In the present study, the author intended to investigate whether three oriental medical prescriptions named Jeongcheonhwadam-tang(JHT), Haengso-tang(HST), Socheungryong-tang(SCRT) significantly affect mucin release from cultured hamster tracheal surface epithelial (HTSE) cells. The results were as follows: (1) JHT significantly inhibited mucin release from cultured HTSE cells, without significant cytotoxicity : (2) HST significantly inhibited mucin release from cultured HTSE cells, without significant cytotoxicity : (3) SCRT significantly inhibited mucin release from cultured HTSE cells, without significant cytotoxicity : (4) JHT, HST chiefly inhibited the 'mucin' release and did not significantly affect the release of the other releasable glycoproteins with less molecular weight than mucin. These results suggest that the three herbal prescriptions specifically inhibit the release of mucin: (5) JHT significantly inhibited the expression levels of MUC SAC mRNA. This result suggests that JHT affects the synthesis of mucin at gene level in cultured HTSE cells. All agents showed no significant cytotoxicity. In view of these results, further investigation of the effects of JHT and HST are likely to be instrumental in yielding novel agents from oriental medical prescriptions which have inhibitory effects or expectorative effects on airway mucus secretion.
Park, Ji-Sun;Kim, Hyoung-Soo;Seok, Jeong-Ho;Hur, Gang-Min;Park, Jong-Sun;Seo, Un-Kyo;Lee, Choong-Jae
The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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제8권6호
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pp.329-333
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2004
In this study, we investigated whether TNF-alpha, IL-1beta, CTMA (carboxymethyl trimethylammonium) and LPD (Lup-20[29]-ene-3beta,28-diol) affect mucin release from airway goblet cells and compared the activities of these agents with the inhibitory action of PLL and the stimulatory action of ATP on mucin release. Confluent primary hamster tracheal surface epithelial (HTSE) cells were metabolically radiolabeled with $^3H-glucosamine$ for 24 h and chased for 30 min in the presence of varying concentrations of each agent to assess the effects on $^3H-mucin$ release. The results were as follows: TNF-alpha, CTMA and LPD increased mucin release at the highest concentration, but IL-1beta did not. We conclude that CTMA and LPD can stimulate mucin release by directly acting on airway mucin-secreting cells, and suggest that these agents should be further investigated for the possible use as mild expectorants during the treatment of chronic airway diseases.
동물성 mucin은 인체 타액 mucin과 유사한 구조적 특성을 가지고 있으므로 효과적인 타액대체제의 개발에 적합한 성분으로 여겨져 왔다. 구강건조증 환자가 동물성 mucin 함유 타액대체제를 사용할 경우, 동물성 mucin과 인체 타액에 존재하는 항균 단백질이 용액상태인 전타액과 구강표면에 형성된 pellicle에 동시에 존재할 수 있으므로 이들 물질사이에 상호작용이 일어 날 수 있을 것이다. 본 연구의 목적은 용액과 hydroxyapatite(HA) 표면에서 동물성 mucin이 peroxidase 활성에 미치는 영향을 평가하기 위하여 시행되었다. 동물성 mucin이 peroxidase 활성에 미치는 영향은 돼지의 위장 mucin(porcine gastric mucin, PGM) 이나 소의 악하선 mucin(bovine submaxillary mucin, BSM)을 소의 lactoperoxidase(bovine lactoperoxidase, bLPO)나 타액검체와 incubation하는 방법을 사용하여 분석하였고, 표면상태에서의 연구를 위해 HA beads, HA disc, 소의 치아와 같은 3가지 종류의 HA 표면을 활용하였다. Peroxidase 활성은 NbsSCN 법을 이용하여 분석하였다. 1. 돼지위장 mucin은 용액상태에서 bLPO 활성을 증가시켰으나 타액검체의 peroxidase(peroxidase in saliva sample, POS) 활성에는 영향을 미치지 않았다. 2. 소 악하선 mucin은 용액상태에서 bLPO와 POS 활성에 영향을 미치지 않았다. 3. HA 표면에 부착된 돼지위장 mucin은 peroxidase의 부착과 활성을 증가시켰고 이러한 효과는 세 종류의 HA 표면 모두에서 일어났으며, POS의 활성증가는 HA beads와 소 치아 표면에서만 나타났다. 4. bLPO와 돼지위장 mucin의 혼합물을 HA 표면에 부착시킬 경우, HA beads와 HA disc 표면에서의 peroxidase 활성은 증가하였다. 5. bLPO의 돼지위장 mucin에 대한 부착친화도는 소 악하선 mucin에 비해 컸다. 이상의 결과를 종합해 볼 때 동물성 mucin은 용액상태와 HA 표면에서 peroxidase 활성에 영향을 미침을 알 수 있으며, 동물성 mucin을 포함하고 있는 타액대체제는 인체타액 및 타액대체제에 있는 peroxidase 활성에 영향을 미칠 수 있을 것이다.
