This study was attempted to investigate the production of L-tyrosine by Brevibacterium flavum ATCC 14067. To select the strain which produce more L-tyrosine, mutants were induced by N-methyl-N'-nitro-nitrosoguanidine (NTG) treatment and phenylalanine auxotrophic mutants were induced by NTG and penicillin treatments. PFP resistant mutant was isolated from a phenylalanine auxotroph by retreatment with NTG and screened for increase of L-tyrosine production. PFP-326 mutant resistant to PPP (100ug/ml) was derived from phenylalanine auxotroph by mutagenesis with NTG and PFP-106 mutant resistant to PFP (1201g/ml) was derived from PFP-326 by mutagenesis with NTG. The composition of media for L-tyrosine production in strain PFP-106 was studied. PFP-106 mutant strain produced 50mg 11 of L-tyrosine while the parent strain produced 0.56mg 11 of L-tyrosine. The optimum composition of medium for L-tyrosine by strain PFP-106 was 10cA sucrose as carbon source, 3% ammonium sulfate as nitrogen source. The optimum cultural condition for producing L-tyrosine by strain PFP-106 was L-phenylalanine at a concentration of 1000g/mg.
Various ${\Delta}opp$ mutants of Vibrio fluvialis were constructed by allelic exchange method. The mutants occurred in target genes were confirmed by PCR and Southern hybridization analyses. After the exact mutants were identified, cell growth and biofilm production were examined using the respective mutants. The growth of wild strain was more rapid than mutants within 4hr incubation. Thereafter, the growth of wild strain and mutants reached to same level. When the productivities of wild strain and mutants were examined, ${\Delta}oppA$ mutant showed the highest productivity. Though ${\Delta}oppC,D$ and F mutants produced the lower production than that of ${\Delta}oppA$ mutant, the productivities of those mutants were much higher than that of wild strain.
Pleurotus ostreatus 'Miso' is a mutant strain showing white color in pileus from the known parent strain 'Wonhyeong 1'. Shape and several other characters also vary with culture conditions. Mating experiments were performed to understand interstrain mating relationship using monokaryons of the parent and the mutant strains. All monokaryons were grown from single spores isolated from freshly collected fruit bodies. Pairings were performed in 90 mm petri dishes on PDA. They were allowed to grow at 25 until two fronts of the advancing mycelia met and developed a conspicuous contact zone. The contact zone and the outer edges of paired colonies on each plate were examined for clamp connections. The parent and the mutant resulted in tetrapolar incompatibility in intrastrain crosses. In interstrain crosses, each monokaryotic tester strain of the parent strain was out-crossed to monokaryotic tester strains of the mutant. As a result of these crosses it was found that both strains share the same A and B incompatibility factors yielding 25% compatibility.
The objective of this study was to investigate the effect of high content of light-absorbing pigments on overall photosynthetic efficiency in high density microalgal cultures. The light harvesting complex II (LHC II) regulating gene of Rhodobacter sphaeroides, photosynthetic purple bacterium, was removed to construct a mutant strain that had less pigment content. The mutant and wild type strains were cultured under various light intensity by adjusting the distance from the light source. The productivity of the mutant strain was higher at high light intensity (over 118 ${\mu}E/m^2/s$) compared with one of the wild type , and was lower at low light intensity (34 ${\mu}E/m^2/s$). Especially, the concentration of LHC II mutant strain was 56% higher at 118 ${\mu}E/m^2/s$. The reduction of per cell pigment contents in the mutant strain lessened the degree of the mutual shading and thus enhanced the overall photosynthetic efficiency.
Kim, Moo-Woong;Ko, Su-Min;Kim, Jeong-Yoon;Sohn, Jung-Hoon;Park, Eui-Sung;Kang, Hyun-Ah;Rhee, Sang-Ki
Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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v.5
no.4
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pp.234-241
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2000
The Saccharomyces cerevisiae PMR1 gene encodes a Ca2+-ATPase localized in the Golgi. We have investigated the effects of PMR1 disruption in S. cerevisiae on the glycosylation and secretion of three heterologous glycoproteins, human ${\alpha}$1-antitrypsin (${\alpha}$1-AT), human antithrombin III (ATHIII), and Aspergillus niger glucose oxidase (GOD). The pmr1 null mutant strain secreted larger amounts of ATHIII and GOD proteins per a unit cell mass than the wild type strain. Despite a lower growth rate of the pmr1 mutant, two-fold higher level of human ATHIII was detected in the culture supernatant from the pmr1 mutant compared to that of the wild-type strain. The pmr1 mutant strain secreted ${\alpha}$1-AT and the GOD proteins mostly as core-glycosylated forms, in contrast to the hyperglycosylated proteins secreted in the wild-type strain. Furthermore, the core-glycosylated forms secreted in the pmr1 mutant migrated slightly faster on SDS-PAGE than those secreted in the mnn9 deletion mutant and the wild type strains. Analysis of the recombinant GOD with anti-${\alpha}$1,3-mannose antibody revealed that GOD secreted in the pmr1 mutant did not have terminal ${\alpha}$1,3-linked mannose unlike those secreted in the mnn9 mutant and the wild type strains. The present results indicate that the pmr1 mutant, with the super-secretion phenotype, is useful as a host system to produce recombinant glycoproteins lacking high-mannose outer chains.
