Yoon, Sang Ho;Kim, Byung-Hak;Ye, Sang-Kyu;Kim, Myoung-Hwan
The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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v.18
no.3
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pp.263-268
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2014
The etiology of most psychiatric disorders is still incompletely understood. However, growing evidence suggests that stress is a potent environmental risk factor for depression and anxiety. In rodents, various stress paradigms have been developed, but psychosocial stress paradigms have received more attention than non-social stress paradigms because psychosocial stress is more prevalent in humans. Interestingly, some recent studies suggest that chronic psychosocial stress and social isolation affects mainly anxiety-related behaviors in mice. However, it is unclear whether chronic non-social stress induces both depression- and anxiety-related phenotypes or induces one specific phenotype in mice. In the present study, we examined the behavioral consequences of three chronic non-social stress paradigms: chronic predictable (restraint) stress (CPS), chronic unpredictable stress (CUS), and repeated corticosterone-HBC complex injection (RCI). Each of the three paradigms induced mild to severe depression/despair-like behaviors in mice and resulted in increased immobility in a tail suspension test. However, anxiety-related phenotypes, thigmotaxis and explorative behaviors, were not changed by the three paradigms. These results suggest that depression- and anxiety-related phenotypes can be dissociated in mouse stress models and that social and non-social stressors might affect brain circuits and behaviors differently.
Whole-body $\gamma$-irradiation(WBI), which produces an oxidative stress, is reported to attenuate the acute antinociceptive action of morphine (a $\mu$-opioid receptor agonist), but not DPLPE (a $\delta$-opioid receptor agonist), in mice. Recently, we also reported that antinociceptive effect of morphine, but not $\beta$-endorphin (a novel $\varepsilon$-opioid receptor agonist), was attenuated by oxidative stress. These findings prompted us to investigate the effect of WBI on the antinociception of morphine and $\beta$-endorphin in mice. Mice were exposed to WBI (5 Gy) from a $^{60}Co$ gamma-source and tested 2 hours later for antinociception produced by intracerebroventricular administration of morphine or $\beta$-endorphin using the hot water tail-immersion and the writhing tests. WBI significantly attenuated the antinociception produced by morphine only in the hot water tail-immersion test, whereas the antinociception of $\beta$-endorphin was significantly potentiated by WBI in both tests. These results demonstrate a differential sensitivity of $\mu$- and $\varepsilon$-opioid receptors to WBI, and support the hypothesis that morphine and $\beta$-endorphin administered supraspinally produce antinociception by different neuronal mechanisms.
Znf230, the mouse homologue of the human spermatogenesis-related gene, ZNF230, has been cloned by rapid amplification of cDNA ends (RACE). This gene is expressed predominantly in testis, but its expression in different testicular cells and spermatogenic stages has not been previously analyzed in detail. In the present study, the cellular localization of the Znf230 protein in mouse testis and epididymal spermatozoa was determined by RT-PCR, immunoblotting, immunohistochemistry and immunofluorescence. It is primarily expressed in the nuclei of spermatogonia and subsequently in the acrosome system and the entire tail of developing spermatids and spermatozoa. The results indicate that Znf230 may play an important role in mouse spermatogenesis, including spermatogenic cell proliferation and sperm maturation, as well as motility and fertilization.
We tested how adjuvants effect in a cancer vaccine model using an epitope derived from an autoactivation loop of membrane-type protease serine protease 14 (PRSS14; loop metavaccine) in mouse mammary tumor virus (MMTV)-polyoma middle tumor-antigen (PyMT) system and in 2 other orthotopic mouse systems. Earlier, we reported that loop metavaccine effectively prevented progression and metastasis regardless of adjuvant types and TH types of hosts in tail-vein injection systems. However, the loop metavaccine with Freund's complete adjuvant (CFA) reduced cancer progression and metastasis while that with alum, to our surprise, were adversely affected in 3 tumor bearing mouse models. The amounts of loop peptide specific antibodies inversely correlated with tumor burden and metastasis, meanwhile both TH1 and TH2 isotypes were present regardless of host type and adjuvant. Tumor infiltrating myeloid cells such as eosinophil, monocyte, and neutrophil were asymmetrically distributed among 2 adjuvant groups with loop metavaccine. Systemic expression profiling using the lymph nodes of the differentially immunized MMTV-PyMT mouse revealed that adjuvant types, as well as loop metavaccine can change the immune signatures. Specifically, loop metavaccine itself induces TH2 and TH17 responses but reduces TH1 and Treg responses regardless of adjuvant type, whereas CFA but not alum increased follicular TH response. Among the myeloid signatures, eosinophil was most distinct between CFA and alum. Survival analysis of breast cancer patients showed that eosinophil chemokines can be useful prognostic factors in PRSS14 positive patients. Based on these observations, we concluded that multiple immune parameters are to be considered when applying a vaccine strategy to cancer patients.