In this study, we tried to investigate whether platycodin D significantly affects MUC5AC mucin production and gene expression induced by epidermal growth factor (EGF), phorbol ester (PMA) and tumor necrosis factor-$\alpha$ (TNF-$\alpha$) from human airway epithelial cells. Confluent NCI-H292 cells were pretreated with varying concentrations of platycodin D for 30 min and then stimulated with EGF, PMA and TNF-$\alpha$ for 24h, respectively. MUC5AC mucin gene expression and mucin protein production were measured by RT-PCR and ELISA. The results were as follows: (1) Platycodin D was found to inhibit the production of MUC5AC mucin protein induced by EGF, PMA, and TNF-$\alpha$, respectively. (2) It also inhibited the expression of MUC5AC mucin gene induced by the same inducers. These results suggest that platycodin D can regulate mucin gene expression and production of mucin protein, by directly acting on human airway epithelial cells.
인간의 대장내 점막에 대하여 우수한 점착특성을 갖는 probiotic 유산균주를 선별할 목적으로, colonic mucin-binding assay를 고안하고 최적의 분석 조건을 검토한 결과, microtiter plate의 well에 대한 colonic mucin의 부착은 pH 4.8, biotinylated SLP의 농도는 $5.0\;{\mu}g/mL$, 시판 HRP-conjugated streptoavidin은 24,000배 희석용액, TMB의 발색시간은 10분의 조건에서 측정시 최적의 결과를 나타냈다. 동 조건에서 본 assay system을 이용할 경우, 장내 점착능 측정 및 우수 유산균주의 선별에 있어 신속하고 재현성 있는 결과를 제공할 수 있으며, 인간의 대장에 대한 유산균의 점착특성을 정량적으로 분석할 수 있음을 보여주었다. 공시균주 32종 및 유아 분변 유래의 분리균주 18종을 포함한 총 50종의 유산균주에 대하여, colonic mucin-binding assay를 이용하여 대장 mucin에 대한 결합능을 비교한 결과, L. species FSB-1이 가장 높은 결합능을 보여주었다. 따라서 L. species FSB-1을 대상으로 형태학적 특성, 생리 및 생화학적 특성과 16S rDNA에 대한 부분 염기서열 분석을 포함한 동정실험을 수행한 결과, 장내 점착능 우수균주로 선별된 L. species FSB-1은 Lactobacillus brevis로 최종 동정되었다.
