• 제목/요약/키워드: Multi-locus sequence typing

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Penicillium vietnamense sp. nov., the First Novel Marine Fungi Species Described from Vietnam with a Unique Conidiophore Structure and Molecular Phylogeny of Penicillium Section Charlesia

  • Nguyen, Van Duy;Pham, Thu Thuy
    • Mycobiology
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    • 제50권3호
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    • pp.155-165
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    • 2022
  • Penicillium vietnamense sp. nov. was isolated from Nha Trang Bay, Vietnam in June 2017. It is phylogenetically distinct from the sister species of Penicillium section Charlesia series Indica based on multi-locus sequence typing results using internal transcribed spacer, large subunit ribosomal RNA, b-tubulin, calmodulin, and RNA polymerase II second largest subunit regions. It showed strong growth on Czapek yeast autolysate agar at 37 ℃, a strong acid production on Creatine sucrose agar, and produced short stipes, small vesicles, and subglobose to globose conidia delicately roughened with very short ridges. As the first novel marine fungi species described from Vietnam and discovered in a unique environment, the data could be significant for understanding the taxonomy and geographical distribution of marine fungi in tropical coastal systems such as Vietnam.

국내에서 분리된 Fusarium sambucinum 종복합체 균주의 재동정 및 문헌 고찰 (Re-identification of Fusarium sambucinum Species Complex Strains in Korea and Their Literature Review)

  • 최윤희;;최효림;이지수;이다슬;홍승범
    • 식물병연구
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    • 제29권2호
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    • pp.118-129
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    • 2023
  • Fusarium sambucinum 종 복합체는 식물에 심각한 질병을 일으키는 분류군이다. 국내에서는 F. sambucinum 종 복합체가 일으키는 식물병에 대한 많은 연구가 보고되었으나, 한국식물 병명목록에는 2종(F. graminearum, F. sambucinum)이 14개의 기주에 식물병을 일으키는 정보만이 등록되어 있다. F. sambucinum 종복합체의 다양성 및 병원성을 확인하기 위해 농업미생물은행(Korean Agricultural Culture Collection)에 보존된 57 균주의 F. sambucinum 종 복합체를 다중 유전자 염기서열 분석(multi-locus sequence typing)을 바탕으로 7종(F. asiaticum, F. graminearum, F. vorosii, F. meridionale, F. bootii, F. kyushuense, F. armeniacum)으로 재동정하였다. 이전의 보고와 이번 연구의 결과에 따라, F. sambucinum 종 복합체 중 5종(F. asiatum, F. graminearum, F. vorosii, F. armeniacum, F. sambucinum)이 24개의 기주에 병원성을 보였으며, 3종(F. meridionale, F. bootii, F. kyushuense)의 병원성은 명확하지 않았다.

Probe-based qPCR Assay for Rapid Detection of Predominant Candida glabrata Sequence Type in Korea

  • Bae, Jinyoung;Lee, Kyung Eun;Jin, Hyunwoo
    • 대한의생명과학회지
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    • 제25권4호
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    • pp.407-416
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    • 2019
  • Recent years have seen an increase in the incidence of candidiasis caused by non-albicans Candida (NAC) species. In fact, C. glabrata is now second only to C. albicans as the most common cause of invasive candidiasis. Therefore, the rapid genotyping specifically for C. glabrata is required for early diagnosis and treatment of candidiasis. A number of genotyping assays have been developed to differentiate C. glabrata sequence types (STs), but they have several limitations. In the previous study, multi-locus sequence typing (MLST) has performed with a total of 101 C. glabrata clinical isolates to analyze the prevalent C. glabrata STs in Korea. A total of 11 different C. glabrata STs were identified and, among them, ST-138 was the most commonly classified. Thus, a novel probe-based quantitative PCR (qPCR) assay was developed and evaluated for rapid and accurate identification of the predominant C. glabrata ST-138 in Korea. Two primer pairs and hybridization probe sets were designed for the amplification of internal transcribed spacer 1 (ITS1) region and TRP1 gene. Analytical sensitivity of the probe-based qPCR assay was 100 ng to 10 pg and 100 ng to 100 pg (per 1 μL), which target ITS1 region and TRP1 gene, respectively. This assay did not react with any other Candida species and bacteria except C. glabrata. Of the 101 clinical isolates, 99 cases (98%) were concordant with MLST results. This novel probe-based qPCR assay proved to be rapid, sensitive, highly specific, reproducible, and cost-effective than other genotyping assay for C. glabrata ST-138 identification.

