• 폴리머
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• 제28권6호
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• pp.538-544
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• 2004

Z-라이신 올리고머를 사슬연장제로 하고 D-다이페닐이소시아네이트와 폴리테트라메틸글리콜을 반응시켜 주사슬에 L-라이신 분절을 함유하는 폴리우레틴 (PULL)을 합성하였다. PULL 표면의 아민기와 인슐린의 공유 결합으로 인슐린 고정화 폴리우레탄 (PULL-In)을 제조하였다. Bradfold법으로 측정한 고정화 인슐린의 양은 약 0.30 nmol/$\textrm{cm}^2$이였다. $^3$H-thymidine 분석방법과 광학 현미경법으로 NIH/3T3 섬유아세포와 표면 개질된 PULL의 상호작용을 조사하였다. 그 결과 PULL-In 필름 표면에서의 세포 성장 속도는 다른 기질에서보다 높았다. 또한 고정화된 인슐린에서의 세포증식이 배양액에 용해된 인슐린에서와 거의 유사한 특성을 나타내었다.

• 대한예방한의학회지
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• 제5권1호
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• pp.144-150
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• 2001

The cytotoxic activity of Cratalariae sessiliflorae on cultured NIH 3T3 fibroblasts and human oral epithelioid carcinoma cells (KB) were evaluated by 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazoliumbromide (MTT) colorimetric method These fractions of methanol extract of Cratalariae sessiliflorae showed inhibitory effect in vitro in the milligram range against KB cell lines. In general, the antitumor activities of these fractions were does-dependent over the milligram range. The comparison of IC50 values of these fractions in tumor cell lines showed that their susceptibility to these fractions decrease in the following order: Fr. 4> Fr. 6> Fr. 10> Fr. 2> Fr. 11> Fr. 3> Fr. 8> Fr. 7> Fr. 9> Fr. 1> Fr. 5 by the MTT assay. These fractions were tested for their cytotoxic effects on NIH 3T3 fibroblasts using MTT assay. They exhibited potent cytotoxic activities in vitro in the milligram range against NIH 3T3 fibroblasts. In general, the cytotoxic activities of these fractions were does-dependent over the milligram range. The comparison of CD50 values of these fractions in NIH 313 fibroblasts shows that their susceptibility to these fractions in decrease the following order: Fr. 10> Fr. 9> Fr. 2 = Fr. 4> Fr. 8> Fr. 11> Fr. 1 = Fr. 7> Fr. 3> Fr. 5 = Fr. 6 by the MTT assay. These results suggests that fraction 5 has the most growth - inhibitory activity against KB cell lines.

• 한국환경농학회지
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• 제16권2호
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• pp.149-155
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• 1997

Carbofuran에 의하여 손상된 NIH3T3 섬유모세포(mouse skin fibroblast)를 보상시킬 수 있는 물질을 개발하기 위한 기초자료를 제시하고자 carbofuran이 NIH3T3 섬유모세포에 미치는 세포독성을 검정하고, carbofuran의 독성에 대한 phenobarbital sodium(PB) 및 3-methylcholantherene(3-MC)의 보상효과를 비교${\cdot}$분석하였다. Carbofuran의 $IC_{50}$ 결정은 배양중인 NIH3T3 섬유모세포의 각 well당 1, 25, 50, $100{\mu}M$의 carbofuran을 첨가하여 48시간 배양한 후 MTT(Tetrazolium MTT), NR(Neutral red) 및 SBR(Sulforhodamine B protein)정량을 실시하여 이들에 대한 각각의 $IC_{50}$을 구하였으며, 여기에서 구한 carbofuran의 $IC_{50}$농도와 여러 농도의 PB 또는 3-MC를 배양액에 첨가하여 48시간 배양한 후 MTT, NR 및 SRB 정량을 실시하여 보상효과를 측정하고 광학현미경적 관찰을 실시하였다. Carbofuran의 세포독성 실험결과를 보면 MTT흡광도는 carbofuran의 농도증가에 따라 감소하였으며 $MTT_{50}$은 $60.7{\mu}M$이었고, NR흡광도는 $100{\mu}M$농도에서 급격히 감소하였으며, $NR_{50}$은 $82.5{\mu}M$이었고, SRB흡광도는 $50{\mu}M$농도에서 급격히 감소하였으며 $SRB_{50}$은 $87.0{\mu}M$로써 50%의 세포독성을 나타냈다. 보상효과 실험에서는 carbofuran IC50과 PB의 조합처리의 경우 MTT 정랑과 NR정량에서는 유사하게 PB $100{\mu}M$처리군에서부터 유의성있는 보상효과가 나타났으나, SRB정량에서는 보상효과가 인정되지 않았다. Carbofura $IC_{50}$과 3-MC의 조합처리의 경우 MTT정량은 3-MC $50{\mu}M$처리군에서부터, NR정량과 SRB정량의 경우는 동일하게 3-MC $100{\mu}M$처리군에서부터 유의성있는 보상효과가 나타났다. 세포의 광학현미경적 관찰소견의 경우에서도 carbofuran과 PB 또는 3-MC 조합처리 실험군 모두에서 세포가 회복되는 것을 관찰할 수 있었다. 이상의 결과에서 PB와 3-MC 모두 carbofuran의 세포독성을 감소시킬 수 있는 물질임을 알 수 있었다.

