This experiment carried out to compare the protective effects of some antioxidants to hydroxyl radicals in embryonic mouse whole brain tissue culture. The ICR mouse whole brain (13 embryonic day) was cultured in hydroxyl radical system in which radicals were generated by 20 mU / ml glucose oxidase (GO). In this experiment, to make ferrous iron from ferric iron, iron as an accelerator, and ascorbic acid as a reductant were used. For comparison of the protective effects to hydroxyl radicals, antioxidants such as desferrioxamine (DFX), laccase. water or ethanol extracts from Rhus Vemiciflua Stokes (RVS), and $\alpha$-tocopherol were used, because they relate to metal ion. The results of this experiment showed that all antioxidants protected effectively the cytotoxicity from hydroxyl radicals in the brain cultures. More than 70% of cell viabilities among different antioxidants was at 1 mM DFX, 1.43 $\mu\textrm{m}$ laccase, 12.5 $\mu\textrm{m}$ water extract, 12.5 $\mu\textrm{m}$ ethanol extract and 50 $\mu\textrm{m}$$\alpha$-tocopherol individually, compared with 20 mU/ml GO alone. In comparison to the antioxidative activities of antioxidants, laccase and extracts from RVS showed strong antioxidative effects even at low concentration.
This study was designed to investigate the changes in the properties of the neuronal setm cells or progenitor cells associated with age-related decline in neurogenesis of the hippocampal dentate gyrus (DG). Active whole cells cycle marker Ki67 (a marker of whole cell cycle)-positive and S phase marker bromodeoxyuridine (BrdU)-positive. Neural stem cells gradually were reduced in the hippocampal subgranular zone (SGZ) in an age-dependant manner after birth (from P1 month to P1 year). The ratio of BrdUpositivecells/Ki67-positive cells was gradually enhanced in an age-dependent manner. The ratio of Ki67-positive cells/accu-mulating BrdU-positive cells at 3 hrs after BrdU injection was injected once a day for consecutive 5 days gradually decreased during ageing. TUNEL- and caspase 3 (apoptotic terminal caspase)-positive cells gradually decreased in the dentate SGZ during ageing and immunohistochemical findings of glial fibrillary acid protein (GFAP) were not changed during ageing. NeuN, a marker of mature neural cells, and BrdU-double positive cells gradually decreased in an age-dependent manner but differentiating ratio and survival rate of cells were not changed at 4 wks after BrdU injection once a day for consecutive 5 days. The number of BrdU-positive cells migrated from the hippocampal SGZ into granular layer and its migration speed was gradually declined during ageing. These results suggest that the adult neurogenesis in the mouse hippocampal DG gradually decrease through reducing proliferation of neural stem cells accompanying with cells cycle change and reduced cells migration rather than changes of differentiation.
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.28
no.4
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pp.379-383
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2014
The purpose of this study is to investigate the effects of silkworm extracts (SWE) on reactive oxygen species formation in mice (C57BL/6). Mice were administrated intraperitoneally with SWE (20 mg/kg/day) for 14 days. All animals were sacrificed 24 hours after the last SWE treatment and then extracted the blood and brain tissue in mouse. The researcher measured several parameters related to reactive oxygen species formation, malondialdehyde (MDA) and hydrogen peroxide ($H_2O_2$) contents in serum, whole brain, cerebral cortex and cerebellum. The results showed that MDA content of pre-SWE treatment was decreased significantly in serum, mitochondrial and cytosolic fraction of whole brain and cerebellum (P<0.01). The $H_2O_2$ content of pre-SWE treatment was decreased significantly in mitochondrial fraction of whole brain, cerebral cortex and cerebellum (P<0.01). These results suggest that SWE plays an important role for inhibition of oxidative damage of cells as well as antioxidant effect, aging delay and cells protected from irradiation.