Meat ducks as carriers of antimicrobial-resistant Escherichia coli harboring transferable R plasmids

  • Zulqarnain Baqar;Nuananong Sinwat;Rangsiya Prathan;Rungtip Chuanchuen
    • Journal of Veterinary Science
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    • 제25권5호
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    • pp.62.1-62.13
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    • 2024
  • Importance: Antimicrobial resistance (AMR) is a serious public health threat. AMR bacteria and their resistance determinants in food can be transmitted to humans through the food chain and by direct contact and disseminate directly to the environment. Objective: This study examined the AMR characteristics and transferable R plasmids in Escherichia coli isolated from meat ducks raised in an open-house system. Methods: One hundred seventy-seven (n = 177) commensal E. coli were examined for their antimicrobial susceptibilities and horizontal resistance transfer. The plasmids were examined by PCR-based plasmid replicon typing (PBRT) and plasmid multi-locus sequence typing (pMLST). Results: The highest resistance rate was found against ampicillin (AMP, 83.0%) and tetracycline (TET, 81.9%), and most isolates exhibited multidrug resistance (MDR) (86.4%). The R plasmids were conjugally transferred when TET (n = 4), AMP (n = 3), and chloramphenicol (n = 3) were used as a selective pressure. The three isolates transferred resistance genes either in AMP or TET. The blaCTX-M1 gene resided on conjugative plasmids. Five replicon types were identified, of which Inc FrepB was most common in the donors (n = 13, 38.4%) and transconjugants (n = 16, 31.2%). Subtyping F plasmids revealed five distinct replicons combinations, including F47:A-:B- (n = 2), F29:A-:B23 (n = 1), F29:A-:B- (n = 1), F18:A-B:- (n = 1), and F4:A-:B- (n = 1). The chloramphenicol resistance was significantly correlated with the other AMR phenotypes (p < 0.05). Conclusions and Relevance: The meat ducks harbored MDR E. coli and played an important role in the environmental dissemination of AMR bacteria and its determinants. This confirms AMR as a health issue, highlighting the need for routine AMR monitoring and surveillance of meat ducks.

Prevalence and molecular characteristics of carbapenem-resistant Escherichia coli isolated from dogs in South Korea

  • Bo-Youn Moon;Md. Sekendar Ali;Seunghoe Kim;Hee-Seung Kang;Ye-Ji Kang;Jae-Myung Kim;Dong-Chan Moon;Suk-Kyung Lim
    • Journal of Veterinary Science
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    • 제25권5호
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    • pp.67.1-67.8
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    • 2024
  • Importance: Carbapenem-resistant Enterobacteriaceae are emerging as a global public health risk. Therefore, assessing the prevalence of carbapenem-resistant Escherichia coli (CRE) in both humans and animals is important. Objective: We aimed to ascertain the occurrence and characteristics of CRE isolated from companion animals, dogs and cats. Methods: E. coli strains were tested for antimicrobial susceptibility using the broth microdilution technique. Antimicrobial resistance genes were detected by polymerase chain reaction and sequencing analysis. The molecular characteristics of CRE were determined using multi-locus sequence typing, replicon typing, and pulsed-field gel electrophoresis (PFGE). Results: In total, 13 CRE isolates (0.13%) were identified from dogs possessing blaNDM-5 along with β-lactamase genes, mostly blaCMY-2 (92.2%) and blaTEM-1 (53.8%). The commonly observed mutations were S83L and D87N in gyrA, S80I in parC, and S458A in parE. CRE carried non-beta-lactam resistance genes, with the majority being tet(B) (100%), sul (84.6%), and aac(3)-II (53.8%). Nine different PFGE patterns (P1-P9), IncX3-type plasmids (69.2%), and ST410 (84.6%) were predominantly detected. Conclusions and Relevance: This investigation provides significant insight into the prevalence and molecular characteristics of blaNDM-5-carrying E. coli in dogs. The co-existence of blaNDM-5 and other antimicrobial resistance genes in E. coli potentially poses severe health hazards to humans.

한강에서 분리한 장구균의 항생제 내성과 분자생물학적 분석 (Antibiotics Resistance and Molecular Analysis of Enterococcus Isolated from the Han-river in Korea)

