In March of 2003, tumors (galls) were observed on ginseng seedling roots in ginseng seedbeds at Yeoju, Gyeonggi province, Korea. Symptoms were spherical or galls with about 0.5-1.0cm in diameter formed on the upper through middle parts of the primary roots. Bacterial isolates obtained from the root galls were Gram-negative, rod-shaped with peritrichous flagella, aerobic, not forming yellow or orange colonies on nutrient glucose agar, yeast extract-dextrose $CaCO_3$ agar and nutrient-broth yeast extract agar, non-fluorescent on King's B agar, and non-spore forming, which were identical to characteristics of the genus Agrobacterium. They were identified as Agrobacterium tumefaciens with 0.732-0.993 similarities in 100% probability by the Biolog analyses. The 16S rRNA gene partial sequences of the six isolates tested (Genbank Accession EF486308-EF486313) were 100% homologous to those of other A. tumefaciens strains (GenBank accession AF501343, AY701900, AY701898, AY701899). The above results confirmed that this bacterium is A. tumefaciens. Pathogenicity of the bacteria was proved by the inoculation test on carrot root discs and tomato seedlings. This is the first description of A. tumefaciens causing root gall in ginseng seedling. The disease occurred locally and sparsely, but considering its appearances in seedbeds suggests that the ginseng root gall may become a threat to ginseng in Korea.
Many isolates from different forest soil layers did not show appreciable growth on full strength of the conventional nutrient broth (NB medium) but grow on its 100-fold dilution (DNB medium). These isolates were divided into four types according to organic nutrient concentration in the growth medium from $1^{-1}\;to\;10^{-4}$dilution of normal NB medium. Oligotrophic bacteria were type II and type IV which grew in $10^{-4}$ dilution of NB (1 mg C/l) medium. Sixty strains were isolated for obligate oligotrophic bacteria. Chemotaxonomic and phylogenetic characteristics of eleven isolates of acetylene-reducing (nitrogen-fixing) oligotrophic bacteria from forest soil were investigated. They showed similar characteristics: the cellular fatty acid mainly consisted of straight-chain unsaturated $C_{18:1}$ (60-84% of total fatty acids). Ubiquinone Q-10 and a high guanine plus-cytosine content(61-64 mol%) were found. Eleven isolates of nitrogen-fixing oligotrophic bacteria were found to be closely related by full 16S rDNA sequence simility and many common taxonomic traits. Analysis of full 16S rDNA sequences of eleven isolates indicated that they were more closely related to Bradyrhizobium (similarity values: 98.1-98.8%), Agromonas, Nitrobacter, and Afipia.
Bacillus lichemiformis Kll, a plant growth promoting rhizobacterium was reported as a producer of auxin, siderophore, as well as antifungal cellulase under some culture conditions. In vitro test, B. licheniformis Kll represented excellent antagonistic ability against Fusarium oxyspoum (KACC 40037), and showed broad spectrum against other phytopathogenic fungi. B. licheniformis Kll had cellulolytic activity toward not only carboxymethyl-cellulose (CMC) but also insoluble cellulose, such as fungal cell wall cellulose, filter paper (Whatman No. 1), and Avicel. In addition, we confirmed antifungal substance production by butanol-extract methods. The strain produced optimally the antifungal substance when it was cultivated at pH 9.0, 30${\circ}$C for 4 days on nutrient medium. The biological control mechanisms of B. lichemiformis Kll were caused by antifungal substance, cellulase and siderophore against phytopathogenic fungi.
Cordyceps (vegetable wasp and plant worm), an entomopathogenic fungi, has been used as a herbal medicine in Asian countries since ancient times. Cordyceps nutans is common but there is little research on this species. This study investigated the optimal culture conditions of C. nutans and the inhibitory effect on nitric oxide (NO) production in RAW 264.7 cell treated culture broth. The optimal conditions for the mycelial growth were $25^{\circ}C$ and pH 7.0-8.0. Mycelial growth was highest on mushroom complete medium (MCM), V8 juice agar (V8A), and yeast malt dextrose (YMD) medium. Mycelial growth on mushroom minimal medium (MMM) did not occur, so nutrient source was essential. Dextrose and sucrose as carbon sources, and ammonium citrate as a nitrogen source were satisfactory for mycelial growth. Cytotoxicity of C. nutans culture broth was not found in RAW 264.7 cells. C. nutans culture broth suppressed NO production of lipopolysaccharide (LPS)-stimulated RAW 264.7 cell in a dose-dependent manner. Thus, our results provided the optimal conditions for cultivation of C. nutans and showed that C. nutans may have excellent physiological activities.
To produce biopolymer, Metarrhizium anisopliae (Metschn.) Sorok was cultured in a medium containing glucose 1.0%, sucrose 2.0% , soluble starch 1.0%, yeast extract 0.5%, polypeptone 0.05%, K$_{2}$HPO$_{4}$ 0.1% MgSO$_{4}$ $\CDOT $ 7H$_{2}$O 0.02%. The culture broth was centrifuged and the polymer was harvested by adding methanol to the culture supermatant. When three times of methanol was added, the polymer was coagulated and precipitated. Then it was further purified through successive SK-1B, SA-20P, HP-20 column chromatographies. This polymer was designated as Biopolymer YU-122.C:H ratio of this Biopolmer YU-122 was 1:2 and small amount of N is detected by CHN analyzer. Glucose and glactose are main components of this polymer. Average molecular weight of this biopolymer was 1.7%$\times $10$^{6}$ by Sepharose 4B gel permeation chromatography. Optimal condition for biopolymer production was investigated. When 5% of mannitol was used as a carbon source, and polypepton as a N source, highest productivity of biopolymer was achieved. C/N ratio as nutrient was also a major factor in polymer production and its optimal ratio was 3.
