This study was carried out to develop of environmental risk assessments and the biosafety guide for Vitamin E enhanced transgenic soybean at LMO (Living Modified Organism) isolation field. In LMO quarantine area of National Institute of Agricultural Sciences, insect species diversities and population densities on vitamin E enhanced transgenic soybean and non-GM soybeans (Willams 82 and Seoritae) were investigated. A total of 17,717 individuals of 77 species from 8 orders were collected in LMO isolation field. In three type soybeans field, total of 5,250 individuals in Vitamin E enhanced transgenic soybean, 5,510 individuals in Willams 82, and 6,957 individuals in Seoritae were collected, respectively. There was no difference between the population densities of insect pests, natural enemies and other insects on Vitamin E enhanced transgenic soybean and Willams 82, while natural enemies density on Seoritae was higher than on Vitamin E enhanced transgenic soybean, but insect pests density on Vitamin E enhanced transgenic soybean was higher. These results provided the insects diversity for risk assessment survey of Vitamin E enhanced transgenic soybean and suggested that the guideline could be useful to detect LMO crops.
Candidemia is a major cause of nosocomial infections resulting in increased morbidity and mortality. It remains a serious risk in inpatients and increases medical treatment costs. From 2009 to 2018, Candida strains (3,533) isolated from blood culture tests at the S Hospital were analyzed according to the period, year, sex, age, ward, etc. During the entire period, 54,739 of 717,996 blood culture tests showed a positive rate (7.6%) and the Candida isolation rate was 3,533 (6.4%) out of 1,036 patients. Among the Candida isolates, C. albicans was most common (33.8%), followed by C. tropicalis (28.6%), C. glabrata (19.8%), C. parapsilosis (7.8%), and C. krusei (4.0%). In early (2009~2013)/late (2014~2018) isolation, C. tropicalis decreased by 3.8% and C. glabrata increased by 3.4%. After 50 years of age, the higher the separation frequency. C. parapsilosis (31.3%) in 1~10s, C. tropicalis (30.3%) and C. glabrata (27.6%) in 41~50s, and C. tropicalis (28.6%) in 80s are relatively frequent. has been separated C. krusei was isolated in a relatively high proportion from females (60.9%). Therefore, a systematic and continuous nosocomial infection control system should be established for appropriate treatment as per antifungal treatment guidelines. The system should continuously monitor the distribution of Candida species and provide rapid identification results.
The study was conducted to isolate and identify highly fibrolytic anaerobic fungi from the guts of a Hanwoo steer and a Korean native goat, and then investigate the characterization of cellulolytic activity of an anaerobic fungus. Twenty-one anaerobic fungal colonies were isolated in the study, in which 16 colonies were isolated from the rumen contents of the Hanwoo steer and 5 colonies from the duodenal fluids of the Korean native goat. Four anaerobic fungi were selected based on higher cellulolytic enzyme activities to identify under a optical microscope. NLRI-M003 and -T004 belong to Neocallimastix genus and NLRI-M014 belongs to Piromyces genus based on the morphology of their thallus, sporangia, rhizoid and the number of flagella. NLRI-M001 appeared to be an unknown strain of anaerobic fungi due to its different morphology from existing types of anaerobic fungi, though the morpholgoy is similar to Orpinomyces sp. Supplementation of 2% anaerobic fungal culture(NLRI-M003) in rumen-mixed microorganisms increased in vitro DM degradability of rice straw and filter paper up to 4 and 11%, respectively, compared with non-supplementation(control). CMCase and xylanase activities in in vitro culture were also higher in 2% fungal supplementation than controls in both rice straw and filter paper substrates.
Haghi, Afsaneh Motevalli;Khoramizade, Mohammad Reza;Nateghpour, Mehdi;Mohebali, Mehdi;Edrissian, Gholam Hossein;Eshraghian, Mohammad Reza;Sepehrizadeh, Zargham
Parasites, Hosts and Diseases
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v.50
no.1
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pp.15-21
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2012
In Iran, $Plasmodium$$vivax$ is responsible for more than 80% of the infected cases of malaria per year. Control interventions for vivax malaria in humans rely mainly on developed diagnostic methods. Recombinant $P.$$vivax$ apical membrane antigen-1 (rPvAMA-1) has been reported to achieve designing rapid, sensitive, and specific molecular diagnosis. This study aimed to perform isolation and expression of a rPvAMA-1, derived from Iranian patients residing in an endemic area. Then, the diagnostic efficiency of the characterized Iranian PvAMA-1 was assessed using an indirect ELISA method. For this purpose, a partial region of AMA-1 gene was amplified, cloned, and expressed in pET32a plasmid. The recombinant $His-tagged$ protein was purified and used to coat the ELISA plate. Antibody detection was assessed by indirect ELISA using rPvAMA-1. The validity of the ELISA method for detection of anti-$P.$$vivax$ antibodies in the field was compared to light microscopy on 84 confirmed $P.$$vivax$ patients and compared to 84 non-$P.$$vivax$ infected individuals. The ELISA cut-off value was calculated as the mean+2SD of OD values of the people living in malaria endemic areas from a south part of Iran. We found a cut-off point of OD=0.311 that showed the best correlation between the sera confirmed with $P.$$vivax$ infection and healthy control sera. A sensitivity of 81.0% and specificity of 84.5% were found at this cut off titer. A good degree of statistical agreement was found between ELISA using rPvAMA-1 and light microscopy (0.827) by Kappa analysis.
