한국 재래종 오골계(천연기념물 265호)의 난백으로부터 직접결정법에 의하여 lysozyme을 분리하였다. 분리된 1 % lysozyme의 Staphylococcus aureus 57, Bacillus subtilis ATCC 6633과 Escherichia coli NIHJ-JC2에 대한 항균력을 육즙 배지 속에서 lysozyme 단독으로, 또는 몇 개의 항균성 물질들과 조합하여 배양한 후 측정하였다. 그 결과, 1% lysozyme은 공시된 모든 세균에 대하여 뚜렷한 세균의 증식억제효과(약 $12{\sim}16%$를 나타내었고, 항균성 물질들과 조합하여 측정한 증식억제상의 상승효과는 S. aureus에 대해서는 0.001% magnolol과 0.001% honokiol과의 조합에서 높았고(각각 22%와 14%), E. coli에 대해서는 0.0005% erythromycin, honokiol, magnolol 그리고 phospholipase(0.005%)의 순(각각 상승효과 26,22,17,6%)으로 나타났다. 그러나, B. subtilis에 대해서는 오직 erythromycin과의 조합에서만 상승효과가 관찰되었고, 그 수준(52%)도 매우 높았다.
길항균주의 기초배양 조건 및 특성은 nutrient broth 배지를 사용하여 조사하였고, 그 결과 온도는 $286^{\circ}C$, pH는 6이었으며 효소활성은 chitinase로 관찰이 되었다. 대량배양 조건은 pseudomonas medium을 이용하였고 위와 동일한 기초 배양조건들을 사용하였으며, 항균활성과 생육정도를 동시에 충족시키는 탄소원과 질소원을 조사하였다. 그 결과 탄소원 13종 중에서 glucose, 질소원은 8종류 중에서 $(NH_4)_2SO_4$로 나타났다. 또한 각각의 탄소원과 질소원의 농도는 1%, 0.1%에서 가장 좋은 것으로 나타났다.
A biosensor based on the measurement of capacitance changes has been designed and fabricated for simple and realtime detection of bacteria. Compared to an impedance measurement technique, the capacitance measurement can make additional measurement circuits simpler, which improves a compatability for integration between the sensor and circuit. The fabricated sensor was characterized by detecting Escherichia coli(E. coli). The capacitance changes measured by the sensor were proportional to E. coli cell density, and the proposed sensor could detect $1{\times}10^6$ cfu/ml E. coli at least. The real-time detection was verified by measuring the capacitance every 20 minutes. After 7 hours of E. coli growth experiment, the capacitance of the sensor in the micro volume well with $4.5{\times}10^5$ cfu/ml of initial E. coli density increased by 20 pF, and that in another wells with $1.5{\times}10^6$ cfu/ml and $8.5{\times}10^7$ cfu/ml initial E. coli density increased by 56 pF and 71 pF, respectively. The proposed sensor has a possibility of the real-time detection for bacterial growth, and can detect E. coli cells with $1.8{\times}10^5$ cfu in nutrient broth in 5 hours.
Bacillus sphaericss 1593균주를 ultra violet light (366nm, 253.7nm)와 dimethyl sulfate으로 처리하여 다수의 감온성 돌연변이체를 분리하여 이중 25균주를 선택하였고 24개의 감온성 돌연변이체는 $42^{\circ}C$의 제한온도에서 전혀 성장을 하지 않았으며, 9개의 감온성 돌연변이체는 제한온도 $42^{\circ}C$에서 허용온도의 성장과 비교하여 1/2정도의 감소를 보였다. 기타 2개의 감온성 돌연변이체는 저온 민감성인 감온성 돌연변이체로서 허용온도($30^{\circ}C$)에서의 성장이 제한온도($42^{\circ}C$) 성장보다 감소를 보였다. 이러한 결과에 따라서 감온성 돌연변이체를 치사군과 비치사군 및 저온민감성 감온성 돌연변이체로 분리할 수 있었다. 또한 치사군의 제한온도에서의 발육은 고체배지 및 액체배지 양쪽에서 성장을 하지 않는 반면 비치사군들의 돌연변이체들은 제한온도 $42^{\circ}C$에서 고체배지 및 액체배지의 성장은 허용온도에서 배양한 결과보다 저조한 성장을 나타내었다. 감온성 돌연변이체들은 $42^{\circ}C$에서 12시간 배양한 후 허용온도인 $30^{\circ}C$ 액체배지로 이식하여 배양한 결과 치사군중 ts-U1112, ts-D1290, ts-D1342, ts-D1504 돌연변이체들은 성장을 계속하지 않았으며, ts-U351, ts-U828, ts-U892, ts-D1350, ts-D1479, ts-D2601과 ts-D2801 돌연변이체들은 성장이 계속됨을 관찰할 수 있었다.
천연향균물질인 자몽씨 추출물을 0.01~0.03% 첨가하여 내열성 포자형성균인 Bacillus stearothermophilus를 비롯하여, 저온성 세균인 Bacillus subtilis, 식품 독성을 일으키는 Staptylococcus aureus 등에 대하여 생장억제 효과를 분석 하였다. 그리고 이 추출물을 실제 공정에 이용하기 위한 현장실험에서는 두유에 자몽씨 추출물을 0.2% 첨가 시 B. stearothermophilus의 성장은 억제 되었으나 완전사멸은 되지 않았고 B. subtilis와 S. aureus는 각각 48 h과 72 h내에 사멸되었다. 그러나 이러한 조건은 경제성, 유화안정성, 관능 상에 문제가 발생되며, 그 해결방안으로 두유에 자몽씨 추출물의 0.015% 첨가와 $121^{\circ}C$에서 10 min간 처리하는 열처리조건을 병행하므로서 균을 완전히 사멸하고 제품의 안정성과 관능 상의 문제점 해결 가능성을 높일 수 있었다.
