For the plant regeneration of soybean (Glycine me L. Merr.), the shoot formation rate, optimal medium and tissue conditions were examined using Korean soybean cultivars. Among the parts of seedling, a node that includes one cotyledon showed the highest shoot formation rate among other tissues. Half-strength B5 medium was more efficient than full strength medium. Formation rates of pair shoots (1 to 2 shooting) were higher in the when benzyl adenine was supplemented. The formation rates of multiple shoots, that is, 4 to 5 in shooting, were high when thidiazuron was supplemented. Multiple shoot was de novo formed in cutting side of cotyledonary node. The effective concentration of thidiazuron for shoot induction treatment was 2 mg/L. Among the 27 cultivars, multiple shoot formation rates were high in the 11 cultivars including 'Heugcheongkong, and pair shoot formation rates were high in the 16 cultivars including 'Malikong'.
Apical meristems of Wasabia japonica were cultured on Murashige and Skoog's medium supplemented with cytokinins alone or together with 1.0 mg/L IAA. Shoot initials could be induced from leaf primordia on apical meristems. Calli and roots were formed on the medium containing cytokinins and 1.0 mg/L IAA in combination after 30 days of culture, but there were no callus proliferation. Shoot organogenesis began after 60 days of culture and these small shoots elongated when transferred to a medium containing 1.0 mg/L BA or kinetin. Shoots were formed directly without callus induction from apical meristems all the explants on the medium containing cytokinins variously, and most of the shoots proliferated multiple shoots which could be divided to obtain plantlets. Shoot multiplication rate in response to cytokinins was best on the medium containing 1.0 mg/L BA or 2.0 mg/L zeatin. Divided plantlets rooted well on MS medium containing 0.01 mg/L IBA after 15~30 days of subculture and the rooted plantlets developed into whole plants with multiple shoots. After rooting, the regenerated plants were washed and transferred to the pots containing sterilized soil.
These studies were conducted to investigate effects of phytohormone and activated carbon on the growth and rooting of teratoma shoots induced from Nicotiana tabacum cv. NC2326 transformed by Aerobacterium tumefaciens C58. GA was effective for shoot elongation and reduction of multiple shoots from teratoma shoot, however, leaves of teratoma shoot cultured on the medium with GA were pointed. ABA was also effective in promoting shoot elongation, but was not for reduction of multiple shoots. Teratoma shoot cultured on the medium with 1 n activated carbon promoted shoot elongation and inhibited the number of shoots differentiated, but was grown as abnormal shoot. Addition of 1% activated carbon and 0.5mg/l BA to culture media was effective for shoot elongation and reduction of multiple shoot and for formation of round leaves as normal leaves. Though these shoots were inoculated on the rooting medium, they could not from roots but formed multiple shoots. Boric acid, myo-inositol and sucrose were also ineffective on the rooting of teratoma shoots.
Shoot induction system was developed in the recalcitrant plant species, Brassica rapa ssp. rapifera by using optimum selection of profit organ, phytohormone combination, seedling age and kind of culture container. Out of in vitro cultured leaf segment, petiole, hypocotyl, and cotyledon with petiole, only cotyledon with petiole derived from 4 day-old seedlings induced multiple shoot. The optimum combination of auxin and cytokinin for the multiple shoot induction was MS medium containing 5mg/L BA and 0.5mg/L NAA. The major factors for multiple shoot propagation were part of plant organ, age of seedling, and ratio of auxin and cytokinin. In addition, shoot regeneration was promoted in the 100ml Erlenmeyer flask compared with the $90mm{\times}20mm$ Petri-dish. The induced shoots formed roots easy on MS medium containing 0.1mg/L IBA and the whole plants were successfully cultivated in soil.
This study was carried out to investigate the effect of thidiazuron(TDZ) on callus and shoot primordia formation, to determine the most optimum multiple shoot induction medium, and to obtain the plantlets on solid medium via shoot organogenesis. TDZ 0.01 mg/L in MS medium was most effective on callus formation, and BA 0.1 mg/L was most effective on shoot growth, while TDZ 0.01 mg/L was most effective on callus formation. TDZ 0.001 mg/L was most effective in shoot primordia formation. Shoot tips were cultured with TDZ 0.01 mg/L for 8 weeks and induced callus was transferred to regeneration medium containing TDZ 0.001 mg/L. After 4 weeks induced shoot primordia were resubcultured at growth regulator-free medium for 4 weeks. The induced multiple shoots rooted more efficiently at NAA 1.0, 5.0 mg/L, or IBA 5.0 mg/L.