• 대한임상검사과학회지
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• 제42권3호
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• pp.116-124
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• 2010

This study was aimed to clerify the cytotoxicity of some plant extracts such as Hosta longissima HONDA (HL), Hemerocallis fulva var. Kwanso REGL (HFVK), Hemerocallis fulva L (HF), Macrocapium officinale NAKAI (MO) and Mentha canadensis var. piperascens HARA (MCVP), the cultured NIH3T3 fibroblasts were treated with 25, 50, 100, 150 and $200{\mu}g/mL$ of five kinds of plant extracts for 48 hours, respectively. The cytotoxicity of plant extracts was measured by MTT and NR assays for the cell viability, and XTT assay for the cell adhesion activity. In this study, HL, MO and FHVK extracts showed the range of midtoxic-non toxic by the criteria of chemical cytotoxicity. While, the HF and MCVP extracts showed midtoxic. In the extract cytotoxicity, HL, MO and FHVK extracts showed non-toxic by the criteria of extract cytotoxicity. While, HF extract was determined as lower-toxic. In the responsive sensitivity of each plant extract on colorimetric assays, HF extract was sensitive to mitochondrial enzyme by MTT assay, lysosomal enzyme by NR assay and mitochondrial nucleus by XTT assay. While, MCVP extract was sensitive to mitochondrial enzyme by MTT assay and lysosomal enzyme by NR assay than other assays. While, HL, HFVK and MO extracts were most sensitive to NR assay. Cell culture is one of useful materials in the screening of cytotoxic and recovary effect on the putative chemical agents or plant extract. And also, colorimetric assay is regarded as very useful tools for quantitative measurement of cytotoxic effect on plant extracts in vitro.

• 약학회지
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• 제54권3호
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• pp.151-156
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• 2010

Cytotoxicity of cadmium on NIH 3T3 fibroblasts was utilized in order to discover antitoxic compound in Galgeuntang extract in this study. Treatment groups were chosen as follows; control (medium only), $MTT_{50}$ group and five experimental groups. MTT {3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazoliumbromide} method was performed to evaluate the cytotoxicity of cell organelles and $IC_{50}$ was also measured. Accordingly we have examined the detoxification effects of Galgeuntang extract on cadmium-treated NIH 3T3 fibroblasts to observe morphological changes by the light microscopy. Galgeuntang extract showed cytoprotective effects on cadmium-induced cytotoxicity. Furthermore, Galgeuntang showed a dose-dependency in detoxication. The phenolic content of Galgeuntang ethanol extract was higher than that of water content. These results suggest that Galgeuntang extract may be used as a cytoprotective agent against cadmium (II)-mediated cytotoxicity.

• 대한예방한의학회지
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• 제12권3호
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• pp.47-58
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• 2008

The anticancer and antioxidant effect of different lengths of saturated fatty acids was tested on NIH3T3 fibroblasts and human skin melanoma cellsn in this study. The cell existence rate and antioxidizing capacity and optic reservation of cells were observed. This saturated fatty acid was concentration-dependent. IC50 Concentrations in NIH3T3 fibroblasts, human skin melanoma cells and DPPH radical scavenging activity of fatty acid was increasing the order of carbochain length ; caprylic acid < lauric acid < palmitic acid < stearic acid. The reduction in cell number and morphological change in human skin melanoma cells was increasing the order of carbochain length ; caprylic acid < lauric acid < palmitic acid < stearic acid. These results suggest that carbochain length of fatty acid can be used as structure-activity relationships for anticancer and antioxidant.

• KSBB Journal
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• 제24권4호
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• pp.397-402
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• 2009

본 연구에서는 몇 가지 생물공학 기반 기술로서 이미 한방 화장품의 소재로 사용되고 있는 쇠비름 에탄올 추출액의 tyrosinase 저해, collagen 합성, 항염증 기대 효과, 항노화 대한 효능을 알아보기 위하여 B16F10 mouse melanoma cell, NIH3T3 mouse embryonic fibroblast, MCF-7 human breast adenocarcinoma cell에 쇠비름 추출액을 처리하여 실험하였다. 실험 결과, 쇠비름 에탄을 추출액 (0.5mg/mL)은 tyrosinase 발현을 억제하여 멜라닌 합성을 억제하며, 농도 의존적으로 NIH3T3 mouse fibroblast 세포의 collagen 합성을 촉진시켰다. 또한 2.0 mg/mL 농도의 쇠비름 추출액은 목단피보다 더욱 효과적으로 cytokine (TNF-$\alpha$)에 의한 NF-${\kappa}B$ 활성을 억제시켰다. Doxorubicin에 의한 과노화에서도 효과적인 항노화 작용을 하는 것으로 나타났다. Tyrosinase 합성을 억제하므로 미백에 대한 효과와 세포의 생장을 도와 collagen 합성을 촉진함으로서 노화방지에 효과적인 것으로 사료되며, TNF-$\alpha$에 의한 NF-${\kappa}B$의 활성화를 저해함으로서 염증반응 억제 효과도 기대 할 수 있다.