The RK-temperate phage which infected with Bacillus cereus was isolated and the characters were investigated. The induction of RK-temperate phage from host bacterium attained by ultraviolet light irradiation (15W, 30cm, 30-120sec) and mitomycin C treatment (0.2-2 ug/ml). The host range of RK-temperate phage was not revealed with lysogenic and related strains of B. cereus. But B. cereus(PS) 352 which obtained by N-nitrosoguanidine treatment (1,000{$\mu}g/ml)$ to phage infected with host bacteria was sensitive bacteria of RK-temperate phage. RK-temperate phage was stabilized at the condition of nutrient broth (pH 7-8), Tris-buffer (pH 7-8) and ammonium buffer (pH 8-9) and Sorensen's phosphate buffer (pH 6-7), but unstabilized at other salt solutions and pH range. Also, thermostability was to $45^{\circ}C$ but unstabilized at above $50^{\circ}C$. At RK-temperate phage, the measurment values of head, neck, mid tail and end tail were 59nm, $9{\times}16nm,\;10{\times}189nm,\;and\;10{\times}14nm$ respectively. The morphology of head was regular polyhedron, and the end tail was coneate form. On the one hand, the number of capsid protein layer of tail were consist of 4, 35, and 1 at neck, mid tail, and end tail, respectively. RK-temperate phage was identified with DNA phage and G+C contents were 38.63. The latent time of RK-temperate phage was 30 minutes and the burst size was 70-80. And the host bacteria was lysed in case of multi-infection, above moi 1.
A thermophilic soil isolate Bacillus sp. Y-127 was selected for the production of thermostable amylase. The strain was used for the enzyme production and the thermostable amylase was characterized. The optimum cultural conditions for the enzyme production were 6$0^{\circ}C$ at pH 7.0 for 32 hours using a mineral medium containing 2% soluble starch and 0.2% yeast extract. The extra-cellular enzyme was purified about 123-folds with about 6% recovery. The purified enzyme was stable at pH between 4.0 and 7.0, and temperature up to 6$0^{\circ}C$.
Objective : The purpose of this study was to investigate the stability of bee venom according to the keeping method and period. Method : The author observed microbial contamination of bee venom in nutrient agar, broth, YPD agar and YPD media and antibacterial activity for S. aureus, E. coli manufactured 12, 6 and 3 months ago as the two type of room temperature and $4^{\circ}C$ cold storage. Results : 1. 1:3,000 and 1:4,000 diluted bee venom solution did not show microbial contamination both room temperature and cold storage within twelve months. 2. There was antibacterial activity of diluted bee venom for S. aureus in cold storage within twelve months and there was no antibacterial activity of diluted bee venom for S. aureus in twelve months, room temperature storage. 3. We could not observe the zone of inhibition around paper disc of all for E.coli. in 1:3,000, 1:30,000 and 1:3,000,000 diluted bee venom solution, respectively. According to results, we expect that diluted bee venom solution is stable both cold and room temperature storage within twelve months.
Park, Geun-Tae;Son, Hong-Joo;Kim, Jong-Goo;Lee, Sang-Joon
Journal of Microbiology and Biotechnology
/
v.8
no.1
/
pp.61-66
/
1998
A microorganism which degrades phenol and co-metabolizes trichloroethylene (TCE) was isolated from Yangsan stream after enrichment in a medium containing phenol as the sole carbon source. The isolate EL-43P was identified as the genus Rhodococcus by its morphological, cultural and physiological characteristics. Phenol-induced cells of Rhodococcus sp. EL-43P degraded TCE. Toluene and nutrient broth could not replace the phenol requirement. The optimal conditions of initial pH and temperature of media for growth were 7.0~9.0 and $30~50^{\circ}C$, respectively. Rhodococcus sp. EL-43P could grow with phenol up to 1,000 ppm. Growth was inhibited by phenol at a concentration above 1,500 ppm. It was observed that Rhodococcus sp. EL-43P was able to degrade 90% of phenol (1,000 ppm) after 40 h in a culture. Phenol-induced cells of Rhodococcus sp. EL-43P degraded 95% of $5{\mu}M$ TCE in 6 h. Rhodococcus sp. EL-43P hardly degraded TCE above $100{\mu}M$.
Biological control of soilborne plant pathogens by the addition of antagonistic microorganisms to the soil may offer a practical supplement or alternative to existing disease management strategies that depend heavily on chemical pesticides. Soil amendment with antagonistic microbes was non-effective because of high cost, low efficacy, and inconvenient usage on the treatment course. Therefore, seed coating formulation for the application of biological seed treatments has been being to apply successful disease suppression for many important crops. The objectives of this study were to investigate the optimal condition for the spore production of biocontrol agent Bacillus subtilis YBL-7 and the liquid coating formulation that contained a suspension of a proper aqueous binder, as well as a ground fine solid particulate material. The maximum yield has been obtained from 60 hrs-old culture at 30$\circ$C in spore forming (SF) medium containing 0.8% nutrient broth, 0.05% yeast extract, 10$^{-1}$ M MgCl$^{2}$, 10$^{-4}$ M MnCl$^{2}$, 10$^{-5}$ M dipicolinic acid, and pH 6.5. The optimal condition of dried spore preparation was achieved when cells of B. subtilis YBL-7 was heat-dried with 50$\circ$C for 2 hrs.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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