Syed Sayeed Ahmad;Hee Jin Chun;Khurshid Ahmad;Sibhghatulla Shaikh;Jeong Ho Lim;Shahid Ali;Sung Soo Han;Sun Jin Hur;Jung Hoon Sohn;Eun Ju Lee;Inho Choi
Journal of Animal Science and Technology
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v.65
no.1
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pp.16-31
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2023
Cultured meat is a potential sustainable food generated by the in vitro myogenesis of muscle satellite (stem) cells (MSCs). The self-renewal and differentiation properties of MSCs are of primary interest for cultured meat production. MSC proliferation and differentiation are influenced by a variety of growth factors such as insulin-like growth factors (IGF-1 and IGF-2), transforming growth factor beta (TGF-β), fibroblast growth factors (FGF-2 and FGF-21), platelet-derived growth factor (PDGF) and hepatocyte growth factor (HGF) and by hormones like insulin, testosterone, glucocorticoids, and thyroid hormones. In this review, we investigated the roles of growth factors and hormones during cultured meat production because these factors provide signals for MSC growth and structural stability. The aim of this article is to provide the important idea about different growth factors such as FGF (enhance the cell proliferation and differentiation), IGF-1 (increase the number of myoblasts), PDGF (myoblast proliferation), TGF-β1 (muscle repair) and hormones such as insulin (cell survival and growth), testosterone (muscle fiber size), dexamethasone (myoblast proliferation and differentiation), and thyroid hormones (amount and diameter of muscle fibers and determine the usual pattern of fiber distributions) as media components during myogenesis for cultured meat production.
This study was conducted to determine the difference between satellite cells (porcine) and myoblasts (C2C12) in their differentiation under the influence of 2, 4-thiazolidindion. C2C12 myoblast cells and porcine satellite cells (isolated from 10 d old $Landrace{\times}Duroc$ piglets) were grown to absolute confluency. Post confluent cells (day 0) were further exposed to adipogenic induction medium along with 2, 4-thiazolidindion ($8{\mu}M$) for 2 d. Thereafter, cells were exposed to 2, 4-thiazolidindion alone every 2 d till day 10 and analysed. The control was cultured in differentiation medium without any treatment. Increased (p<0.05) expression of transcriptional factors i.e. C/EBP-${\alpha}$ and PPAR-${\gamma}$ and transition of cells to adipocyte morphology was noticed from 2 d and 4 d onwards in satellite cells (Porcine) and myoblasts (C2C12) respectively. Myogenesis was observed to be suppressed completely in case of satellite cells compared to myoblasts in response to 2, 4-thiazolidindion. Pax-7 (transcriptional factor) appeared as a sole entity to satellite cells only, as it was not identified in case of myoblasts. Although both the cells were converting to adipoblasts, the degree of their conversion was different in response to 2, 4-thiazolidindion. Therefore, the hypothesis that satellite cells contribute various domains to the growing myoblasts appeared obscured and found to be dependent on the proliferative energy/or degree of fusion. However, it revealed satellite cells as currency to myoblasts/muscle.
We hypothesized that the unsaturated fatty acid palmitoleic acid (POA) could promote the expression of adipogenic/lipogenic genes in bovine skeletal muscle satellite cells (BSCs). The BSCs were cultured in a growth medium containing 10% fetal bovine serum. When the cells reached 80%-90% confluence, we used the differentiation medium with 5% horse serum for differentiation for 96 h. The differentiation medium contained 50 µM, 100 µM and 200 µM POA. Control BSC were cultured only in differentiation media. Compared with the control BSC, the POA BSC significantly up-regulated the expression of paired box 3 (Pax3) and paired box 7 (Pax7) and down-regulated myogenin gene expression (p < 0.01), which indicates a depression in muscle fiber development. However, all POA treatments up-regulated the expression of the adipocyte transcription factors peroxisome proliferator-activated receptor γ (PPARγ), CCAAT/enhancer-binding protein alpha and beta (C/EBP α and C/EBP β), and other genes (p < 0.01) and increased the expression of PAT-family proteins and the concentration of adiponectin in the media. These results indicate that POA can convert part of BSCs into adipocytes.