Kim, Seong-Geon;An, Hyeon-Jin;Kim, Jae-Yeong;No, Yong-Taek
한국생물공학회:학술대회논문집
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2000.04a
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pp.299-302
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2000
Actinoplanes teichomyceticus ATCC 31121 was mutated with UV to obtain a superior mutant strain with increasing level of teicoplanin production. In this investigation lethal curve was obtained and the optimal condition to induce mutagenesis was determined and to isolate the desirable mutant strain. It was also confirmed that teicoplanin activities by agar diffusion method to be compared to the mother strain. One mutant strain, T991014-1 that had the highest teicoplanin productivity was finally selected for further investigation including fermentation pattern. The mutant was characterized by the various tests such as amylase activity, protease activity, antibiotic resistance, autotoxicity, and productivity.
Kim, Hye-Eun;Son, Chang-Jin;Jeong, Seon-Yong;Kim, Seong-Jun
한국생물공학회:학술대회논문집
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2001.11a
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pp.723-726
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2001
This study was performed to improve the yield of bacterial cellulose(BC) by UV and NTG mutagenesis of strain KJ-1 which produced largely BC. some mutants showed high BC productivity with twice elevation compared to that the wild strain KJ-1. A difference was found in production and bioconversion phase of synthesized organic acid, such as gluconic acid, 2-keto gluconic acid, and 5-keto gluconic acid between mutants and strain KJ-1 in the static culture. The organic acid produced in secondary metabolism phase, were more rapidly consumed in the culture with the mutants than that the parent strain after glucose in the broth was conversed to a limiting substrate. Therefore, we suggested the reason for increasing of BC production that the mutant strain consumed more efficiently synthesized acids as substrates than that of the parent strain.
L-Proline-producing mutant strains were developed by exposing L-glutamic acid-producing bacteria to N-metyl-N-nitro-nitrosoguanidine and UV irradiation. A L-histidine auxotroph of Corynebacterium acetoacidophilum RYU3161(KCTC 0616BP), which was resistant to sulfaguanidine and proline analogs (DHP, AZC, TAC), was isolated. The activity of the mutant strain's $\gamma$-glutamyl kinase was 45% higher than that of the parent strain. The optimum level of L-histidine for production of L-proline was 0.16 g/l. In a 5-1 jar fermenter, the mutant strain produced L-proline at a high concentration (35 g/l) level within 48 h of cultivation.
Teicoplanin is a kind of glycopeptide antibiotics produced by Actinoplanes teichomyceticus, and used in the clinical antibiotic such as vancomycin against methicillin-resistant Stabphylococcus aureus (MRSA). Actino planes teichomyceticus ATCC 31121 was mutated with UV to obtain a superior mutant strain with increased level of teicoplanin production. In this investigation, lethal curve was obtained and the optimal condition to induce mutagenesis was determined to isolate the desirable mutant strain. It was also confirmed that teicoplanin activities by agar diffusion method was compared with the parent strain. One mutant strain, T991014-1 with the highest productivity, was finally selected, and was characterized through the various tests such as amylase activity, protease activity, halotolerance, antibiotic resistance, autotoxicity, and productivity. Ad fermentation characteristics of the mutant strain were also studied.
In Burkholderia pseudomallei, the pathogen that causes melioidosis, the gene cluster encoding the capsular polysaccharide, is located on chromosome 1. Among the 19 capsular genes in this cluster, wzm has not been thoroughly studied. To study the function of wzm, we generated a deletion mutant and compared it with the wild-type strain. The mutant produced less biofilm in minimal media and was more sensitive to desiccation and oxidative stress compared with the wild-type strain, indicating that wzm is involved in biofilm formation and membrane integrity. Scanning electron microscopy showed that the bacterial cells of the mutant strain have more defined surfaces with indentations, whereas cells of the wild-type strain do not.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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