The fusion between protoplasts of Ganoderma applanatum and oidia of Lyophyllum ulmarium (Hypsizigus marmoreus) was induced with polyethylene glycol and $CaCl_2$. When transferred to Ganoderma complete medium plates, fusants showed mixed morphologies both parents. During three times subcultivation the fusants were changed similar to those of L. ulmarium type. All fusants produced oidia, clamp connections and basidiocarps similar to those of L. ulmarium. Isozyme pattern of esterase of interorder fusants showed both parental and non-parental bands. Each individual fusant did not showed both parental and non-parental bands. Each individual fusant did not show any differences in mycelial growth rate, colony morphology, esterase band pattern and basidiocarp.
Boxwood is a representative ornamental shrub that is widely used in landscaping horticulture. After pruning, damaged leaves or stems of boxwoods are unavoidably vulnerable to infection by various plant pathogens. Several boxwood diseases caused by fungi, such as Volutella blight and Macrophoma leaf spot, have been reported worldwide including Republic of Korea. In this study, we isolated and identified fungal pathogens of boxwood diseases that occurred in Korea and characterized their morphological and taxonomic characteristics. Boxwood samples showing blight symptoms were collected in Seoul, Republic of Korea, and the putative fungal pathogens Pseudonectria buxi, P. foliicola, and Neofusicoccum buxi were successfully identified. Investigation of the morphological features of the field isolates, including mycelial growth and conidial morphology, and phylogenetic analysis of multiple DNA barcode loci revealed that there were some morphological and genetic variations among isolates, but all of the analyzed isolates were closely related to the corresponding reference strains. We also found that P. foliicola strains were more virulent than P. buxi, and the N. buxi strains isolated in this study were weak pathogens or saprophytes. The results of our study will contribute to the development of control strategies for boxwood diseases caused by fungi and accelerate research on the complex ecology of boxwood diseases.
This study was conducted to investigate morphological characteristics of veiled lady mushroom (Dictyophora sp.). Morphological observation of mycelium showed the presence of chlamydospore-like swelling cells, and typical mycelial champ connections. Fruiting body of the veiled lady mushroom consists of cap, velum, stipe, and vulva. Oval-shaped eggs were surrounded by exodermis, gelatin layers and endodermis, and the fruiting bodies remained inside volva as liquid gelatin layer. Dark green spore layer was formed at the top of cap. The surface eggs in the cultivated veiled lady mushroom was covered with white needle-shaped mycelial projection that was oval in shape. The velum of fruiting body stretched down to the top of volva. The net was regularly shaped, and smelled like fragrance with chestnut flower. The strain KACC 50650 was identified as Dictyophora echinovolvata based on the morphology of eggs and fruiting bodies, and named as Huin-Dol-Gi-Mang-Tae mushroom in Korean.
Studies were conducted to determine the potential of sodium hypochlorite(SHC) on the control of bacterial yellow blotch in cultivated oyster mushroom, Pleurotus ostreatus. SHC at the concentration of 80 ppm was effective on the control of Pseudomonas agarici causing yellow blotch in oyster mushroom except number 916 isolate. In vitro the mycelial growth was slightly inhibited at the concentration higher than 100 ppm of sodium hypochlorite, but retardation of the mycelial growth was soon recovered. Spray of SHC solution at the concentration of 40-50 ppm per day significantly reduced the incidence of the yellow blotch without impairing the growth of oyster mushroom in field culture. However, the higher concentration of SHC(67 ppm) induced yellow brown or dark gray in color and deformed cap and elongated stripe in morphology of fruiting body. Results indicate that periodical spray of sodium hypochlorite seems to be the recommendable method for protection against bacterial yellow blotch disease in oyster mushroom without reducing food quality.
The task of improving a fungal strain is highly time-consuming due to the requirement of a large number of flasks in order to obtain a library with enough diversity. In addition, fermentations (particularly those for fungal cells) are typically performed in high-volume (100-250 ml) shake-flasks. In this study, for large and rapid screening of itaconic acid (IA) high-yielding mutants of Aspergillus terreus, a miniaturized culture method was developed using 12-well and 24-well microtiter plates (MTPs, working volume = 1-2 ml). These miniaturized MTP fermentations were successful, only when highly filamentous forms were induced in the growth cultures. Under these conditions, loose-pelleted morphologies of optimum sizes (less than 0.5 mm in diameter) were casually induced in the MTP production cultures, which turned out to be the prerequisite for the active IA biosynthesis by the mutated strains in the miniaturized fermentations. Another crucial factor for successful MTP fermentation was to supply an optimal amount of dissolved oxygen into the fermentation broth through increasing the agitation speed (240 rpm) and reducing the working volume (1 ml) of each 24-well microtiter plate. Notably, almost identical fermentation physiologies resulted in the 250 ml shake-flasks, as well as in the 12-well and 24-well MTP cultures conducted under the respective optimum conditions, as expressed in terms of the distribution of IA productivity of each mutant. These results reveal that MTP cultures could be considered as viable alternatives for the labor-intensive shake-flask fermentations even for filamentous fungal cells, leading to the rapid development of IA high-yield mutant strains.