• 한국해양바이오학회지
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• 제7권1호
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• pp.28-34
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• 2015

We examined cell regeneration efficiency of brown marine algae living in Jeju coast for search of a novel therapeutic device with cutaneous wound healing materials. The five algae were collected and compared with epidermal growth factor (EGF) as a positive control in the assays of cell proliferation and cell migration of NIH3T3 fibroblast cells. Among the 80% methanol extracts of these brown algae, the two algal extracts from Ishige foliacea and Colpomenia bullosa showed the proliferative effects of the cells similar to the effect of EGF. Besides it was found that Colpomenia bullosa extract significantly enhanced cell migration of NIH3T3 cell. In the study, therefore, we confirmed that the Colpomenia bullosa extract improved proliferation of NIH3T3 cell and a potential candidate for cultaneous wound healing.

• 생명과학회지
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• 제13권5호
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• pp.551-558
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• 2003

C형 간염바이러스는 간암을 야기하는 심각한 바이러스이다. C형 간염바이러스의 core 단백질의 과발현은 섬유아세포를 암화시키는 것으로 알려져 있다. Phospholipase D (PLD)의 효소활성이 세포증식 신호전달에 의해 활성화되어 있으며, 사람의 암조직에서 과발현 및 활성이 증가되어 있는 것으로 알려져 있다. 본 연구의 목적은, core 단백질에 의해 암화된 세포에서 PLD가 어떻게 조절되는지를 이해하고자 하는 것이다. 자극이 없는 상태에서뿐만 아니라 PMA에 의해 유도되는 PLD효소활성은, 암화된 세포에서 더 증가하였으며, control 세포와 core 단백질에 의해 암화된 세포에서 PLD와 PKC 단백질의 발현은 서로 유사하였다. PKC 특이적인 억제제와 PKC의 세포막으로의 이동에 관한 실험을 통해서, PKC-d가 암화된 세포에서 PMA에 의해 유도되는 PLD활성의 증가에 중요하게 관여하고 있음을 밝혔다. 이러한 결과는, PLD가 core 단백질에 의해 유도되는 세포의 암화과정에 관여하고 있을 것으로 추정된다.

• 한국산학기술학회논문지
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• 제20권8호
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• pp.477-484
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• 2019

포유류에 존재하는 Collectin-Placenta 1 (CL-P1)을 포함한 여러 종류의 scavenger 수용체는 주로 내피 세포, 대식 세포 및 평활근 세포 표면에 발현되는 분자이다. 이들 분자는 산화 된 저밀도 지질 단백질 (oxLDL)에 결합하여 처리 할 수 있는 세포 표면 당 단백질이다. 이들 분자 중 케르세틴이 CL-P1 활성화에 어떤 영향을 미치는가를 확인하였다. 케르세틴은 산화 반응을 담당하는 자유 라디칼의 제거제 역할을 하여 산화를 중지시키는 항산화제로 알려져 있다. 본 논문에서는 마우스 CL-P1 유전자 promoter 부분의 전사 시작 점부터 -500 번째 염기까지의 단편을 DNA 중합효소를 이용하여 클로닝 하였다. 그 후에 대식세포 계열인 RAW264.7 및 섬유아세포계열의 NIH3T3 세포에 도입하여 케르세틴이 CL-P1 유전자 발현에 어떠한 영향을 미치는지에 대한 연구를 하였다. 이 부위에는 세포주기 조절 인자인 E2F 결합부위를 비롯해서 여러 종류의 전사 인자가 결합하는 염기서열이 다수 위치하고 있다. 이러한 500염기 단편을 pGL4.10 기본 벡터 및 프로모터에 연결시킨 후 세포에 도입시켰다. 그리고 배양 중에 케르세틴을 처리하여 유전자 발현양을 형광 색소 발현기법으로 측정하였다. 그 결과 유전자 발현이 시작되는 앞쪽 부분의 -250에서 -350사이의 염기들이 CL-P1 단백질을 만드는데 중요하다는 것을 확인하였다. 그 중에서도 E2F결합 부위가 결정적인 것 이라는 것을 DNA 돌연변이 실험을 통해 확인 하였다. 또한 부착 세포인 RAW264.7 배양액에 케르세틴을 첨가 한 결과, 배양용기 표면에서 탈락하는 현상을 확인하였다. 즉 발현된 CL-P1단백질이 케르세틴에 의해 세표 표면의 부착 분자에도 영향을 주는 것을 확인하였다.