전남 담양지역의 시설재배 토마토에서 발생하는 arbuscular 균근균의 분포를 조사하였다. 총 21 농가의 토마토 재배 토양을 채취한 후 arbuscular 균근균의 포자를 분리하여 계수한 결과 $500{\mu}m$ 이상은 0.01개 정도, $355{\sim}500{\mu}m$는 0.02개 정도, $251{\sim}354{\mu}m$는 0.09개 정도, $107{\sim}250{\mu}m$는 0.9개 정도, $45{\sim}106{\mu}m$는 2.0개 정도였으며, 토양 g 당 평균 3.02개 정도의 포자밀도로 분포하였다. 토마토 뿌리에서 균근 감염 양상을 보면 vesicle 18.0%, hyphae 6.0%, arbuscule 2.0%등 전체적으로 26.0% 정도의 감염율을 보였다. 분리된 arbuscular 균근균 포자를 수단그라스에 재접종하여 4개월 정도 배양하여 arbuscular 균근균의 동정을 실시한 결과 Glomus sp., Gigaspora sp. 및 Acaulospora sp. 등으로 동정되었다.
Orchids are evolutionally known to be the most advanced plants in the order Liliales, and comprise approximately 1,000 genera and 35,000 species world-wide. In Korea, more than 110 species of Orchidaceae have been reported to be cultivated or to be collected in the wild. Orchids aye mostly dependant on orchid mycorrhizae(OM) throughout or in part of their life cycle. The OM endomycorrhizae belonging to basidiomycetes or rarley ascomycetes are needed for orchid seed germination. Various fungi, including plant pathogenic, antagonistic and symbiotic fungi, were isolated from the roots of orchid native to Korea. The OM fungi collected from the roots of Cymbidium goeringii were three species of Rhizoctonia namely, R. repens (anamorph state of Tulsanella repens), R. endophytica (Ceratobasidium cornigerum), and an unidentified species (possibly an anamorph of T. calospora). These symbiotic fungi induced peloton in the cortical cells of orchid roots, and differed biologically and in 18s rDNA sequences from plant pathogenic Rhizoctonia species. Also, the mycorrhyzal fungi enhanced the orchid root absorption of nitrogen sources and minerals from the soil. The activity of mycorrhizal fungal hyphae in the roots caused prevention from pathogenic fungi. In nature, the peloton is observed in the cortical cells of Cymbidium goeriingii roots, indicating mycorrhizal colonization in the native orchid roots. On the other hand, pathogenic fungi such as Fusarium and/or Rhizoctonia species are mostly isolated from commercial orchid plants. These suggest that application of symbiotic mycorrhizal fungi should be needed for orchid cultivation in nurseries and at the time of transplanting.
The genomic DNAs were extracted from roots of Glycine max and Sorghum bicolor, and compared with those from spores of two arbuscular mycorrhizal(AM) fungi, Glomus mosseae and Scutellospora heterogama. The partial small subunit(SSU) of ribosomal RNA genes were synthesized and amplified by polymerase chain reaction with the fungal specific primers, AM1 and NS31. By the recent molecular techniques, the presence of another AM fungal DNA were confirmed in the roots of two plants, and three sequences of rDNA fragments amplified were identified to be close to those of G. caledonium, G. fasiculatum and G. proliferum. The two AM fungi, both, were found to colonize at the cortical layers of plant roots collected in the fields, together.
Spores of arbuscular mycorrhizal fungi (phylum Glomeromycota) were isolated from rhizosphere soil collected in Korea. We identified the morphological characteristics of the spores and performed a phylogenetic analysis using the rDNA 18S, 5.8S, and 28S regions. To the best of our knowledge, we confirm the presence of three species of glomeromycotan fungi previously not reported in Korea, namely Acaulospora delicata, Dentiscutata colliculosa, and Racocetra alborosea. We described the morphological characteristics and results of phylogenetic analysis of these species.
Ten isolates of the orchid mycorrhizal fungi were isolated from the roots of Korean native orchid plants (Cymbidium goeringii) which inhabitate mainly in southern and western areas of Korea. The growth rates and color of the isolates in potato dextrose agar (PDA) were various. Microscopic observations of the hyphae isolated were identified as Rhizoctonia repens and R. endophytica var endophytica or their related species. R. repens was isolated from the roots of the Korean native orchids, but R. endophytica var endophyica was only isolated from the roots of the commercial orchids introduced from foreign countries. Also, the polymorephic patterns of genomic DNA extracted from selected isolates were compared with those of DNA extracted from the orchid mycorrhizal fungi isolated previously and similar band patterns were observed among those isolates. Five isolates of R. repens were selected and cultured at the oatmeal agar for investigating their symbiosis with orchid plants. The symbiotic specificity between orchid plants and isolated orchid mycorrhizal fungi was observe by growing orchids about six months in the greenhouse. The symbiotic responses of the commercial orchid plants with selected isolates were quite different form different isolates due to the genetic variations.