Kim, Hyun-Joo;Kim, Kyung-Ran;Youn, Ji-Youn;Kim, Min-Hee;Ryu, Jae-Chun
Proceedings of the Korea Society of Environmental Toocicology Conference
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1996.12a
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pp.61-61
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1996
Taxol is used as cancer therapeutic agent. It has been known as weak posotive of chromosome aberration assay in vitro in our previous results (Ryu et al., 1996) and potent clastogens in the mouse bone marrow micronucleus (Tinwell and Ashby, 1994). We performed microgel electrophoresis to determine the effect of taxol and it's precursor 10-deacetyl baccatin III(DAB) on DNA. Microgel electrophoresis is useful, rapid, simple, visual, and sensitive technique for measuring DNA breakage and repair mechanisms in mammalian 근ells. The range of concentration used for taxol were 854, 427, 213.5, 106.8, 53.4 Ug/ml, for DAB 910 ,455, 227.5 U9/ml, Cell viability always exceed 85%. We analyzed the results by using the special software of image analyzer for this comet assay (Komet 3.0). By using this image analyzer software , we can get the result as the tail moment ((mean of tail length - mean of head lengh) x tail%DNA/100). A slight increase in DNA migration was observed for taxol at the concentration of 854 Ug/m4 in the absence of S9 mixture. No increased DNA migration was observed after treatment with DAB.
Jang, Won Hee;Kim, Sang-Jin;Jeong, Young Joo;Jun, Hee Jae;Moon, Il Soo;Seog, Dae-Hyun
Journal of Life Science
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v.22
no.12
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pp.1608-1613
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2012
A conventional kinesin, KIF5/Kinesin-I, transports various cargoes along the microtubule through interaction between its light chain subunit and the cargoes. Kinesin light chains (KLCs) interact with many different cargoes using their tetratricopeptide repeat (TPR) domain, but the mechanism underlying recognition and binding of a specific cargo has not yet been completely elucidated. We used the yeast two-hybrid assay to identify proteins that interact with the TPR domain of KLC1. We found an interaction between the TPR domain of KLC1 and an amyloid precursor protein (APP)-binding protein PAT1 (protein interacting with APP tail 1). The yeast two-hybrid assay demonstrated that the TPR domain-containing region of KLC1 mediated binding to the C-terminal tail region of PAT1. PAT1 also bound to KLC2 but not to kinesin heavy chains (KIF5A, KIF5B, and KIF5C) in the yeast two-hybrid assay. These protein-protein interactions were also observed in the glutathione S-transferase (GST) pull-down assay and by co-immunoprecipitation. Anti-PAT1 antibody as well as anti-APP anti-body co-immunoprecipitated KLC and KHCs associated with PAT1 from mouse brain extracts. These results suggest that PAT1 could mediate interactions between Kinesin-I and APP containing vesicles.
This experiment was conducted to determine the effects of gossypol injection spermatogenesis of mice. Gossypol was injected into the stroma of testes(TS) and the doses of gossypol injected were 5, 10 and 15mg per kg of body weights, respectively. The number of sperm and the weight of testes were gradually reduced(P<0.01) from 2 to 4 weeks after gossypol treatment in all groups of mice treated with gossypol, compared with the control group. The rates of malformation(loss of proacrosome, damage of midpiece and breaking of tail) of sperm were significantly(P<0.01) increased at 2 and 3 weeks after the injection of 10 or 15mg of gossypol. However, the weight of testes and the number of normal sperm were gradually increased and the malformation rate of sperm was decreased between 4 and 6 weeks after injection of 5mg of gossypol. The results of this experiment indicated that probably ireeversible suppression of spermatogenesis could be brought about easily and immediately by the single injection of gossypol into TS.
