Electrophysical phenomena at the silicon semiconductor-electrolyte solution interfaces were analyzed based on the zeta potential of the electrical double layer and microelectrophoresis. The suspensions were composed of the p or n-type silicon particles suspended in the KCI or pH buffer solutions. The approximate diameter of the prepared and sampled sioicon semiconductor pardticles was 1.5\ulcorner. The sign of the zeta poetntials of the p and n-type silicon particles in the KCl and pH buffer solution was positive. A range of electrophoretic mobilities of the p and n-type silicons in the KCl solutions was 5.5-8.9x10**-4 cm\ulcornerV-sec and 4.2-7.9x10**-4cm\ulcornerV-sec, respectively. The range of zeta potentials corresponding to the electrophoretic mobilities is 70.4-114.0mV nad 53.9-101.2mV, respectively. On the other hand, a range of electrophoretic mobilities of the p and n-type silicons in the pH buffer solutions was 1.1x10**-4-2.2x10**-3cm\ulcornerV-sec and 0-2.1x10**-3cm\ulcornerV-sec, respectively. The range of zeta potentials corresponding to the electrophoretic mobilities is 14.1-281.6mV and 0-268.8mV, respectively. The zeta potentials and electrical double layers of the doped silicon semiconductors are decisively influenced by the positively charged ions in the solutions. The maximum values of the zeta potentials in the KCl solutions appeared at a concentration of about 10-\ulcorner. The isoelectric point of the n-type silicon semiconductors appeared at about a pH 7. The effect of the space charge of the doped silicon semiconductors can be neglected compare with the effect of the surface charge.
오니(汚泥)로부터 사이클로헥사놀 이용능이 우수한 균(菌)을 분리하여 Acinetobacter calcoaceticus C-15로 동정하였다. A. calcoaceticus C-15의 배양을 위한 최적배지의 조성은 0.2% 사이클로헥사놀, 0.11% $NH_4Cl$, 0.05% $KH_2PO_4$, 0.2% $K_2HPO_4$, 0.02% $MgSO_4{\cdot}7H_2O$ 및 0.05% yeast extract이었다. 이 균(菌)의 생육최적(生育最適) pH는 7.2, 온도는 $33^{\circ}C$ 부근이었다. 사이클로헥사놀 및 사이클로헥사논을 기질로 했을 때 $33^{\circ}C$에서 본(本) 균(菌)의 증식속도는 각각 $0.27hr^{-1}$ 및 $0.15hr^{-1}$이었다. 통기배양에서 사이클로헥사놀에 대한 증식수율은 1.0이었다. 본(本) 균(菌)은 사이클로헥사놀과 사이클로헥사논 이외에 유기산으로 benzoate, adipate, acetate, citrate를 잘 이용하나 salicylate, phthalate, ${\beta}$-hydroxybenzoate, gluconate는 이용할 수 없었다. 알코올로는 에탄올, 1-부탄올, 1-펜탄올을 잘 이용하나 메탄올, 1-헥산올, m-크레졸, 글리세롤은 잘 이용하지 못했다. 또 본(本) 균(菌)은 크실로스 이외의 당류는 잘 이용할 수 없었다. 본(本) 균(菌)의 무세포추출액(無細胞抽出液)으로부터 사이클로헥사놀을 사이클로헥사논으로 전환시키는 사이클로헥사놀 dehydrogenase활성을 검출하였으며, 이 효소의 조효소는 $NAD^+$ 이었다.
Male rats were given a single injection of iron, and temporal changes in iron content and iron-induced effects were examined in heart cellular fractions. Over a period of 72 h, the contents of total and labile iron, reactive oxygen species, and NO in tissue homogenate, nuclear debris, and postmitochondrial fractions were mostly constant, but in mitochondria they continuously increased. An abrupt decrease in membrane potential and NAD(P)H at 12 h was also found in mitochondria. The respiratory control ratio was reduced slowly with a slight recovery at 72 h, suggesting uncoupling by iron.While the ATP content of tissue homogenate decreased steadily until 72 h, it showed a prominent increase in mitochondria at 12 h. Total iron and calcium concentration also progressively increased in mitochondria over 72 h. Enzyme activity of the oxidative phosphorylation system was significantly altered by iron injection: activities of complexes I, III, and IV were reduced considerably, but complex II activity and the ATPase activity of complex V were enhanced. A reversal of activity in complexes I and II at 12 h suggested reverse electron transfer due to iron overload. These results support the argument that mitochondrial activities including oxidative phosphorylation are modulated by excessive iron.
