Fang, Xun;Qamar, Ahmad Yar;Shin, Sang Tae;Cho, Jongki
Journal of Veterinary Clinics
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v.36
no.5
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pp.253-258
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2019
The objective of this study was to analyse the effects of MS-275 (Class I and II histone deacetylase inhibitor) supplementation on the development of porcine in-vitro somatic nuclear transfer embryo production. During in-vitro development, early embryos were exposed to different concentrations of MS-275 (0, $5{\mu}M$, $10{\mu}M$, and $20{\mu}M$). In in-vitro culture supplemented group, the blastocyst development rate was significantly enhanced by $10{\mu}M$ concentration than other groups (24.0% vs. 19.3%, 21.8%, 11.5%; P < 0.05). Additionally, the 6 h supplementation group, significantly improved the blastocysts production than 24 h, 48 h and control groups (26.1% vs. 17.0%, 15.2%, 2.8%; P < 0.05). Following supplementation with optimal concentrations and time ($10{\mu}M$-6 h group), the blastocyst production was significantly higher than control (25.7% vs 15.8%; P < 0.05). The optimal concentrations of MS-275 significantly enhanced the percentages of ICM:TE than control (43.6% vs. 38.4%; P < 0.05) accompanied with significantly higher expression levels of reprogramming related genes (POU5F1, Naong, and SOX2). In conclusion, the optimal concentrations of $10{\mu}M$ MS-275 and 6 h supplementation during in-vitro culture can significantly improve the quality of porcine in-vitro somatic nuclear transfer embryos through histone acetylation and epigenetic modification. Increasing the efficiency of clonal animal production will greatly promote the development of animal disease models and xenotransplantation.
The current standard for testing tetrodotoxin (TTX) in foodstuffs is the mouse bioassay (MBA) in Korea as in many other countries. However, this test suffers from potential ethical concerns over the use of live animals. In addition, the mouse bioassay does not test for a specific toxin thus a sample resulting in mouse incapacitation would need further confirmatory testing to determine the exact source toxin (e.g., TTX, STX, brevotoxin, etc.). Furthermore, though the time of death is proportional to toxicity in this assay, the dynamic range for this proportional relationship is small thus many samples must be diluted and new mice be injected to yield a result that falls within the quantitative dynamic range. Therefore, in recent years, there have been many efforts in this field to develop alternative assays. High performance liquid chromatography (HPLC) coupled with mass spectrometry (MS) has been emerged as one of the most promising options. A LC-MS-MS method involves solid-phase extraction (SPE) and followed by analysis using an electrospray in the positive ionization mode and multiple reactions monitoring (MRM). To adopt LC-MS-MS method as alternative standard for testing TTX, we performed a validation study for the quantification of TTX in puffer fish. This LC-MS-MS method showed good sensitivity as limits of detection (LOD) of $0.03{\sim}0.08{\mu}g/g$ and limits of quantification (LOQ) of $0.10{\sim}0.25{\mu}g/g$. The linearity ($r^2$) of tetrodotoxin were 0.9986~0.9997, the recovery were 80.9~103.0% and the relative standard deviations (RSD) were 4.3~13.0%. The correlation coefficient between the mouse bioassay and LC/MS/MS method was higher than 0.95.
Kim, Jong-Hwa;Moon, Sun-Ea;Kim, Ki-Yu;Jung, You-Jung;Lee, Chang-Hee;Ku, Eun-Jung;Yoon, Mi-Hye;Lee, Jong-Bok
Journal of Food Hygiene and Safety
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v.31
no.2
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pp.94-98
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2016
This study was conducted to establish the simultaneous analysis method for veterinary drug residues in honey by high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry (HPLC/MS/MS). The eleven targeting veterinary drugs with honey test method in Korean Food Standards Codex were divided into Group 1 (streptomycine dihydrostreptomycine, neomycine) and Group 2 (oxytetracycline, enrofloxacin, ciprofloxacin, cymiazole, chloramphenicol, amitraz, coumaphos, fluvalinate) to be analyzed simultaneously. From the results, the retention time (RT) of the targeting drugs was within 15 min, the range of detection limits was 0.0056 to $0.0643{\mu}g/g$ and the range of quantification limits was 0.0169 to $0.1948{\mu}g/g$. The coefficients of determination ($R^2$) for Group 1 ($0.05{\sim}1.0{\mu}g/mL$) and Group 2 ($0.01{\sim}1.0{\mu}g/mL$) were 0.9917~0.9987 and 0.9923~1.000 respectively, and showed the good linearity. The recovery rates for Group 1 (final conc. $0.25{\mu}g/g$) and Group 2 (final conc. $1.0{\mu}g/g$) were 65.1~80.6% and 64.2~90.3% respectively. Also, the analysis results of inter day (n = 3) and intra day (n = 6) RSD (%) for area and retention time showed that the RSD (%) for area and retention time was below 10.92% and 1.57%. Therefore, the simultaneous analysis method of this study is evaluated to be a good test method for veterinary drug residues in honey.