BEST family is a class of Ca2+-activated Cl- channels evolutionary well conserved from bacteria to human. The human BEST paralogs (BEST1-BEST4) share significant amino acid sequence homology in the N-terminal region, which forms the transmembrane helicases and contains the direct calcium-binding site, Ca2+-clasp. But the cytosolic C-terminal region is less conserved in the paralogs. Interestingly, this domain-specific sequence conservation is also found in the BEST1 orthologs. However, the functional role of the C-terminal region in the BEST channels is still poorly understood. Thus, we aimed to understand the functional role of the C-terminal region in the human and mouse BEST1 channels by using electrophysiological recordings. We found that the calcium-dependent activation of BEST1 channels can be modulated by the C-terminal region. The C-terminal deletion hBEST1 reduced the Ca2+-dependent current activation and the hBEST1-mBEST1 chimera showed a significantly reduced calcium sensitivity to hBEST1 in the HEK293 cells. And the C-terminal domain could regulate cellular expression and plasma membrane targeting of BEST1 channels. Our results can provide a basis for understanding the C-terminal roles in the structure-function of BEST family proteins.
The amphetamine derivative 3, 4-methylenedioxymethamphetamine (MDMA) has become a popular recreational drug, and has also been shown to cause serotonergic neurotoxicity. This report shows that MDMA impairs brain development in a whole mouse embryo culture. The results of quantitative real-time PCR analysis showed that autophagy-related protein 5 (Atg5) expression is elevated in mouse embryo and neuroblastoma cells after MDMA treatment. This elevated Atg5 expression interferes with the neuronal differentiation of neuroblastoma cells such as SH-SY5Y and PC12 cells. Thus, our results suggest that the use of MDMA during pregnancy may impair neuronal development via an induction of Atg5 expression.
Purpose : To investigate the regulation of apoptosis and cell cycle in mouse brain irradiation. Materials and Methods : 8-week old male mice, C57B1/6J were given whole body $\gamma-radiation$ with a single dose of 25 Gy using Cobalt 60 irradiator. At different times 1, 2, 4, 8 and 24hr after irradiation, mice were killed and brain tissues were collected. Apoptotic cells were scored by TUNEL assay. Expression of p53, Bcl-2, and Bax and cell cycle regulating molecules; cyclins Bl, Dl, E and cdk2, cdk4, $p34^{cdc2}$ were analysed by Western blotting. Cell cycle was analysed by Flow cytometry. Results : The peak of radiation induced apoptosis is shown at 8 hour after radiation. With a single 25 Gy irradiation, the peak of apoptotic index in C57B1/6J is $24.0{\pm}0.25$ (p<0.05) at 8 hour after radiation. Radiation upregulated the expression of p53/tubulin, Bax/tubulin, and Bcl-2/tubulin with 1.3, 1.1 and 1.45 fold increase, respectively were shown at the peak level at 8 hour after radiation. The levels of cell cycle regulating molecules after radiation are not changed significantly except cyclin D1 with 1.3 fold increase. Fractions of Go-Gl, G2-M and S phase in the cell cycle does not specific changes by time. Conclusion : In mouse brain tissue, radiation induced apoptosis is particularly shown in a specific area, subependyma. These results and lack of radiation induced changes in cell cycle ofter better understanding of radiation response of noraml brain tissue.
Son, Yeonghoon;Jeong, Ye Ji;Kwon, Jong Hwa;Choi, Hyung-Do;Pack, Jeong-Ki;Kim, Nam;Lee, Yun-Sil;Lee, Hae-June
Journal of electromagnetic engineering and science
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v.15
no.3
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pp.151-157
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2015
The increasing use of mobile phones has raised public concern about the possible biological effects of radiofrequency electromagnetic field (RF-EMF) exposure on the human brain. To investigate the potential effect of RF-EMF exposure on the brain, we examined the behaviors and hippocampal morphology of C57BL/6 mice after sub-chronic exposure to RF-EMFs with a relatively high SAR level (5.0 W/kg). We applied a 2-hour daily exposure of WCDMA 1,950 MHz using a reverberation chamber that was designed for whole-body exposure for 60 days. In the behavioral tests, RF-EMF did not alter the physical activity or long-term memory of mice. Moreover, no alteration was found in the neuronal and glial cells in the hippocampus by RF-EMFs. In this study, we showed that sub-chronic whole body RF exposure did not produce memory impairment and hippocampal morphological alteration in C57BL/6 mice.