In sweet potato cultivars 'Mokpo #29' and 'Sanchunza', shoots from extplants were formed 100% on the MS medium with 0.1 ㎎/L NAA and 2.0 ㎎/L BA after 30 days of culture and roots produced from the base of stem at frequencies of 66.7% ('Mokpo #29') and 69.2% ('Sanchunza'), respectively, The media with 0.5∼4.0 ㎎/L BA were produced the greatest frequency of multiple shoot and the most of shoots developed rapidly into normal plantlets with rooting within 60 days of culture. Whereas the cultivar 'Keumsi' failed to produce normal shoot multiplication on the medium with cytokinins alone because of callusing of adventitious shoots. When single shoots with 1 to 2 nodes were excised from the multiple shoot or shoots covered with callus devoid of root and transferred to MS medium with 4.0 ㎎/L BA or kinetin. Host divided shoots showed the callus induction at the stem base and it was enable to obtain regenerated plantlets with shoot and root normally.
In vitro shoot regeneration from cotyledon and hypocotyl explants derived from germinating mature Impatiens seeds. The induction of organogenetic tissue was also influenced by the cotyledon and hypocotyl. Multiple shoot induction was higher in hypocotyl than in the cotyledon explant with Thidiazuron and a NAA medium.
The effects of explant sources, plant growth regulators on callus induction and plantlet differentiation from leaf blade, petiole, and meristem tissue of Pelalgonium citrosa were investigated under illumination or in dark condition Leaf blade explants cultured on Murashige and Skoog's medium containing 2,4-D and kinetin did not form callus or organ. But those cultured on medium with NAA and BA produced callcus and shoots. Dark condition was more effective than light condition to callus induction and showed that some of shoot were differentiated directly from leaf blade explane. Callus proliferated vigorously on meristem tissue after 7 days of culture, and multiple shoots were obtained Sum callus on medium with 0.5 mg/L NAA and BA. Roots formed readily from about 80% of the shoots cultured on medium with 1.0 mg/L NAA. Regenerated plantlets regenerated had phenotypically normal leaves and roots.
A method for induction of multiple shoots using cotyledonary nodes and shoot tips of Macrotyloma uniflorum (Lam.) Verdc. was described. The experiment was conducted in which shoot induction was noticed on Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with different concentrations and combinations of four cytokinins (KIN, 2iP, Ads, BAP). These multiple shoots were later developed into normal shoots. The highest rate of shoot proliferation came from MS medium added with BAP 1.5 mg/L. The multiple shoot buds were subcultured into MS medium with BAP (0.5-1.5 mg/L) along with Ads (1.0 mg/L) and GA$_3$ (0.5 mg/L), which gave rise to the highest frequency of shoot proliferation and elongation. The shoots were rooted on MS medium supplemented with 1.75 mg/L IBA.
An efficient micropropagation protocol based on multiple shoot induction and callus regeneration has been standardized in Sarcostemma brevistigma, a rare medicinal plant. The nodal cuttings were cultured on MS medium supplemented with BA ($0.5-8{\mu}M$) or Kn ($0.5-8{\mu}M$) alone or in combination with NAA ($0.5-1.5{\mu}M$). Maximum multiple shoot induction was observed on MS medium supplemented with $4{\mu}M$ BA. On this medium, 100% cultures responded with an average number of 11.3 shoots per explant. However, the average shoot length was limited to only 0.9 cm on this medium. The addition of $1{\mu}M$ NAA along with $4{\mu}M$ BA gave rise to an average number of 10.9 shoots with an average shoot length of 1.8 cm. Luxuriantly growing callus was obtained on MS medium supplemented with BA ($5{\mu}M$) and 2,4-D ($2{\mu}M$). The callus was subcultured on MS medium supplemented with BA ($2-15{\mu}M$) or Kn ($2-15{\mu}M$) alone or in combination with NAA ($0.5-2{\mu}M$) for shoot organogenesis. Optimum callus regeneration was obtained on MS medium supplemented with $10{\mu}M$ BA and $1{\mu}M$ NAA. On this medium, 100% cultures responded with an average number of 13.4 shoots per culture. The shoots obtained via multiple shoot induction and organogenesis were rooted on half-strength MS medium supplemented with NAA ($1-7{\mu}M$) or IBA ($1-7{\mu}M$). IBA was better than NAA in terms of both the percentage of cultures that responded and the average number of roots per explant. The rooted shoots were successfully transplanted to soil with 86% success. This standardized protocol will help to conserve this rare medicinal plant.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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