In the present study, in vitro multiple shoot induction was achieved from cotyledonary node and stem nodal explants of cv. NARI-6 of safflower (Carthamus tinctorius L.). Among various growth regulators tested, MS salts and B5 vitamins supplemented with BA (6-Benzy-laminopurine) $17.76\;{\mu}M$ and KN (Kinetin) $6.96\;{\mu}M$ phytohormonal combination was found to be the most effective in initiating numerous shoot buds after 30 days of culture than BA ($4.44-44.39\;{\mu}M$) or KN ($2.32-46.40\;{\mu}M$) alone in the medium. In addition, 0.8% (w/v) agar (Hi-media) and 3.0% sucrose (w/v) was the optimum level for the formation of adventitious shoots. Further results showed the maximum shoot elongation occurred on MS medium with BA ($8.88\;{\mu}M$) and $GA_3$($11.56\;{\mu}M$) combinations. Efficient rooting occurred on quarter strength MS medium with NAA $10.74\;{\mu}M$. The regenerated plantlets were acclimatized and successfully transferred to the field.
An efficient, rapid and large-scale in vitro clonal propagation of agronomically important Indian cereal crop genotypes (NSH27 & K5) of Sorghum bicolor (L.) Moench. by enhanced shoot proliferation in shoot tip segments was designed. MS medium fortified with plant growth regulators and coconut water markedly influenced in vitro propagation of Sorghum bicolor. In vitro plantlet production system has been investigated on Murashige and Skoog (MS) medium with the synergistic combination of 6-benzyladenine ($22.2\;{\mu}M$), kinetin ($4.6\;{\mu}M$), adenine sulphate ($2.8\;{\mu}M$), 5% coconut water and 3% sucrose which promoted the maximum number of shoots as well as beneficial shoot length. Subculturing of shoot tip segments on a similar medium enabled continuous production of more than 100 healthy shoots with similar frequency. When the healthy shoot clumps were cultured on MS medium fortified with 6-benzyladenine ($22.2\;{\mu}M$), kinetin ($4.6\;{\mu}M$), adenine sulphate ($2.8\;{\mu}M$), ${\alpha}$-naphthaleneacetic acid ($2.7\;{\mu}M$), ascorbic acid ($30.0\;{\mu}M$) and 5% coconut water, a rapid production of axillary and adventitious buds was developed after 8 wk culture. More than 300 shoots were produced 10 wk after culture. Rooting was highest (100%) on half strength MS medium containing 22.8 mM IAA. Micropropagated plants established in garden soil, farmyard soil and sand (2:1:1) were uniform and identical to the donor plant with respect to growth characteristics. These plants grew normally without showing any traits.
Mistaking pink colored thermal oil for grape wine, a victim drank the oil to death which was analyzed to contain 39% of ethylene glycol. Thermal oil could be used for heat transfer to prevent the malfunction due to the high pressure in the boiler operated at high temperature when using water. Main component of thermal oil is known to be mineral oil or ethylene glycol. From the blood and other tissue of the victim from autopsy, ethylene glycol and its metabolite were simultaneously analyzed by GC/MS after extraction under acidic condition with acetonitrile followed by derivatization with BSTFA. About 0.2 g of the specimens were pretreated with 50 uL of 0.5 M HCl solution to keep acidic condition, then dehydrated with anhydrous sodium sulfate followed by concentration under nitrogen stream. Ethylene glycol and glycolic acid concentration in blood was measured to be $2,755\;{\mu}g/mL$ and $174\;{\mu}g/mL$ respectively. In other specimen, the concentration of ethylene glycol and glycolic acid was $860\;{\mu}g/g\sim1,290\;{\mu}g/g$ and $93\;{\mu}g/g\sim134\;{\mu}g/g$. Especially, crystal appeared in kidney which was supposed xalate from the metabolite of ethylene glycol.
Journal of the Institute of Electronics Engineers of Korea SD
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v.48
no.1
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pp.14-21
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2011
A 10b 500MS/s $0.13{\mu}m$ CMOS ADC is proposed for 4G wireless communication systems such as a LTE-Advanced and SDR The ADC employs a calibration-free single-channel folding architecture for low power consumption and high speed conversion rate. In order to overcome the disadvantage of high folding rate, at the fine 7b ADC, a cascaded folding-interpolating technique is proposed. Further, a folding amplifier with the folded cascode output stage is also discussed in the block of folding bus, to improve the bandwidth limitation and voltage gain by parasitic capacitances. The chip has been fabricated with $0.13{\mu}m$ 1P6M CMOS technology, the effective chip area is $1.5mm^2$. The measured results of INL and DNL are within 2.95LSB and l.24LSB at 10b resolution, respectively. The SNDR is 54.8dB and SFDR is 63.4dBc when the input frequency is 9.27MHz at sampling frequency of 500MHz. The ADC consumes 150mW($300{\mu}W/MS/s$) including peripheral circuits at 500MS/s and 1.2V(1.5V) power supply.