Journal of Korean Society of Occupational and Environmental Hygiene
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v.10
no.1
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pp.1-17
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2000
Carcinogen-DNA adduct analysis has potential for biomonitoring the earliest effects of exposure to many chemical carcinogens. They are the covalent reaction products of electrophiles and nucleophilic sites on DNA and the initial damage to DNA induced by many carcinogens. So many researchers begin to use them as biomarker for monitoring the earliest exposure of carcinogens and develop the effective analytical techniques about them. Randerath, Gupta and coworkers(1981, 1982) has also developed a $^{32}P$-postlabelling method as one among them. A major project for biomonitoring workers with carcinogen-DNA adducts is to develop non-invasive samples instead of tissues of target organs such as baldder and lung. This study use the exfoliated urothelial cells in urine for examine benzidine-DNA adducts. The content of exfoliated urothelial cells is not enough to significantly measure DNA content with spectrophotometer, and require the another way. So firstly washing the collected cells with PBS and 70% ethanol and centrifuge them for removing the crystals in urine, which block the isolation of DNA adducts. And then, measure the total nucleotide after $^{32}P$-postlabelling for calculating RAL. $[{\gamma}-^{32}P]ATP$ using for $^{32}P$-postlabelling, can synthesize with $[^{32}P]H_3PO_4$, and reagent and enzyme mixture (RM, EM), which is very economic in case of requiring a lot of them. Chromatography was composed of two steps. First step was to separate adduct ones from unadducted nucleotide, and secondary step was separate each adduct, which were performed with 4 kinds of solvents and different directions on TLC. With this procedure, we measure the DNA adducts in exfoliated urothelial cells of workers who were employed in benzidine and benzidine-dye company. RAL of adducts were $89.0{\times}10^7$ and $57.0{\times}10^7$ in them. In conclusion, we can significantly measure the DNA adduct in exfoliated urothelial cells by using the above $^{32}P$-postlabelling procedures, and use them to be biomonitoring workers who exposed carcinogens.
A bacterium producing acidic cellulase was isolated from pig feces. The isolate, ATC6 strain, was found to be Gram-positive, non-motile, catalase-positive, and spore-forming stain. Under an electron microscope, the cells were observed to be rod-shaped. The isolate was identified as Bacillus amyloliquefaciens ATC6 on the basis of morphological and biochemical properties as well as 16S rRNA gene sequences. Optimum pH and temperature for the cellulase activity of the culture supernatant of B. amyloliquefaciens ATC6 were found to be pH 4.5 and $55^{\circ}C$, respectively. More than 80% of its maximum activity was maintained at pH 4.0. The cellulase activity was maintained at temperatures ranging from 35 to $55^{\circ}C$ after 2 h incubation at pH 4.5, whereas it's activity decreased rapidly at $65^{\circ}C$.
Growth sensitivity of bifidobacteria on oxygen hindered their industrial applications so that it was necessary to select oxygen-tolerant strains. Studies on their responses to oxygen might facilitate the effective utilization of bifidobacteria in industry. Oxygen-tolerant strain of Bifidobacterium longum JI-1 was able to remove 3% dissolved oxygen within 10 min whilst oxygen-sensitive strain of B. adolescentis, slime non-former, was not. The ability to remove environmental oxygen seemed to be related to the oxygen-tolerance of bifidobacteria. Mutant B. longum ADJ-1 was induced from the B. longum JI-1 under microaerobic atmosphere. There were no differences in sugar utilization pattern, NADH oxidative enzymes and cellular fatty acid compositions between them. The maximal cell density of the mutant was a little bit reduced to 81% of that of the mother strain. However, the mutant formed thick slime layer around its cell. The layer visualized with confocal scanning laser microscopy from the mutant was 6 ${\mu}{\textrm}{m}$ in diameter but that from the mother strain was only 3 ${\mu}{\textrm}{m}$. Therefore, the improved tolerances of the mutant might come from the slime layer, indicating the increase of the layer might be one of oxygen tolerance mechanisms for bifidobacteria.
