A 6-month-old male cat was presented for investigation of depression, loss of appetite, dehydration, pale conjunctival mucous membrane, weight loss, fast heart and respiratory rates, nasal discharge and cough. Nasal swabs collected from the studied cat. As the results of bacterial culture with nasal swabs, it was suspected with Mycoplasma spp. Also, Mycoplasma species was detected by the PCR reaction with Mycoplasma genus primers. At species PCR assay, the specimens evaluated for the presence of M. felis, M. arginini, M. gateae, and Acholeplasma laidlawii and the result was visualization of bands from 238 bp in agarose gel 1.5% showing M. felis amplicons in samples. In conclusion, we detected M. felis in a cat with respiratory disease. PCR was able to detect successfully M. felis infection in cats.
Two cats were obtained from a cat kennel. Over the previous 7 days, the cats had shown cough, anorexia, depression and nasal discharge. In this study, the consensus PCR was able to detect successfully Mycoplasma species in nasal swab samples of the cats. To identify feline mycoplasma species from the lung tissue of the cats with pneumonia, Mycoplasma species-specific PCR reactions were conducted. As the results, we could identify M. felis by the positive amplified DNAs. On the other hand, we could not detect any positive reactions with the PCR reaction for M. arginini, M. canis, M. edwardii, M. cynos, M. gateae, M. maculosum, M. molared, M. opalescens, M. spumans and Mycoplasma HRC-689. In conclusion, we detected M. felis from the kenneled cats with pneumonia. We suggested that this consensus PCR would be useful and effective for monitoring Mycoplasma species in various kinds of animals including cats. The application of preceding consensus PCR before the species-specific PCRs may be the most recommended strategy for the identification of Mycoplasma spp.
Bordetella (B.) bronchiseptica, Mycoplasma (M.) felis, and Chlamydia (C.) felis are considered as main bacterial pathogens of feline upper respiratory tract disease (URTD). In this study, a new triplex quantitative real-time polymerase chain reaction (tqPCR) assay was developed for the rapid and differential detection of these bacteria in a single reaction. The assay specifically amplified three bacterial genes with the detection limit of below 10 copies/reaction. The assay showed high repeatability and reproducibility, with coefficients of intra-assay and inter-assay variation of less than 1%. Based on the diagnostic results of the assay using 94 clinical samples obtained from cats with URTD signs, prevalence of B. bronchiseptica, M. felis, or C. felis was 10.6%, 36.2%, or 6.4%, respectively, indicating that the diagnostic sensitivity was comparable to those of previously reported monoplex qPCR assays. The dual infection rates for B. bronchiseptica and M. felis or M. felis and C. felis was 2.1% or 3.2%, respectively. These results indicated that M. felis has been widely spread, and its co-infection with B. bronchiseptica or M. felis has been frequently occurred in Korean cat population. The developed tqPCR assay will serve as a promising tool for etiological and epidemiological studies of these three bacterial pathogens and the prevalence data obtained in this study will contribute to expanding knowledge about the epidemiology of feline URTD in Korea.
Pathogens such as feline herpesvirus, feline calicivirus, Bordetella bronchiseptica, Chlamydia felis, Mycoplasma felis and Pasteurella multocida usually cause feline upper respiratory tract disease (URTD). Real-time PCR was used to analyze the detection and prevalence of the most common respiratory pathogens in cats with (n=69) and without respiratory signs (n=31). Pathogens were detected in 53 cats, divided into 37 (69.8%) with a single pathogen, 15 (28.3%) with two pathogens, and 1 (1.9%) with three pathogens. M. felis had the highest detection rate in 29 (42.0%) cats, P. multocida was detected in 18 (26.1%), FHV in 10 (14.5%), FCV in 7 (10.1%), B. bronchiseptica in 3 (4.3%), and C. felis in 2 (2.9%). M. felis was the most frequently detected pathogen in cats living outdoors without vaccination. Of the 37 cats infected with single pathogen, nasal discharge was observed in 13 (35.1%), ocular signs in 6 (16.2%), drooling in 5 (13.5%), dyspnea in 3 (8.1%), and asymptomatic in 10 (27.0%). In 51 outdoor and 49 indoor cats, pathogens were detected in 35 (68.6%) and 18 (36.7%) cats, respectively. Of the 29 cats infected with M. felis, 22 (75.9%) showed respiratory signs, and 7 (24.1%) were healthy. In the age of the 53 positive cats, 10 (18.9%) were under the age of 1 year, 26 (49.1%) were aged 1~3 years, and 17 (32.1%) were aged 3 years or older. Although the number of cats in the study was small, the results can provide valuable data on the prevalence of URTD in Korean cats.