Insects are a valuable natural source that can produce a variety of bioactive compounds due to their increasing species diversity. CopA3 is an antimicrobial peptide derived from Copris tripartitus (i.e., the dung beetle). It is known to increase the proliferation of colonic epithelial and neuronal stem cells by regulating cell cycle. This research hypothesized that CopA3 can promote the proliferation of porcine muscle satellite cells (MSCs). The effects of CopA3 on porcine MSCs, which are important for muscle growth and regeneration, remain unclear. Here, we investigated the effects of CopA3 on porcine MSCs. According to viability results, we designed four groups: control (without CopA3) and three treatment groups (treated with 5,10, and 25 ㎍/mL of CopA3). At a CopA3 concentration of 5 ㎍/mL and 10 ㎍/mL, the proliferation of MSCs increased more than that observed in the control group. Furthermore, compared to that in the control, CopA3 treatment increased the S phase but decreased the G0/G1 phase ratio. Additionally, early and late apoptotic cells were found to be decreased in the 5 ㎍/mL group. The expressions of the myogenesis-related transcription factor PAX7 and MYOD proteins were significantly upregulated in the 5 ㎍/mL and 10 ㎍/mL groups, whereas the MYOG protein remained undetected in all group. This study suggested that CopA3 promotes muscle cell proliferation by regulating the cell cycle of MSCs and can regulate the activity of MSCs by increasing the expressions of PAX7 and MYOD.
Purpose : The purpose of this article was to review the literature on contractile properties of skeletal muscle with reference to its molecular and functional diversity. Method : This review outlines scientific findings regarding different contractile properties in skeletal muscle fibers, and discusses their involvement in functional diversity. Result & Conclusions: Muscle fibers possess distinct mechanical and energetic properties. Myosis, one of the primary contractile muscle proteins, displays structural, functional variability and plays the role of the molecular motor of muscle contraction. Muscle satellite cells are normally mitotically quiescent, but initiate proliferation and give rise to daughter myogenic precursor cells as required for the postnatal growth and regeneration of adult muscle. Passive extensibility is an important component of total muscle function because it allows for the maximal length of skeletal muscles. Proprioceptive neuromuscular facilitation(PNF) stretching can help to restore or improve flexibility and coordination, thereby improving overall muscle function.
This study was peformed to investigate the effects on skeletal muscle recovery with aqua-exercise; swimming to take the muscle endurance for 20 days on two group of white rats which were the low extremity atrophy group(control groups) by fixed for two weeks and aqua-exercise group(experimental groups) after it. The effects was observed with light and electron microcope to measure the morphological changes of muscle fibers. The results obtained were as follow. 1. Light microscope: In the case of control groups, quadriceps fibers had been irregular alignment, decreased muscle width and the irregular alignment nuclear appeared, as it is degenerative muscle fibers. In the case of experimental groups, the fibers had been regular alignment cells and fibers. The nucleus of muscle had been normal characterized by oval shape and fiber sarcomere clearly classified. 2. Electron microscope: In the case of control groups, there were the quadriceps which was Z-line streaming phenomenon induced at the sarcomere and cells nuclear separated from basal membrane. It was not only observed the sarcomere alignment irregularly and mitochondria damaged, but also vacuoles found. In the case of experimental groups, A band, I band, H band had been clearly appeared, classified at the myofibrils of quadriceps, and electronic dense M-line found in sarcomere. There were observed satellite cells and basal laminas that usually to be appeared at the time of mitochondrial development, skeletal muscle fiber regeneration or development. This results suggest that the aqua-exercise assisted to inhibit the degenerative morphological changes of skeletal muscle cells and help to recover from abnormal states. Especially, it is considered to effect on a normal structural formation.
Nguyen Thu Uyen;Dao Van Cuong;Pham Dieu Thuy;Luu Hong Son;Nguyen Thi Ngan;Nguyen Hung Quang;Nguyen Duc Tuan;In-ho Hwang
Food Science of Animal Resources
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v.43
no.4
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pp.563-579
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2023
Myogenesis and adipogenesis are the important processes determining the muscle growth and fat accumulation livestock, which ultimately affecting their meat quality. Hanwoo is a popular breed and its meat has been exported to other countries. The objective of this study was to compare the myogenesis and adipogenesis properties in satellite cells, and meat quality between Hanwoo and Vietnamese yellow cattle (VYC). Same 28-months old Hanwoo (body weight: 728±45 kg) and VYC (body weight: 285±36 kg) steers (n=10 per breed) were used. Immediately after slaughter, tissue samples were collected from longissimus lumborum (LL) muscles for satellite cells isolation and assays. After 24 h post-mortem, LL muscles from left carcass sides were collected for meat quality analysis. Under the same in vitro culture condition, the proliferation rate was higher in Hanwoo compared to VYC (p<0.05). Fusion index was almost 3 times greater in Hanwoo (42.17%), compared with VYC (14.93%; p<0.05). The expressions of myogenesis (myogenic factor 5, myogenic differentiation 1, myogenin, and myogenic factor 6)- and adipogenesis (peroxisome proliferator-activated receptor gamma)-regulating genes, and triglyceride content were higher in Hanwoo, compared with VYC (p<0.05). Hanwoo beef had a higher intramuscular fat and total monounsaturated fatty acids contents than VYC beef (p<0.05). Whilst, VYC meat had a higher CIE a* and total polyunsaturated fatty acids content (p<0.05). Overall, there was a significant difference in the in vitro culture characteristics and genes expression of satellite cells, and meat quality between the Hanwoo and VYC.
