits in lieu of using antimicrobials.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.45
no.4
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pp.577-584
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2016
The objectives of this study were I) to compare the acid resistance (AR) of seven non-O157 Shiga toxin-producing Escherichia coli (STEC) serogroups, including O26, O45, O103, O111, O121, O145, and O157:H7 STEC isolated from various sources, in 400 mM acetic acid solution (AAS) at pH 3.2 and $30^{\circ}C$ for 25 min with or without glutamic acid and II) to determine strain survival upon exposure to simulated gastric fluid (SGF, pH 1.5) at $37^{\circ}C$ for 2 h after acid adaptation in apple, pineapple, orange, and strawberry juices at pH 3.8, $4^{\circ}C$ and $20^{\circ}C$. Results show that the O111 serogroup strains had the strongest AR (0.12 log reduction CFU/mL) which was very similar to that of O157:H7 STEC (P>0.05), compared to other serogroups in AAS without glutamic acid, whereas O26 serogroup strains showed the most sensitive AR. However, there was no significant (P>0.05) difference of AR among seven serogroups in AAS with glutamic acid. In the SGF study, 05-6545 (O45:H2), 08023 (O121:H19), and 03-4669 (O145:NM) strains adapted in fruit juices at $4^{\circ}C$ and $20^{\circ}C$ displayed enhanced survival with exposure to SGF for 60 min compared to 06E0218 (O157:H7) strains (P<0.05). In addition, 4 STEC strains adapted in pineapple juice at $4^{\circ}C$ showed enhanced survival with exposure to SGF for 60 min compared to those strains acid-adapted in the other fruit juices. Generally, adaptation at $4^{\circ}C$ in fruit juices resulted in significantly enhanced survival levels compared to acid-adapted at $20^{\circ}C$ and non-adapted conditions. The AR caused by adaptation in fruit juices at low temperature may thus increase survival of non-O157 STEC strain in acidic environments such as the gastrointestinal tract. These results suggest that more careful strategies should be provided to protect against risk of foodborne illness by non-O157 STEC.
Escherichia coli O157:H7 causes hemolytic uremic syndrome and hemorrhagic colitis in humans. The objectives of this study were to produce monoclonal antibody(MAb) against E. coli O157:H7 and to develop an enzyme linked immunosorbent assay(ELISA) for the rapid detection of E. coli O157:H7 in agri-stockbreeding. The characterization of MAb produced from hybridoma cell (HKEC 4G8-5) was validated by ELISA and Western blot. The produced MAb was specific to E. coli O157:H7 and showed weak cross-reaction to Staphylococcus aureus. The detection limit of ELISA based on 4G8-5 MAb was $10^5\;cell/mL$. Although the ELISA could not detect E. coli O157:H7 in the meat and sprout samples inoculated with $1{\times}10^1\;cell$/10 g without enrichment, the same samples after enrichment for 6 hr were confirmed to be positive by ELISA. These results indicated that the ELISA combined with short enrichment (6 hr) is useful tool for rapid screening of E. coli O157:H7 in various samples.
Lactobacillus acidophilus NCFM, Lactobacillus casei YIT 9018, Bifidobacterium longum 8001, and Bifidobacterium longum 8025 at the level of 106 cfu/$m\ell$ were cultured with 104 cfu/$m\ell$ of Escherichia coli O157:H7 KSC 109 or Salmonella typhimurium ATCC14028, in order to verify the effects of lactic acid bacteria and bifidobacteria on the growth of the pathogens. In the mixed culture of lactic acid bacteria with E. coli O157:H7 KSC 109, Growth inhibition and atypical microcolonies of E. coli O157:H7 KSC 109 were observed. The pathogens inoculated grew for 5 hors (pH 5.3), by the time L. acidophilus NCFM reached the exponential growth phase, and then the surviving pathogens were decreased to 101 cfu/$m\ell$ after 35 hours. When L. caseiYIT 9018 was grown with the pathogens, they grew for 10 hours (pH 4.6), by the time L. casei YIT 9018 reached the end of exponential growth phase, and then the surviving pathogens were decreased drastically. Up to the stationary growth phase of lactic acid bacteria, L. acidophilus NCFM exhibited stronger inhibition against the pathogens than L. casei YIT 9018 did, which might be attributed to its faster growth. Likewise bifidobacteria inhibited the growth of the pathogens tested, bifidobaceria was weaker in the inhibitory activity than lactic acid bacteria. When Bifidobacterium longum 8001 was cultured with the pathogens, E. coli O157:H7 KSC 109 was gradually ingibited at the stationary growth phase of bifidobacteria, atypical microcolonies were formed on Levine EMB medium after 48 hours, and Salmonella grew up to 106 dfu/$m\ell$, then was drastically ingibited at the exponential growth phage of Bifidobacterium longum 8001. But when Bifidobacteriuam longum 8025 was cultured with the pathogens, the pathogens grew to the same level of Bifidobacteriuam longum 8025 was cultured with the pathogens, the pathogens grew to the same lever of Bifidobacteriuam longum 8025 after 10 hours, then the surviving pathogens were decreased drastically.
Kim, Sung;Yook, Hong-Sun;Lee, Ju-Woon;Choi, Cheong;Byun, Myung-Woo
Korean Journal of Food Science and Technology
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v.30
no.5
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pp.1209-1213
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1998
The gamma-radiation sensitivity of four kinds of Escherichia coli O157:H7 was investigated in frozen cells $(-18^{\circ}C)$ with 0.1 M phosphate buffer and inoculated cells in beef. The maximum populations were observed at 12 hr when E. coli O157:H7 was incubated in the tryptic soy broth at $37^{\circ}C$. In the case of the frozen cells at logarithmic phase, the $D_{10}$ and $12D_{10}$ values of four kinds of E. coli O157:H7 were $0.09{\sim}0.15\;kGy$ and $1.08{\sim}1.80\;kGy$, and inactivation factors were $13.33{\sim}22.22$ and $20.00{\sim}33.33$ at radiation doses of 2 and 3 kGy, respectively. The radiosensitivity of inoculated E. coli O157:H7 in beef showed the $D_{10}$ value of $0.30{\sim}0.47\;kGy$, the $12D_{10}$ value of $3.60{\sim}5.64\;kGy$, and inactivation factor of $4.26{\sim}10.00$. The radiosensitivity of the frozen cells was higher than that of the inoculated E. coli O157:H7 in beef. Gamma irradiation at doses within the range of 1.5 to 3 kGy is considered to be an effective method to control E. coli O157:H7 in beef.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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