8세 중성화 암컷 고양이가 만성 비강 삼출과 호흡곤란으로 내원하였다. 신체검사에서 오른쪽 비강의 출혈농성 삼출이 관찰되었고, 흡기성 호흡곤란과 코골기 증상, 종대된 오른쪽 하악 림프절이 확인되었다. 전혈검사와 혈청화학 검사에서 미약하게 증가한 헤마토크리트 값과 고글로불린혈증이 나타났으며, 혈청학적 및 PCR 기법을 이용한FeLV, FIV, Chlamydophila felis, Feline Calicivirus, Herpesvirus, Bordetella, Mycoplasma felis, H1N1 influenza 검사에서는 모두 음성이었다. 방사선 검사에서는 오른쪽 비강의 연조직 밀도 상승이 관찰되었고, CT촬영에서는 비중격의 위축과 골 용해가 확인되었다. 추가 검사로 실시한 하악 림프절 세포학 검사에서는 다양한 두께의 염색이 안 되는 협막을 갖는 곰팡이가 관찰되었으며, narrow based budding을 보이는 곰팡이도 관찰되어 크립토코쿠스 감염증으로 잠정진단하였다. 혈청학적 검사에서 크립토코쿠스 항원가는 1 : 32,768로 매우 높게 나왔다. 검사결과에 기초해서 곰팡이 감염 치료를 위해 fluconazole, clindamycin, tocopherol투여를 실시했으며 약물 투여 후 3일 이내에 환자의 증상은 극적으로 개선되었다. 장기적인 관찰과 추가 항원역가 검사를 실시하고자 하였으나 환자는 증상 개선 후 퇴원하여 재 내원하지 않았다.
A 5-year-old neutered male domestic short-haired cat presented with acute dyspnea characterized by open-mouth breathing and stridor for 2 days. Direct visualization via laryngoscopy revealed diffuse laryngeal swelling and severe thickening of the vocal folds bilaterally; thus, the upper respiratory tract was obstructed owing to severe edema. Neutrophil infiltration was found on fine needle aspiration of the larynx cytology, and no discrete mass with polyp or neoplasia was identified on diagnostic imaging. The cat was diagnosed with acute obstructive laryngitis, and a tracheostomy tube was immediately installed. After 17 days of treatment with steroids, doxycycline and azithromycin, the swollen larynx gradually improved, and there was no recurrence of laryngitis or respiratory obstruction. A feline upper respiratory polymerase chain reaction panel revealed Mycoplasma felis infection; however, it could not be determined whether it was pathogenic or opportunistic. Herein, we report a case of obstructive laryngitis in a cat. When respiratory obstruction due to acute laryngitis is identified, a good prognosis is expected with rapid and appropriate treatment.
Shen, Wen;Chen, Kaili;Sun, Yanming;Guo, Haiying;Chen, Dongmei;Cao, Yang
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제30권5호
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pp.736-742
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2017
Objective: Experiments were conducted to clone the sequence of Wild Argali short palate, lung and nasal epithelium clone 1 (SPLUNC1) cDNA, and to lay the foundation for further study the biological function of Wild Argali SPLUNC1. Methods: The complete sequence of Wild Argali SPLUNC1 cDNA was generated by rapid amplification of cDNA ends. The entire coding sequence was inserted into the pPIC9K vector and expressed in Pichia pastoris (P. pastoris) GS115. The recombinant SPLUNC1 protein was detected by Western blot and purified by $Ni^{2+}$ chelate affinity chromatography. The test of effect of the protein on Mycoplasma ovipneumoniae (MO) was performed with real-time polymerase chain reaction. Results: The Wild Argali SPLUNC1 cDNA was 1,076 bp with an open reading frame of 768 bp, which encoded a 26.49 kDa protein composed of 255 amino acids. Its amino acid sequence shared 98.4%, 96.9%, 94.5%, 90.2%, 80.8%, 78.4%, 78.3%, 72.5%, 72.3%, 68.8% identity with those of SPLUNC1 cDNA from Ovis aries (accession no. NP_001288334.1), Capra hircus (accession no. XP_005688516.1), Pantholops hodgsonii (accession no. XP_005979709.1), Bos taurus (accession no. NP_776851.1), Felis catus (accession no. XP_006929910.1), Homo sapiens (accession no. NP_001230122.1), Sus scrofa (accession no. NP_001005727.1), Chinchilla lanigera (accession no. NP_001269294.1), Mus musculus (accession no. NP_035256.2), and Rattus norvegicus (accession no. NP_742028.1), respectively. The recombinant protein corresponded to the expected molecular mass of 25.47 kDa as judged by sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis, and it was detected in the supernatant of P. pastoris, and it could be purified. The results from the test of inhibition effect of argali recombinant SPLUNC1 protein on MO showed that the product could inhibit MO very well (p<0.01). Conclusion: The amino acid sequence of Wild Argali SPLUNC1 was different from other organisms. The recombinant SPLUNC1 protein has good biological activity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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