No, Jin-Gu;Byun, Sung-June;Yang, Hyeon;Ock, Sun A;Woo, Jae-Seok;Lee, Hwi-Cheul;Hwang, In-sul;Kim, Ji-Youn;Park, Sang Hyoun;Lee, Joo Young;Oh, Keon Bong
Journal of Embryo Transfer
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v.33
no.3
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pp.129-137
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2018
Acute vascular rejection has been known as a main barrier occurring in a xenograted tissue of alpha 1,3-galactosyltransferase knock-out (GalT KO) pig into a non-human primate (NHP). Adenosine which is a final metabolite following sequential hydrolysis of nucleotide by ecto-nucleotidases such as CD39 and CD73, act as a regulator of coagulation, and inflammation. Thus xenotransplantation of CD39 and CD73 expressing pig under the GalT KO background could lead to enhanced survival of recipient NHP. We constructed a human CD39 and CD73 expression cassette designed for endothelial cell-specific expression using porcine Icam2 promoter (pIcam2-hCD39/hCD73). We performed isolation of endothelial cells (pAEC) from aorta of 4 week-old GalT KO and membrane cofactor protein expressing pig ($GalT^{-MCP/-MCP}$). We were able to verify that isolated cells were endothelial-like cells using immunofluorescence staining analysis with von Willebrand factor antibody, which is well known as an endothelial maker, and tubal formation assay. To find optimal condition for efficient transfection into pAEC, we performed transfection with GFP expression vector using four programs of nucleofection, M-003, U-023, W-023 and Y-022. We were able find that the program W-023 was optimal for pAEC with regard to viability and transfection efficiency by flow cytometry and fluorescent microscopy analyses. Finally, we were able to obtain $GalT^{-MCP/-MCP}/CD39/CD73$ pAEC expressing CD39 and CD73 at levels of 33.3% and 26.8%, respectively. We suggested that pACE isolated from $GalT^{-MCP/-MCP}$ pig might be provided as a basic resource to understand biochemical and molecular mechanisms of the rejections and as an alternative donor cells to generate $GalT^{-MCP/-MCP}/CD39/CD73$ pig expressing CD39 and CD73 at endothelial cells.
In an effort to understand epizootiological aspects of infectious laryngotracheitis (ILT), a total of 56 chicken flocks in six farms comprised of 35 broiler breeder, 13 commercial layer and 6 layer breeder flocks. were investigated. The farms experienced ILT during the period of one year from June, 1982. In most farms the birds were vaccinated against ILT just before or after the disease outbreak. In two of the farms in which ILT broke out in winter, it was possible to contain the disease in only one or two fleets without transmitting it to the remaining 5 to 7 flocks in the farms by adopting strict isolation procedures for the affected flocks. In regarding inter- flock spreading speed, it took an average of 6 days for flocks rearing on floor and 11 days for those in cages. Among the flecks in rearing cages. transmission among laying flocks was much faster. taking an average of 8 days, compared to non-laying flocks of 17 days, suggesting spreading of the disease by means of egg trays or egg collection process. Peak mortality was observed between 5 and 10 days after from the time of appearance of first dead birds from the disease and the period of mortality, with an average of 18 days, was not influenced by rearing systems, breeds and age of birds. Mortalities in the affected flocks ranged from lo/e to 19.8%, with an average of 6.5 %, and was also not influenced by the above variables except significantly lower mortality in immature broiler breeder flocks (2.9%) compared to immature layer (11.8%) and mature broiler breeder flocks (6.9%). In one breeder farm in which all the birds were kept on floor and ILT broke out in summer, mortality in male birds in all seven flocks of 37 weeks of age or older was as high as twice of that in female birds in the same flocks. This trend was not observed in one 31 weeks old flock and was reversed in another 14 weeks old flock in the farm.
The most significant effect of excess water in wetlands is the isolation of the soil from the atmosphere and the prevention of O2 from diffusing into soil. The blockage of atmospheric O2 induces biological and chemical processes that change soil from oxidized into reduced state. When dry soil develop into hydric soil, redox potential is dropping. The redox potential is a indicator of hydric soil and affect chemical function of wetlands. To reveal characteristics of wetland soil, redox potential was measured in Jinkwannaedong ecological conservation area from May in 2003 to March in 2004. Redox potentials in May ranged from 5 mV at 25 cm depth to 200 mV at 10 cm depth. It decreased to about -200 m V at all depths and continued until October. In winter, redox potential was slowly increased; it was the highest at 5 cm depth and lowest at 20 cm depth. Annual variations of redox potential in 20 cm depth showed the same pattern at 5 sites; low in growing season and high in non-growing season. This results indicates that soils of study sites are in hydric state and methanogenesis is occurring in Jinkwannaedong ecological conservation area.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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