A very reliable and specific method for the identification of fungi in ectotrophic mycorrhizal symbiosis was developed using a specific PCR assay based on the amplification of the ITS1 region. To obtain specific data, an ITS-diagnostic assay was carried out that reveals genera and species specific sequences. Here, an application of one method is presented, which covers the identification of pure mycelia, basidiocarps as well as mixed samples such as ectomycorrhizal roots that were mingled with remains of the host plant. For this purpose a protocol was established that allowed the extraction of DNA from single mycorrhizal roots. In order to perform a specific ITS analysis we generated a new ITS-primer(ITS8) by a multiple alignment of five different genera and species of mycorrhizal fungi. The utilization of ITS1 and ITS8 resulted in specific PCR amplicons, which were characterized by sequencing without purification steps, even when the template DNA was associated with roots.
본 연구에서는 강원도 함백산에서 제비난초속(Platanthera) 난초인 제비난초(Platanthera chlorantha), 산제비난초(Platanthera mandarinorum) 2종과 은대난초속(Cephalanthera) 난초인 금난초 (Cephalanthera falcate), 은대난초(Cephalanthera longibracteata) 2종을 채집하였고, 식물 뿌리에서 균근균을 순수 분리 하였다. 분리한 균주는 형태적인 관찰과 난균근균 특이적 primer 인 ITS1-OF 와 ITS4-OF를 이용하여 분자생물학적인 방법을 통해 동정하였다. 그 결과 P. chlorantha에서 분리된 균주는 Epulorhiza anaticula로 동정되었는데, 이는 국내에서 처음으로 보고되는 종이며, 그 외 각 난초에서 Ceratobasidium sp., Tulasnella calospora, Tulasnella sp. 등을 분리하여 동정하였다.
본 연구는 균근균 접종이 포도삽목묘의 생장에 미치는 영향과 균근 형성율 그리고 형성 양상을 구명하고자 수행하였다. 포도 삽목시, 균근균 접종원을 처리한 거봉과 탐나라 품종은 무 접종처리 보다 엽수, 엽면적, 총 뿌리길이 그리고 뿌리 표면적이 크게 증가하였다. 그러나 켐벨어리 품종의 총 뿌리길이와 뿌리 표면적은 무처리구 (AMF-)와 비교하여 유의적인 차이가 없었다. 접종 8주후 균근균 접종 처리구 (AMF+)의 형성율은 22.5-32.5%이었으며, 12주 후 켐벨어리, 탐나라 그리고 거봉의 균근 형성율은 각각 29.6%, 28.8% 그리고 48.8%이었다. 반면 균근균 무처리구 (AMF-)는 균근형성 수준이 매우 낮았다.
Arbuscular mycorrhizal(AM) fungi have significant role for ecosystem structure and function. They are the major component of forest soil ecosystems and critically important for water and nutrient cycling in the system. To understand the ecology of AM fungi the fungal spores were collected, identified and counted in forest soils under various climatic and edaphic conditions. In relation to soil depth 90% of AM fungi spores and mycorrhizas distributed within 15cm soil depth. Number of spores per $100m{\ell}$ forest soil volume was 5 to 36 spores from 1 to 3 fungal species. AM fungal species diversity was higher in warmer climates, and more moist and fertile soils. The most frequently found species were Gigaspora decipiens irrespective of soil moisture and Gi. gigantea irrespective of soil fertility. In the Jeju island the soils of Cryptomeria japonica plantations and Miscanthus sinensis var. purpurascens meadow had more AM spores than the other soils. We suggest AM fungi be considered as keystones species when restoring a disturbed forest ecosystem.
Soil sieving을 통하여 4종(種)의 간석지식물(干潟地植物)들 (산조풀, 벌노랭이, 비쑥 및 띠등(等))과 관련되어 있는 Glomus속(屬)의 6종(種)과 Acaurospora 속(屬)의 1종(種)등 7종(種)의 vesicular-arbuscular mycorrhizal fungi를 분리(分離)하였다. Glomus속(屬)의 6종(種)은 G. albidum Walker & Rhodes, G. pulvinatum (Henn.)Trappe & Gerd., G. constrictum Trappe, G. sp. (4th type), G. caledonicum (Nicol. & Gerd.) Trappe & Gerd. (5th type) 및 G. sp. (6th type) 등이었으며, Acaulospora의 1종(種)은 A. scrobiculata 이었다. 7종(種)의 VA균(菌)가운데 G. mosseae (1st type), G. pulvinatum (2nd type) 및 G. sp.(4 type)의 3종(種)의 Glomus spp.가 가장 흔한 type들이었다. 산조풀과 비쑥의 근계토양(根系土壤)중에는 공(共)히 G. sp.(4th type)가, 벌노랑이와 띠의 근계토양(根系土壤)중에는 공(共)히 G. pulvinatum (2nd typc)이 가장 풍부(豊富)하게 존재(存在)한다는 사실(事實)을 알수 있었다. 본 연구(硏究)를 통(通)하여 토양(土壤)중 VA균종(菌種)의 다양성(多樣性)은 숙주식물에 달려있음을 확인(確認)할 수 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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