Angelica decursiva has been utilised as remedy for controlling the airway inflammatory diseases in folk medicine. We investigated whether nodakenin, columbianadin, and umbelliferone isolated from the roots of Angelica decursiva inhibit the gene expression and production of MUC5AC mucin from human airway epithelial cells. Confluent NCI-H292 cells were pretreated with nodakenin, columbianadin or umbelliferone for 30 min and then stimulated with epidermal growth factor (EGF), phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) or tumor necrosis $factor-{\alpha}$ ($TNF-{\alpha}$) for 24 h. The MUC5AC mucin gene expression was measured by reverse transcription - polymerase chain reaction (RT-PCR). Production of MUC5AC mucin protein was measured by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). The results were as follows: (1) Nodakenin did not affect the expression of MUC5AC mucin gene induced by EGF, PMA or $TNF-{\alpha}$. Columbianadin inhibited the expression of MUC5AC mucin gene induced by EGF or PMA. However, umbelliferone inhibited the expression of MUC5AC mucin gene induced by EGF, PMA or $TNF-{\alpha}$; (2) Nodakenin also did not affect the production of MUC5AC mucin protein induced by EGF, PMA or $TNF-{\alpha}$. Columbianadin inhibited the production of MUC5AC mucin protein induced by PMA. However, umbelliferone inhibited the production of MUC5AC mucin protein induced by EGF, PMA or $TNF-{\alpha}$. These results suggest that, among the three compounds investigated, umbelliferone only inhibits the gene expression and production of MUC5AC mucin stimulated by various inducers, by directly acting on airway epithelial cells, and the results might explain the traditional use of Angelica decursiva as remedy for diverse inflammatory pulmonary diseases.
Objective : In the present study, the author tried to investigate whether six oriental medical prescriptions named gamisingitang (SGT), gamijungtang (IJT), gamicheongpyetang (CPT), galhwengchihyosan (CHS), chwiyeontong (CYT), sigyoungcheongpyetang (SCPT) significantly affect mucin release from cultured hamster tracheal surface epithelial (HTSE) cells. Methode : Confluent HTSE cells were inetabolically radiolabeled with $^{3}H-glucosamine$ for 24 hrs and chased for 30 min in the presence of drugs aforementioned, respectively, to assess the effect of each drug on $^{3}H-mucin$ release. Possible cytotoxicities of effective drugs were assessed by measuring lactate dehydrogenase(LDH) release. Additionally, total elution profiles of control spent media and treatment sample (CPT, CHS, SCPT and CYT) through Sepharose CL-4B column were analysed and effect of CPT, CHS and CYT on MUC5AC mRNA expression in cultured HTSE cells were invsetigated. Results : (1) SGT and IJT did not affect mucin release without cytotoxicity; (2) CPT, SCPT and CHS significantly stimulated mucin release from cultured HTSE cells, with significant cytotoxicity; (4) CPT, CHS, SCPT and CYT chiefly affected the 'mucin' release and did not affect significantly the release of the releasable glycoproteins with less molecular weight than mucin. This result suggests that the four herbal prescriptions specifically affect the release of mucin ; (5) CTP and CHS did not significantly affect the expression levels of MUC 5AC mRNA, however, CYT significantly inhibit the expression levels of MUC 5AC mRNA. Conclusion : CYT can decrease the synthesis of mucin at gene level in cultured HTSE cells.
The prelectin histochemical methods had been applied to study mucosubstances properties of esophageal mucous cells in four teleostean species, i, e.. sebastes schlegli, Halichoeres poecilopterus, Bryzoichtys lysimus and Takifugu pardalis. The following methods were used: periodic acid Scheff"s(PAS) reaction, alcian blue(AD) pH 2.5, AB pH 1.0, AB pH 2.5-PAS, aldehyde fuchsin (AF) pH 1.7-AB pH 2.5 and high iron diamine (HID)-AD pH 2.5 stainings. The number size and shape of esophasgeal mucous cells studied depend on the fish species. Esophageal mucous cells of Sebastes schlegli and Halichoeres poecilopterus were mixed with large, medium sized and small mucous cells, but these cells of the species were mixed with medium sized and small mucous cells. The large esophageal with moderate to considerable amount of acid mucin. Most of the large mucous cells in these species contained neutral mucin and strongly sulfomucin, whereas a few mucous cells contained neutral mucin, strongly sulfomucin, and sialomucin. Medium sized and small mucous cells of these species contained considerable to large amount of neutral mucin, and small to considerable amount of acid mucin, Most of the medium sized and small mucous cells contained neutral mucin and sialomucin, but a few mucous cells contained neutral mucin and strongly sulfomucin or neutral combined with strongly sulfomucin and sialomucin. Most of the esophageal mucous cells pf Bryzoichthys lysimus contained small amount of neutral mucin, while on the other hand a feww mucous cells contained small amount of neutral mucin and minimal amount of sialomucin. But the esophageal mucous cells of Takifugu pardalis contained considerable amount of neutral mucin only.