Monodehydroascorbate reductase (MDHAR)는 활성산소종 제거에 중요한 효소이다. 본 연구에서는 MDHAR 유전자를 현사시나무(Populus alba ${\times}$ P. glandulosa)에서 분리하여 이를 PagMDHAR1이라 명명하고 유전자의 구조와 발현특성을 조사 하였다. PagMDHAR1 유전자는 434개의 아미노산으로 구성된 단백질을 암호화하며 3개의 FAD/NAD(P)H 결합 영역이 보존되어 있다. PagMDHAR1은 현사시나무의 염색체에 1 ~ 2 copy가 존재하며, 배양세포와 꽃에서 높게 발현하였다. 현탁배양세포의 생장주기에서는 유도기와 초기 지수생장기에서 높게 발현하였다. 또한 PagMDHAR1은 건조와 염, 저온, 상처 및 ABA 처리에 의해서 발현이 증가하는 것으로 나타났다. 따라서 PagMDHAR1은 ABA를 경유한 신호전달경로를 따라 다양한 스트레스에 반응하며, PagMDHAR1의 기능이 활성산소종에 의해 유도되는 산화 스트레스 방어기작에서 중요한 역할을 할 뿐만 아니라 스트레스 내성에도 기여할 것으로 생각된다. 이는 향후 PagMDHAR1 형질전환 식물체 생산 등 생명공학적 기술을 이용한 유전자 기능에 대한 연구를 비롯하여 신기능성 임목의 개발에 활용 가능할 것으로 기대된다.
The analytical methods for the analysis of cyclosporine (CsA), a fluorescence polarization immunoassay (FPIA) and HPLC method, were compared in a pharmacokinetic study of two CsA soft capsule formultaions ($Sandimmun^{\circledR}$; Sandoz, $Implanta^{\circledR}$; Hanmi). Sixteen healthy volunteers completed the study and each subjected single doses ($4{\tiems}100$ mg) of the test and the reference formulations in a two-way crossover design with a one-week drug-free interval between doses. Following each administration, whole blood concentrations of CsA were monitored over a period of 24 hour by both FPIA and HPLC methods. Blood concentrations nad pharmacokinetic parameters determined by either analytical method showed large intersubject variation, with the FPIA data showing relatively higher magnitude of intersubjecte variation than the HPLC data. The blood concentrations determined by FPIA were 1.1-1.3 times higher than those determined by HPLC. There were strong and significant correlations between the two methods (r>0.83 : p<0.0001). Intersubuject variation for the $AUC_{inf}{\;}and{\;}AUC_{24hr}$ of the test formulation was slightly reduced without statistical significance (paried -t test : p>0.05 $t_{max}$ was earlier nad $C_{max}$ was slightly lower for the test formulation, $AUC_{24h}, {\;}C_{max}, {\;}T_{max}$ and MRT determined separately from the data obtained by the two methods for the two formulations were examined by analyses of variance (ANOVA) for the bioequivalency evaluation. Results of ANOVA and confidence limits of terst/reference ratios of $AUC_{24th}$, $C_{max}$, $t_{max}$ and MRT, and statistical tests indicated the bioequivalence of the two formulations (i.e., test/reference ratio was within $100{\times}20%$) except for $C_{max}$ and $t_{max}$. The mean of tmax also showed 11.1% and 9.3% differences but the detection limit were 29.2% and 29.6% as determined by FPIA and HPLC resepctively. This experiments suggest that the data yielded for the two formulations demonstrated that they were bioequivalent.
Glucose 6-phosphate dehydrogenase (G6PDH, EC 1.1.1.49) in Deinococcus radiophilus, an extraordinarily UV-resistant bacterium, was investigated to gain insight into its resistance as it was shown to be involved in a scavenging system of superoxide $(O_2^{-1})$ and peroxide $(O_2^{-2})$ generated by UV and oxidative stresses. D. radiophilus possesses two G6PDH isoforms: G6PDH-1 and G6PDH-2, both showing dual coenzyme specificity for NAD and NADP. Both enzymes were detected throughout the growth phase; however, the substantial increase in G6PDH-1 observed at stationary phase or as the results of external oxidative stress indicates that this enzyme is inducible under stressful environmental conditions. The G6PDH-1 and G6PDH-2 were purified 122- and 44-fold (using NADP as cofactor), respectively. The purified G6PDH-1 and G6PDH-2 had the specific activity of 2,890 and 1,033 U/mg protein (using NADP as cofactor) and 3,078 and 1,076 U/mg protein (using NAD as cofactor), respectively. The isoforms also evidenced distinct structures; G6PDH-1 was a tetramer of 35 kDa subunits, whereas G6PDH-2 was a dimer of 60kDa subunits. The pIs of G6PDH-1 and G6PDH-2 were 6.4 and 5.7, respectively. Both G6PDH-1 and G6PDH-2 were inhibited by both ATP and oleic acid, but G6PDH-1 was found to be more susceptible to oleic acid than G6PDH-2. The profound inhibition of both enzymes by ${\beta}-naphthoquinone-4-sulfonic$ acid suggests the involvement of lysine at their active sites. $Cu^{2+}$ was a potent inhibitor to G6PDH-2, but a lesser degree to G6PDH-1. Both G6PDH-1 and G6PDH-2 showed an optimum activity at pH 8.0 and $30^{\circ}C$.