Fifty-three actinomycetes antagonistic to Phytophthora capsici and Magnaporthe grisea were isolated from rhizosphere soils in six pepper-growing areas and ashore soils. Thirty-two antagonistic actinomycetes, showing inhibition zone larger than 5 mm, were classified into 20 groups according to their colony morphology and color. The antagonistic activity against P. capsici greatly varied, which showed inhibition zone sizes in the ranges from 5.7 to 17.5 mm on V-8 juice agar and from 2.5 to 17 mm on tryptic soy agar. The antagonistic activity of some actinomycetes tested was remarkably different between the two test media. The antagonists showed a relatively broad antifungal spectrum, but their antibacterial activity was negligible, except for Pseudomonas solanacearum. Butanol extracts of culture filtrates from antagonistic actinomycetes inhibited mycelial growth of P. capsici and M. grisea, thereby confirming strongly antibiotic production in culture. Culture filtrates of some antagonistic actinomycetes completely inhibited Phytophthora blight in pepper plants.
El Enshasy, H.;Fattah, Y. Abdel;Atta, A.;Anwar, M.;Omar, H.;Magd, S. Abou El;Zahra, R. Abou
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.18
no.1
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pp.128-134
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2008
The kinetics of cell growth and Cyclosporin A (Cyc A) production by Tolypocladium inflatum were studied in shake flasks and bioreactors under controlled and uncontrolled pH conditions. In the case of the shake flask, the production time was extended to 226 h and the maximal antibiotic concentration was 76 mg/l. When scaling up the cultivation process to a bioreactor level, the production time was reduced to only 70h with a significant increase in both the cell growth and the antibiotic production. The maximal dry cell weights in the case of the controlled pH and uncontrolled pH cultures in the bioreactor were 22.4g/l and 14.2g/l, respectively. The corresponding maximal dry cell weight values did not exceed 7.25g/l with the shake flask cultures. The maximal values for Cyc A production were 144.72 and 131.4 mg/l for the controlled and uncontrolled pH cultures, respectively. It is also worth noting that a significant reduction was observed in both the dry cell mass and the antibiotic concentration after the Cyc A production phase, whereas the highest rate of antibiotic degradation was observed in the stirred tank bioreactor with an uncontrolled pH. Morphological characterization of the micromorphological cell growth (mycelial/pellet forms) was also performed during cultivation in the bioreactor.
The chromosomal sprD gene encoding Streptomyces griseus protease D (SGPD), a chymotrypsin-like protease, was disrupted in Streptomyces griseus by insertion of the neomysin-resistance gene. The production of chymotrypsin activity of sprD disruptant was not completely abolished, but delayed by 24 h, compared with that of wild-type strain. The aerial mycelial formation of sprD disruptant was retarded, and specifically the formation of spores was not observed in the central region of colonies. However, normal morphological development into spores was observed in the marginal region of colonies. In addition, the production of yellow pigment that might be dependent on A-factor was also decreased in the sprD disruptant, compared with that of the wild-type strain. Introduction of the sprD gene, which was placed on a high copy-numbered plasmid into S. griseus ${\Delta}sprD$, partially restored the ability of morphological development, and a significant level of sporulation was observed. When the overexpression vector for sprD, pWHM3-D, was introduced in S. griseus, there was no significant change in the chymotrypsin activity or colonial morphology, in contrast to Streptomyces lividans, indicating the presence of a tight regulation system for the overexpression of the sprD gene in S. griseus.
Park, Young-Do;Yoo, Young-Bok;Shin, Pyung-Gyun;You, Chang-Hyun;Cha, Dong-Yeul;Park, Yong-Hwan;Lee, Jae-Sung
The Korean Journal of Mycology
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v.16
no.2
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pp.79-86
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1988
Interspecific fusion products were obtained from fusion of Ganoderma applanatum and Ganoderma luridum. Frequency of fusion was 0.77-1.38%. Fusion products were selected by the comparision of morphology and color of colony. Fusion Products had chracteristics of two parental strains and generally grew faster than the parents. Some fusants were segregated on GCM. Fusion products were confirmed by mycelial morphology and electrophoretics pattern of esterase isozyme from mycelium. Most of fusion products were lack in clamp connection but those fusion products, that were segregated produced mycelium with and without clamp connection. Some of the fusion products produced fruit body on sawdust medium.
Each of 48 monoconidial isolates of Colletotrichum gloeosporioides Penz. obtained from diseased fruits of pepper was classified into strain G or strain R based upon pathogenicity to green and red fruits, morphology of conidia, and cultural characteristics in potato dextrose agar. The strain G was designated for isolates to cause anthracnose symptoms both on green and red fruits. All isolates of the strain G produced conidia abundantly. but produced no perithecia and setae in PDA. Conidia of all isolates in the strain G were attenuated or round at one end. The optimum temperature for mycelial growth of strain G was $26-28^{\circ}C$. The mycelia of strain G in PDA appeared to be whitish when young, and turned to be dark in old culture. Symptoms on pepper fruits caused by the strain G were somewhat sunken to be circular to elliptical lesions. Yellowish conidial masse were observed at the center of lesions, and the lesions turned to irregular shape and to reddish brown color in the later stage of disease development. No setae were visible on the acervuli. The strain R was designated for isolates to cause anthracnose symptoms only on red fruits of pepper. All isolates of the strain R produce conidia, and perithecia of Glomerella cingulata (Stonem.) Spauld. & v. Sch. in PDA. Some isolates of the strain R produced setae in culture under fluorescent light. Conidia of all isolates in the strain R were round and blunt at the ends. The optimum temperature for mycelial growth of strain R was the same as that of strain G. The mycelial growth of strain R was faster than that of strain G in PDA. The mycelia of strain R in PDA appeared to be gray to dark. Symptoms on pepper fruits caused by the strain R were circular to irregular black ring-spots Short setae or no setae were visible on the acervuli.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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