  • 권오민;김말남
    • 미생물학회지
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    • 제48권2호
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    • pp.116-124
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    • 2012
  • 2008년 3월, 서울의 상수원으로 이용되는 한강에서 분리된 Enterococcus 76주를 동정하고 이 균주들에 대한 항생제 감수성과 항생제 내성유전자 구조분석, 교차접합, PFGE 및 MLST를 실시하였다. 분리 균주 중 E. casseliflavus는 25주이었으며, E. faecalis 및 E. hirae가 각각 4주 및 1주이었다. 항생제 감수성을 조사한 결과 15주가 vancomycin에 대해 내성을 나타내었으며 E. faecium 11주와 E. casseliflavus 4주가 VRE인 것을 알 수 있었다. VRE를 대상으로 vanA 유전자 검출을 통해 6주의 E. faecium가 vanA를 가지는 VREF임을 밝혔으며, vanA가 포함된 transposon인 Tn1546 구조를 분석한 결과 Km36과 Km37은 Tn1 type, Km20과 Km38은 Tn2 type 그리고 Km 39와 Km40은 Tn3 type으로 나타났다. PFGE 결과 6주의 VREF 중 Km36과 Km37은 동일한 subtype을 나타내었으며, 나머지 4주는 각기 다른 subtype을 나타냈다. VREF 6주를 대상으로 MLST를 실시한 결과 3주는 ST78, 나머지 3주는 각각 ST18, ST192 및 ST230로 나타났다. 이들의 clonal complex는 모두 병원에서 분리되는 CC17로부터 파생된 것으로 파악되었으며 4주는 CC78에, 나머지 2주는 각각 CC18과 CC192에 포함된 것을 확인할 수 있었다.

Colistin resistance and plasmid-mediated mcr genes in Escherichia coli and Salmonella isolated from pigs, pig carcass and pork in Thailand, Lao PDR and Cambodia border provinces

  • Pungpian, Chanika;Lee, Scarlett;Trongjit, Suthathip;Sinwat, Nuananong;Angkititrakul, Sunpetch;Prathan, Rangsiya;Srisanga, Songsak;Chuanchuen, Rungtip
    • Journal of Veterinary Science
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    • 제22권5호
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    • pp.68.1-68.15
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    • 2021
  • Background: Colistin and carbapenem-resistant bacteria have emerged and become a serious public health concern, but their epidemiological data is still limited. Objectives: This study examined colistin and carbapenem resistance in Escherichia coli and Salmonella from pigs, pig carcasses, and pork in Thailand, Lao PDR, and Cambodia border provinces. Methods: The phenotypic and genotypic resistance to colistin and meropenem was determined in E. coli and Salmonella obtained from pigs, pig carcasses, and pork (n = 1,619). A conjugative experiment was performed in all isolates carrying the mcr gene (s) (n = 68). The plasmid replicon type was determined in the isolates carrying a conjugative plasmid with mcr by PCR-based replicon typing (n = 7). The genetic relatedness of mcr-positive Salmonella (n = 11) was investigated by multi-locus sequence typing. Results: Colistin resistance was more common in E. coli (8%) than Salmonella (1%). The highest resistance rate was found in E. coli (17.8%) and Salmonella (1.7%) from Cambodia. Colistin-resistance genes, mcr-1, mcr-3, and mcr-5, were identified, of which mcr-1 and mcr-3 were predominant in E. coli (5.8%) and Salmonella (1.7%), respectively. The mcr-5 gene was observed in E. coli from pork in Cambodia. Two colistin-susceptible pig isolates from Thailand carried both mcr-1 and mcr-3. Seven E. coli and Salmonella isolates contained mcr-1 or mcr-3 associated with the IncF and IncI plasmids. The mcr-positive Salmonella from Thailand and Cambodia were categorized into two clusters with 94%-97% similarity. None of these clusters was meropenem resistant. Conclusions: Colistin-resistant E. coli and Salmonella were distributed in pigs, pig carcasses, and pork in the border areas. Undivided-One Health collaboration is needed to address the issue.

유통 수산물에서 분리한 Vibrio parahaemolyticus의 항생제 내성 및 전장 유전체 분석을 통한 유전적 특성 분석 (Whole-Genome Sequencing-based Antimicrobial Resistance and Genetic Profile Analysis of Vibrio parahaemolyticus Isolated from Seafood in Korea)

  • 송경규;조현우;김연아;장범순;이미루;박건택
    • 한국식품위생안전성학회지
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    • 제39권3호
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    • pp.231-238
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    • 2024
  • 국내에서 V. parahaemolyticus로 인한 식중독 사고가 지속적으로 보고되고 있으며, 최근 국내 수산물 판매량 및 수산물 양식에 사용되는 항생제 판매량은 증가하는 추세이다. 따라서 본 연구는 국내에 유통되는 수산물에서 분리한 V. parahaemolyticus의 분포, 항생제 감수성, 유전적 특성 및 유전학적 통계를 조사하였다. 79건의 유통 수산물로부터 47건(59.5%)에서 V. parahaemolyticus가 분리되었다. 항생제 내성 양상의 경우, 총 47균주의 분리 균주에서는 ampicillin에 2균주(4.3%)가 내성을 보였으며, 이외 균주는 모든 항생제에 대해 감수성을 보였다. 항생제 내성 유전자의 경우, 모든 균주(100%)로부터 blaCAR family gene, tet(35), catC가 확인되었으며, 1균주(2.1%)에서는 fos가 확인되었다. 병원성 유전자 여부의 경우, 모든 분리 균주에서 tdh, trh 유전자는 확인되지 않았으나, T3SS1은 모든 균주(100%), T3SS2는 1균주(2.1%)에서 확인되었다. MLST의 경우, 17균주로부터 15가지의 ST가 확인되었으며, ST 658가 3균주, 이외 14가지 ST는 1균주씩 확인되었다. 확인된 ST는 대부분 중국, 태국 등의 환경 분리주로 확인되었으며, ST 396, ST 3042는 중국 임상 분리주로부터 확인되었다. 이로써, 최근 국내에 수산물과 관련한 식중독, 유통량, 항생제 판매량 등의 추세에 따른 위험성에 V. parahaemolyticus에 대한 지속적인 연구가 필요할 것으로 사료되며, 본 연구는 그에 대한 도움이 될 것이라 사료된다.