Bacterial strain BAS23 was isolated from rice field soil and identified as Bacillus amyloliquefaciens. Based on dual culture method results, the bacterium BAS23 exhibited potent in vitro inhibitory activity on mycelial growth against a broad range of dirty panicle fungal pathogens of rice (Curvularia lunata, Fusarium semitectum and Helminthosporium oryzae). Cell-free culture of BAS23 displayed a significant effect on germ tube elongation and mycelial growth. The highest dry weight reduction (%) values of C. lunata, H. oryzae and F. semitectum were 92.7%, 75.7%, and 68.9%, respectively. Analysis of electrospray ionization-mass spectrometry (ESI-MS) and $^1H$ nuclear magnetic resonance (NMR) spectroscopy revealed that the lipopeptides were iturin A with a C14 side chain (C14 iturinic acid), and a C15 side chain (C15 iturinic acid), which were produced by BAS23 when it was cultured in nutrient broth (NB) for 72 h at $30^{\circ}C$. BAS23, the efficient antagonistic bacterium, also possessed in vitro multiple traits for plant growth promotion and improved rice seedling growth. The results indicated that BAS23 represents a useful option either for biocontrol or as a plant growth-promoting agent.
토양미생물 및 잔디 추출액에 의한 제초제 dicamba의 분해성을 평가하기 위하여 본 실험을 수행하였다. Dicamba를 분해하는 토양미생물 5종을 enrichment culture에 의해 토양으로부터 분리하였으며, 이들 균주는 Acidovorax sp., Alcaligenes sp. 및 Variovorax sp.로 동정되었다. Dicamba를 10 ppm 수준으로 처리한 무기배지에서 분리균에 의한 dicamba 분해는 배양 21일 후에 평균 90% 이상이었으며, 분해산물로 5-hydroxydicamba가 검출되었다. 한국잔디 (Zoysia Japonica S.)를 phosphate buffer로 추출하여 추출액에 의한 dicamba 분해를 조사한 결과 dicamba의 반감기는 $2.5{\sim}2.7$일 이었으며, 대사산물로 소량의 4- 및 5-hydroxydicamba가 검출되었다.
유기인계 살충제인 fenirothion에 의하여 생성되는 폐기물과 폐수를 생물적 방법으로 처리하는 방법을 찾기 위하여 fenitrothion 분해미생물을 이용하는 연구를 수행하였다. 이 미생물은 fenitrothion을 함유하는 NB 선택배지를 이용하여 분리되었으며, Gram(+), 막대형, 포자형성 등의 형태적, 생화학적 특징들에 근거하여 Bacillus sphaericus NFo1으로 동정되었다. NB 배지에서 fenitrothion을 분해하는 최적 배양조건 혹은 농약 분해 조건을 결정하는 연구를 수행한 결과 최적 배양온도, 초기 pH, 균체 접종량이 각각 $35^{\circ}C$, 7.5, $OD_{660}$ 값이 1.5인 균체량으로 결정되었다. 이상의 최적 분해조건에서 fenitrothion은 5일 이내에 200mg/L의 고농도 배양에서도 90% 이상이 분해됨을 확인하였다.
The potential for ochratoxin A (OTA) degradation by swine intestinal microbiota was assessed in the current study. Intestinal content that was collected aseptically from swine was spiked with 100 ppb OTA and incubated for 6 and 12 h at $39^{\circ}C$. An OTA assay was conducted using the incubated samples, and it was found that 20% of the OTA toxin was detoxified, indicating the presence of microbes capable of OTA degradation. Twenty-eight bacterial species were isolated anaerobically in M 98-5 media and 45 bacterial species were isolated using nutrient broth aerobically. Screening results showed that one anaerobic bacterial isolate, named MM11, detoxified more than 75% of OTA in liquid media. Furthermore, 1.0 ppm OTA was degraded completely after 24 h incubation on a solid 'corn' substrate. The bacterium was identified by 16S rDNA sequencing as having 97% sequence similarity with Eubacterium biforme. The isolation of an OTA-degrading bacterium from the swine natural flora is of great importance for OTA biodegradation and may be a valuable potential source for OTA-degradation enzymes in industrial applications.
수산물 가공에 있어서 품질개량제로 널리 사용되고 있는 sodium polyphosphate, sodium pyrophosphate, 및 polymixer가 위생지표세균 및 식중독 원인세균등 여러세균의 생리, 생육에 미치는 영향을 조사한 결과는 다음과 같다. 1. 중합인산염의 항균력은 Escherichia colisk Salmonella와 같은 Gram음성 균에 비하여 Staphylococcus aureus, Bacillus cereus 및 Bacillus subtilis와 같은 Gram양성균에서 강하게 나타났다. 2. 중합인산염으로 처리 하였을 때 Gram양성균인 Staphylococcus aureus에서는 균체성분의 누출이 확인 되었으나 Gram음성균인 Escherichia coli에서는 균체성분의 누출을 확인할 수 없었다. 3. Sodium polyphosphate $3.5\%$ 용액에 침지한 냉동 명태 fillet는 대조구 보다 대장균군은 $39\~72\%$, 생균수는 $27\~50\%$ 감소 되었으며, 중합인산염 처리는 균의 동결 저항성을 약화 시키는 것으로 나타났다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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