Kim, Mun-Ki;Lee, Si-Joon;Vasudevan, Anju;Won, Chung-Kil
Korean Journal of Veterinary Research
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v.59
no.4
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pp.201-205
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2019
This study presents neurogenesis and neuronal migration patterns of gamma-aminobutyric acid-ergic (GABAergic) neurons during mesencephalic development of mouse. After neurons from embryonic day (E) 10-16 were labelled by a single injection of 5-bromo-2'-deoxyuridine (BrdU), immunohistochemistry was performed. Neurogenesis were mainly generated in the mesencephalic region at E10 to E13. After E14, BrdU positive cells were observed only in the dorsal mesencephalon. GABAergic neurons were mainly originated in the ventrolateral region of the mesencephalon at the early embryonic stage, especially at E11 to E13. E10-labeled cells showed positive for GABAergic neuron in the basal plate of the mesencephalon at E13. At E15, GABAergic neurons were observed in the entire basal plate and some regions of the ventral and dorsal mesencephalon. They were present in the whole basal plate, the ventral and dorsal mesencephalon of E17, spreading more outward of the mesencephalon at P0. Our study demonstrates that major neurogenesis of GABAergic neurons occurs at E11 to E13. However, neuronal migration continues until neonatal period during mesencephalic development.
Kim, Mun-ki;Lee, Si-Joon;Vasudevan, Anju;Won, Chungkil
Journal of Biomedical and Translational Research
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v.19
no.4
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pp.125-129
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2018
Dopaminergic neurons are one of the major neuronal components in the brain. Mesencephalon dopamine (DA) neurogenesis takes place in the ventricular zone of the floor plate, when DA progenitors divide to generate postmitotic cells. These cells migrate through the intermediate zone while they differentiate and become DA neurons on reaching the mantle zone. However, neurogenesis and neuronal migration on dopaminergic neurons remain largely unexplored in the mesencephalon development. This study presents neurogenesis and neuronal migration patterns of dopaminergic neurons during mesencephalic development of the mouse. Neurons from embryonic day (E) 10-14 were labelled by a single injection of 5-bromodeoxyuridine and immunohistochemistry was performed. The neurogenesis occurred mainly at the E10 and E11, which was uniformly distributed in the mesencephalic region, but neurons after E13 were observed only in the dorsal mesencephalon. At the postnatal day 0 (P0), E10 generated neurons were spread out uniformly in the whole mesencephalon whereas E11-originated neurons were clearly depleted in the red nucleus region. DA neurons mainly originated in the ventromedial mesencephalon at the early embryonic stage especially E10 to E11. DA neurons after E12 were only observed in the ventral mesencephalon. At E17, E10 labelled neurons were only observed in the substantia nigra (SN) region. Our study demonstrated that major neurogenesis occurred at E10 and E11. However, neuronal migration continued until neonatal period during mesencephalic development.
To measure antioxidative activities, the various extracts from RVS (Rhus Verniciflua Stokes) were tried out with either DPPH or thiocyanate method. Also we used the GO (Glucose Oxidase) 20 mU/mL hydroxyl radical system in mouse whole brain cell culture. Chloroform, n-hexane or ethanol were used as extract solutions which had different polarity respectively. In DPPH and thiocyanate method, the antioxidative activities of the crude ethanol extracts were stronger than other extracts. The crude ethanol extracts were fractionated 5 peaks by glass column. Among of them, antioxidative activity of peak II $(P_{II})$ was shown stronger than other fractions, a little for peak III $(P_{III})$ and peak IV $(P_{IV})$, and none for peak I $(P_I)$ and Peak V $(P_V)$. In the antioxidative effects of crude ethanol extracts (30 mg/mL), cell viabilities were evaluated $1\;{\mu}L\;(297\;{\mu}g/mL)$, $2\;{\mu}L\;(588\;{\mu}g/mL)$ of crude ethanol extracts 59%, 68% respectively. $10\;{\mu}L\;(2,727\;{\mu}g/mL)$ addition of crude ethanol extracts had 95% cell viabilities, 0.01% significant, comparing control. In addition, the compounds related to antioxidative effect of crude ethanol extract might be glycoproteins by means of SDS-PAGE. Comparison to antioxidative effects between several antioxidants (ascorbic acid, ${\alpha}-tocopherol$, catalase) $273\;{\mu}L/mL$ addition of crude ethanol extracts corresponds to $1\;{\mu}g/mL$ catalase in antioxidative effects.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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