Sarcopenia is an age-related, progressive skeletal muscle disorder involving the loss of muscle mass and strength. Previous studies have shown that γ-aminobutyric acid (GABA) from fermented oysters aids in regulatory T cells (Tregs) cell expansion and function by enhancing autophagy, and concomitantly mediate muscle regeneration by modulating muscle inflammation and satellite cell function. The fermentation process of oysters not only increases the GABA content but also enhances the content of branched amino acids and free amino acids that aid the level of protein absorption and muscle strength, mass, and repair. In this study, the effect of GABA-enriched fermented sarco oyster extract (FSO) on reduced muscle mass and functions via Treg modulation and enhanced autophagy in aged mice was investigated. Results showed that FSO enhanced the expression of autophagy markers (autophagy-related gene 5 [ATG5] and GABA receptor-associated protein [GABARAP]), forkhead box protein 3 (FoxP3) expression, and levels of anti-inflammatory cytokines (interleukin [IL]-10 and transforming growth factor [TGF]-β) secreted by Tregs while reducing pro-inflammatory cytokine levels (IL-17A and interferon [IFN]-γ). Furthermore, FSO increased the expression of IL-33 and its receptor IL-1 receptor-like 1 (ST2); well-known signaling pathways that increase amphiregulin (Areg) secretion and expression of myogenesis markers (myogenic factor 5, myoblast determination protein 1, and myogenin). Muscle mass and function were also enhanced via FSO. Overall, the current study suggests that FSO increased autophagy, which enhanced Treg accumulation and function, decreased muscle inflammation, and increased satellite cell function for muscle regeneration and therefore could decrease the loss of muscle mass and function with aging.
The aim of this study was to analyze the proteome of proliferating bovine satellite cells from longissimus dorsi, deep pectoral and semitendinosus muscle depots which had been subjected to hormonal deprivation or addition in culture. For hormone deprivation or addition studies, the cells were either grown in 10% charcoal-dextran stripped fetal bovine serum (CD-FBS) or in 10% FBS supplemented medium. Further to analyze the effect of insulin like growth factor (IGF-1) and testosterone (TS), the cells were grown in 10% CD-FBS containing IGF-1 (10 ng/ml) or TS (10 nM). Results have shown that hormone deprivation had a negative impact on proliferation of the cells from each of the muscle depots. In case of IGF-1 and TS addition, the proliferation levels were low compared with that of the cells grown in 10% FBS. Hence, to gain the insights of the proteins that are involved in such divergent levels of proliferation, the proteome of such satellite cells proliferating under the above mentioned conditions were analyzed using 2D-DIGE and MALDI-ToF/ToF. Thirteen proteins during hormone deprivation and nine proteins from hormone addition were found to be differentially expressed in all the cultures of the cells from the three depots. Moreover, the results highlighted in this study offer a role for each differentially expressed protein with respect to its effect on positive or negative regulation of cell proliferation.
Objective: It is commonly accepted that adiponectin binds to its two receptors to regulate fatty acid metabolism in adipocytes. To better understand their functions in the regulation of intramuscular adipogenesis in goats, we cloned the three genes (adiponectin [AdipoQ], adiponectin receptor 1 [AdipoR1], and AdipoR2) encoding these proteins and detected their mRNA distribution in different tissues. We also determined the role of AdipoQ in the adipogenic differentiation of goat skeletal muscle satellite cells (SMSCs). Methods: SMSCs were isolated using 1 mg/mL Pronase E from the longissimus dorsi muscles of 3-day-old female Nanjiang brown goats. Adipogenic differentiation was induced in satellite cells by transferring the cells to Dulbecco's modified Eagle's medium supplemented with an isobutylmethylxanthine, dexamethasone and insulin cocktail. The pEGFP-N1-AD plasmid was transfected into SMSCs using Lipofectamine 2000. Expression of adiponectin in tissues and SMSCs was detected by quantitative polymerase chain reaction and immunocytochemical staining. Results: The three genes were predominantly expressed in adipose and skeletal muscle tissues. According to fluorescence and immunocytochemical analyses, adiponectin protein expression was only observed in the cytoplasm, suggesting that adiponectin is localized to the cytoplasm of goat SMSCs. In SMSCs overexpressing the AdipoQ gene, adiponectin promoted SMSC differentiation into adipocytes and significantly (p<0.05) up-regulated expression of AdipoR2, acetyl-CoA carboxylase, fatty-acid synthase, and sterol regulatory element-binding protein-1, though expression of CCAAT/enhancer-binding $protein-{\alpha}$, peroxisome proliferator-activated receptor ${\gamma}$, and AdipoR1 did not change significantly. Conclusion: Adiponectin induced SMSC differentiation into adipocytes, indicating that adiponectin may promote intramuscular adipogenesis in goat SMSC.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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