충청지역에서 분리된 사람 유래 대장균 및 닭 유래 대장균의 항균제 내성 및 MLST를 이용한 유전형의 분포 조사 (Molecular Characterization of Escherichia coli Isolates from Humans and Chickens in the Chungcheong Area Using MLST Analysis)

  • 김세미;성지연;최승구
    • 대한임상검사과학회지
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    • 제47권2호
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    • pp.71-77
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    • 2015
  • 최근 항균제의 광범위한 사용으로 인한 항균제 내성세균의 출현과 확산이 축산환경에서 빈번하게 일어나고 있고 이렇게 출현한 다제 내성세균은 사람에게 직접 전파될 수 있어 큰 문제가 되고 있다. 본 연구는 2013년 7월부터 2014년 7월까지 충청지역의 임상검체(n=44) 및 양계농장의 닭(n=34)에서 분리된 78주의 대장균을 대상으로 이루어졌다. PCR과 염기서열 분석을 통하여 MLST 분석과 class 1 integron의 유전형을 분석하였다. 항균제 감수성 검사는 디스크 확산법으로 시행하였다. 사람 유래 대장균의 경우 ST131 (n=20)과 ST38 (n=15)이 가장 많았고 닭 유래 대장균은 ST752 (n=7)이 가장 많았으며 ST117, ST189, ST69는 각각 4주였다. 사람에서 유래한 대장균은 총 44주 중 25주가 class 1 integron을 가지고 있었다. 반면 닭에서 유래한 대장균은 총 34주 중 11주가 class 1 integron을 가지고 있었다. 충청지역에 분포되어있는 사람 유래 대장균과 닭 유래 대장균의 유전형 및 항균제 내성 패턴에 차이를 보였다.

접합가능한다제내성녹농균의출현 (Emergence of Conjugative Multidrug-Resistant Pseudomonas aeruginosa)

  • 이미영
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제51권4호
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    • pp.517-525
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    • 2023
  • 다제내성 P. aeruginosa (MRPA)의 출현과 확산은 전 세계적으로 심각한 문제가 되었다. 특히 metallo-β-lactamases (MBLs)의 carbapenem 고도내성 관여 정도는 심각한 수준이며, 특히 P. aeruginosa는 장내세균 속 균종과는 달리 새로운 클론들이 지속적으로 나타나고 기존에 확산되었던 우세 클론을 대체하는 과정이 매우 빠르게 진행되고 있다. 이에 본 연구에서는 2017년 9월부터 2019년 9월까지 부산의 한 종합병원에서 다양한 의료용 시료로부터 분리된 18균주의 P. aeruginosa 균주에 대한 항균제 내성 유전자 분석과 DNA 염기서열 분석을 통한 Integron의 유전자 카세트 분석 및 접합에 의한 Plasmid 전달 분석을 수행하며 이에 대한 역학관계를 조사하고자 하였다. 18균주 모두 XDR 표현형을 보이는 균주였으며, Colistin(100%)을 제외한 대부분의 항생제에 내성을 나타냈으나, aztreonam(22.2%), ceftazidime(16.6%)에 일부 감수성을 보였다. 균주의 66.7%는 다양한 항균제 내성을 나타내는 Class1 integron을 가지고 있었으며, 접합에 의한 Plasmid전달도 성공적으로 이루어졌다(83.3%). 이는 이전의 장내세균에 대한 연구결과보다 25.8% 상향한 결과를 보여 공중보건에 대한 심각한 역학관점의 고찰을 필요로 한다. 특히, IMP-6 ST235 (66.7%)가 주를 이루며, VIM-2 ST357 (16.7), IMP-1 ST446 (16.7)이 확인되었다. 흥미롭게도, 국내에서는 아직까지 보고된 바가 없는 IMP-1 생성 ST446의 확인은 또 다른 MRPA 고위험 클론의 생성과 유행이라는 관점에서 주목할 만하다.