Oxidative stress-induced melanocyte apoptosis is linked to the immune system and plays a critical role in the pathogenesis of vitiligo. Aquaporin-3 (AQP3), which is downregulated in vitiligo keratinocytes, regulates intracellular H2O2 accumulation. However, the role of AQP3 in oxidative stress is uncertain in vitiligo. This study investigated the effect of downregulated AQP3 on oxidative stress in vitiligo using lesional and non-lesional skin specimen sets from vitiligo patients and primary cultured adult normal human epidermal keratinocytes, with or without downregulation and overexpression of AQP3 in the presence or absence of H2O2 treatment. The levels of nuclear factor E2-related factor 2 (NRF2) and/or its main target, NAD(P)H quinone dehydrogenase 1 (NQO-1), were lower in the lesional keratinocytes and cultured keratinocytes with AQP3 knockdown, but were increased in keratinocytes upon AQP3 overexpression. Ratios of NRF2 nuclear translocation and NQO-1 expression levels were further reduced in AQP3-knockdown keratinocytes following H2O2 treatment. The conditioned media from AQP3-knockdown keratinocytes treated with H2O2 contained higher concentrations of reactive oxygen species (ROS). Moreover, the number of viable melanocytes was reduced when the conditioned media were added to the culture media. Overall, AQP3 downregulation in the keratinocytes of patients with vitiligo can induce oxidative stress in neighboring melanocytes, leading to melanocyte death.
Several strains of spore-forming lacticacid bacteria were isolated from natural sources such as soils, cereals, and foods. The general morphological and physiological characteristics of the strain 6-4 were investigated nad compared with some other industrial strains. The effects of fructose-1,6-diphoshpate (FDP), adenosine triphosphate (ATP), and pH on the lactate dehydrogenase(LDH) activity of the strain were studied, and the changes in LDH activity and spore formation under various cultural conditions were researched. The results were as follows. 1. This strain was identified to Bacillus coagulans Hammer and distributed widely in natural sources. 2. The strain strongly converted various fermentation substrates in to L(+)-lacticacid in anaerobic conditioins, and many spores that were of great advantages to the industrial application were formed easily in the aerobic condition. 3. The LDH activity of this strain was activated by FDP and inhibited by ATP. The optimal pH for the enzyme activity was 6.0-6.5. 4. In the anaerobic culture condifion, the large amount of glucose added in the medium increased the LDH activity, but the cells were not committed to sporulate. 5. When none or a very small amount of glucose (less than 0.5%) was added to culture medium in the aerobic condition, the LDH activity was decreased and many spore were produced with final pH higher than 8.5. 6. The additioin of large amount of glucose (more than 2.0%) in aerobic culture increased the LDH activity and inhibited strongly the spore formation with final pH lower than 6.0.
Immobilon-AV Affinity membrane에 L-glutamate dehydrogenase를 고정하여 유리질 탄소전극에 부착시킨 전극을 사용하여 암모니아를 전류법으로 정량하였다. 이때 환원형의 NADH가 $NAD^+$로 산화될 때 전류를 +1.0 volt vs. Ag/AgCl에서 측정하였다. 효소 고정화된 membrane을 부착시킨 전극의 감응 특성은 다음과 같다. 곧 직선 감응 농도 범위는 $4.0\;{\times}\;10^{-5}\;{\sim}\;4.0\;{\times}\;10^{-4}$ M이었으며, 정량한계는 2.0 ${\times}\;10^{-6}$ M이었다. 또한 감응 시간은 2분이었으며 효소 고정화된 막의 최적 pH와 수명은 각각 pH 7.3∼7.6 (Dulbecco's buffer 용액)과 25일이었다. 그리고 다른 생리활성 물질의 방해는 없었다.
Marpani, Fauziah;Zulkifli, Muhammad Kiflain;Ismail, Farazatul Harnani;Pauzi, Syazana Mohamad
대한화학회지
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제63권4호
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pp.260-265
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2019
Alcohol dehydrogenase (ADH) (EC 1.1.1.1) was selected as the enzyme which will be immobilized on ultrafiltration membrane by fouling with different transmembrane pressure of 1, 2 and 3 bars. ADH will catalyze formaldehyde (CHOH) to methanol ($CH_3OH$) and simultaneously oxidized nicotinamide adenine dinucleotide (NADH) to $NAD^+$. The concentration of enzyme and pH are fixed at 0.1 mg/ml and pH 7.0 respectively. The objective of the study focuses on the effect of different transmembrane pressure (TMP) on enzyme immobilization in term of permeate flux, observed rejection, enzyme loading and fouling mechanism. The results showed that at 1 bar holds the lowest enzyme loading which is 1.085 mg while 2 bar holds the highest enzyme loading which is 1.357 mg out of 3.0 mg as the initial enzyme feed. The permeate flux for each TMP decreased with increasing cumulative permeate volume. The observed rejection is linearly correlated with the TMP where increase in TMP will cause a higher observed rejection. Hermia model predicted that at irreversible fouling with standard blocking dominates at TMP of 3 bar, while cake layer and intermediate blocking dominates at 1 and 2 bar respectively.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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