Phlomis umbrosa and Dipsacus asperoides are distinct species, even though they have a similar appearance. Dipsacus asperoides is used as a Chinese medicinal plant for and has bone strengthening and fracture healing but Phlomis umbrosa has no effect on bone growth. Recently, these plants were used in children's food to improve their bone growth, without distinction in food. Intakes of Dipsacus asperoides in food may be dangerous, because it has never been used in food and its safety has never been tested in humans. We developed liquid chromatography with tandem mass spectrometry method to distinguish these plants in food. The method was validated for linearity, limits of detection, limits of quantification, accuracy and precision. In 5 of 17 samples, we identified Dipsacus asperoides, containing loganin $0.19-14.45{\mu}g/mL$, sweroside $0.13-4.61{\mu}g/mL$ and akebia saponin D $0.59-19.29{\mu}g/mL$. The developed method might be useful to identify Dipsacus asperoides in adulterated food.
For callus culture of leaves and internodal tissue of Quercus acutissirna Carr. and Quercus variabitisBL, MS and GD media were supplemented with combinations of different levels of growth substances such as NAA and BAP, NAA and kinetin, 2,4-D and BAP, and 2,4-D and kinetin. The results were obtained as follows; 1. The rates of formation and growth of callus were good on the GD medium supplemented with NAA and BAP, but the values were quite variable on the MS medium. Root formation occurred at the ratio of 1 : 10-100 in the concentrations of BAP and NAA. 2. The GD medium supplemented with the combination of NAA and kinetin showed 100% callus formation. The callus grew well on the other medium except for that with low concentration of NAA and kinetin. Most of roots were developed from leaf tissue cultured on GD media. 3. The GD medium supplemented with the combination of 2,4-D and BAP also showed 100% callus formation, and growth of callus was good on both of MS and GD media. In particular, the callus derived from internodal tissue showed. the most vigorous growth and reached above 22mm diameter, when they were cultured on MS media supplemented wi th the combinations of $10{\mu}M$ 2,4-D and $1.0{\mu}M$ BAP, and $10{\mu}M$ 2,4-D and $0.1{\mu}M$ BAP. 4. The GD medium supplemented with the combination of 2,4-D and kinetin showed high rate of callus formation, as compared with MS medium Callus grew well on both of MS and GD media.
Kim, Soohee;Kim, Kwang-Nam;Kim, Hyobi;Song, Jae-Young;Park, Sung-Won
Korean Journal of Poultry Science
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v.43
no.2
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pp.111-118
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2016
Mycotoxins are secondary metabolites produced by molds, such as Aspergillus, Fusarium and Penicillium, that have adverse effects on animals and humans. Aflatoxin, ochratoxin, zearalenone, fumonisin and deoxynivalenol are the mycotoxins of greatest agro-economic importance and cause acute disease called mycotoxicoses. Mycotoxicosis in poultry birds results in decreased meat/egg production, immunosuppressant, and hepatotoxicosis. Some of toxins or their metabolites may be retained in animal or human tissues and induce health problems. This study was designed to develop a sensitive liquid chromatography tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) method for the simultaneous detection and quantification of mycotoxins, such as aflatoxin $B_1$, aflatoxin $M_1$, ochratoxin A, zearalenone, fumonisin B and deoxynivalenol, in chicken liver and kidney tissues. The mycotoxins were extracted and purified using modified QUECHERS methods, separated by LC and detected by an electrospray ionisation interface (ESI) and tandem MS. Good precision and linearity were observed for most of six mycotoxins. The recovery test for each mycotoxin in liver and kidney tissues mostly indicated good average recovery rates between 80.94% and 98.10% and the coefficient of variation mostly under 13.78%, except for aflatoxin $M_1$ and fumonisin $B_1$. The limit of detection (LOD) for six mycotoxins was $7.6{\sim}145.79{\mu}g/kg$ in liver tissues and $6.07{\sim}197.20{\mu}g/kg$ in kidney tissues. The quantification limits (LOQ) for 6 mycotoxins were in the range $23.04{\sim}441.78{\mu}g/kg$ in liver tissues and $18.40{\sim}597.59{\mu}g/kg$ in kidney tissues, respectively. The developed multi-mycotoxin method in this study permits simultaneous, simple, and rapid determination of several co-existing mycotoxins in chicken liver and kidney tissues.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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