Objectives : The author intended to investigate Seonbangpaedoktang (SBPT) significantly affect in vivo and in vitro mucin secretion from airway epithelial cells. Methods : In vivo experiment, the author induced hypersecretion of airway mucin, hyperplasia of tracheal goblet cells and the increase in intraepithelial mucosubstances. Effects of orally-administered SBPT during 1 week on in vivo mucin secretion and hyperplasia of tracheal goblet cells were assessed. For in vitro experiment, confluent hamster tracheal surface epithelial (HTSE) cells were metabolically radiolabeled and chased in the presence of SBPT to assess the effect of the agent on 3H-mucin secretion. Total elution profiles of control spent media and treatment sample through Sepharose CL-4B column were analysed. Possible cytotoxicity of the agent was assessed by measuring LDH release. Also, the effect of SBPT on contractility of isolated tracheal smooth muscle was investigated. Results : SBPT inhibited hypersecretion of in vivo mucin and inhibited the increase of number of goblet cells ; SBPT did not affect in vitro mucin secretion and the secretion of the other releasable glycoproteins with less molecular weight than mucin from cultured HTSE cells, without significant effect on LDH release; SBPT did not affect Ach-induced contraction of isolated tracheal smooth muscle. Conclusions : SBPT can inihibit hypersecretion of in vivo mucin and the author suggest that the effect SBPT with their components should investigate further.
본 연구는 산약(Dioscorea Rhizoma)으로 부터 조추출된 mucin과 saponin이 위궤양이 유도된 흰쥐의 위조직 손상과 혈액 성분 및 항산화효소 활성에 미치는 효과를 조사하였다. 위궤양을 유발시킨 후 산약에서 추출한 1%의 mucin을 경구투여한 실험군(DR-M 실험군)의 위점막은 위궤양 유발군(GU 실험군)에 비하여 다소 미미하지만 궤양성 출혈과 울혈이 지속되었으나, 1%의 saponin을 경구투여한 실험군(DR-S 실험군)은 궤양성 출혈이 1일 이상 진행되었으나 3일차에 급격히 호전되어 대조군과 유사한 상태로 회복되었다. 또한 mucin을 경구투여한 실험군은 급성 위궤양으로 인한 위와 장 및 간 조직에서의 부종, 국소성 괴사, 출혈이 지속적으로 출현하였으나, saponin을 경구투여한 실험군은 조직의 출혈과 국소적 괴사가 현저히 감소되어 3일 경과 후에는 위점막하층과 장의 미세융모가 매우 깨끗한 매끄러운 상태로 회복되었다. 혈장 내 AST와 ALT의 수준은 mucin 실험군의 경우 위궤양 유발 직후 위궤양 유발군보다 높은 수치를 보였으나 점차 감소되었으며, saponin 실험군은 위궤양 유발 1일 경과 시 급격히 증가한 후 대조군과 유사한 수치로 회복되었다. 또한 SOD와 CAT의 활성은 mucin 실험군과 saponin 실험군 모두에서 위궤양 유발 후 점차 증가하였다. 따라서 산약에 포함되어 있는 saponin은 mucin에 비해서 급성 위궤양에 의한 위조직의 손상을 감소시키고 혈액 성분을 정상화시키며 항산화효소의 활성에 영향을 미쳐 위궤양으로부터 흰쥐의 위장기능을 개선하는데 효과가 높은 것으로 조사되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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