The wild simulated ginseng (WSG) has been effectively used in folk medicine as a remedy against hepatic disease, hypertension and arthritic disease. However, there is still lack of scientific proof about its antioxidant capability. The present study has been conducted to evaluate the protective role of the WSG ethanol extract in the CCl4-induced oxidative stress and resultant hepatic disfunction in ICR mice. The electron donating abilities and IC50 of WSG etnanol extract were 76.86 ${\pm}$ 1.06% and 33.3 ${\mu}g$/mL (that of ascobic acid was 16.5 ${\mu}g$/mL), respectively. Total antioxidant status of WSG extract was 2.13 ${\pm}$ 0.06 mmoL/mg, while the values of ascorbic acid and BHT were 3.63 ${\pm}$ 0.06 and 3.12 ${\pm}$ 0.02, respectively. ICR mice (aged 3weeks) were fed for 4 weeks on AIN-93M diet and had free access to food and water. The animals were divided into three groups: normal group (intraperitoneally (i.p) injected with PBS at 100 ${\mu}L$/mouse), group C; CCl4-induced and without any treatment. (i.p injected only PBS, 100 ${\mu}L$ /mice), group G; CCl4-induced and treated with WSG (i.p injected with 5 mg WSG extract per mouse, suspended in 100 ${\mu}L$ phosphate buffer). After the i.p. injection of WSG or PBS (5 times for 7weeks), all mice were administered CCl4 in olive oil at the last day of the experiment, except for normal group. The normal group was administered only olive oil. Determination of plasma triglyceride, total cholersterol, fasting glucose and GPT activity was performed using automatic blood analyzer. To evaluate the protective effect against the oxidative stress, DNA fragmentation and TBARS were determined in blood leucocytes and RBC and hepatocyte, respectively. Body and organs weights and food intake did not show significant differences among the groups. Blood total cholesterol of group G was similar to that of normal group, which was the lowest in group C. The fasting blood glucose level was the highest in normal group (205.20 ${\pm}$ 135.24), which were decreased in group C (134.2 ${\pm}$ 79.31) and group G (126.48 ${\pm}$ 77.05). TBARS values in a red blood cell and hepatic tisuue homogenate were lower in group G comparing to the group C. DNA% in tail, tail length (TL) and tail moment (TM) of blood leucoocytes showed the highest values in group C (20.11 ${\pm}$ 2.47, 17.36 ${\pm}$ 2.58, 94.11 ${\pm}$ 12.29) and they were significantly diminished in group G (9.63 ${\pm}$ 1.19, 7.04 ${\pm}$ 1.50, 38.64 ${\pm}$ 7.60). In conclusion, wild simulated ginseng might be a protective agent against the oxidative stress.
Background: Minor histocompatibility HY antigen, as a transplantation antigen, has been known to cause graft rejection in MHC (major histocompatibility complex) matched donor-recipient. The aim of our study is to investigate the role of male antigen (HY) disparity on MHC matched pancreatic islet transplantation and to examine the mechanism of the immune reaction. Methods: Pancreatic islets were isolated and purified by collagen digestion followed by Ficoll gradient. The isolated islets of male C57BL6/J were transplanted underneath the kidney capsule of syngeneic female mice rendered diabetic with streptozotocine. Blood glucose was monitored for the rejection of engrafted islets. After certain period of time, tail to flank skin transplantation was performed either on mouse transplanted with HY mismatched islets or on sham treated mouse. The rejection was monitored by scoring gross pathology of the engrafted skin. Results: HY mismatched islets survived more than 300 days in 14 out of 15 mice. The acceptance of second party graft (male B6 islets) and the rejection of third party graft (male BALB/c islets) in these mice suggested the tolerance to islets with HY disparity. B6 Skin with HY disparity was rejected on day $25{\pm}7$. However, HY mismatched skin transplanted on the mice tolerated to HY mismatched islets survived more than 240 days. Tetramer staining in these mice indicated the CTL recognizing MHC Db/Uty was not deleted or anergized. Conclusion: The islet transplantation across HY disparity induced tolerance to HY antigen in C57BL6 mouse, which in turn induced tolerance to HY mismatched skin, which otherwise would be rejected within 25 days. The MHC tetramer staining suggested the underlying mechanisms would not be clonal deletion or anergy.
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.18
no.6
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pp.1694-1698
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2004
We hope to evaluate the effects of Sabaek-san for the bronchial asthma using assesment on the metrix metalloproteinase-9(MMP-9) after Sabaek-san was intravenously administered OVA-sensitized and -challenged mice. Seventy-two female mice, 8-10 weeks of age and free of murine specific pathogens, were used. Of the seventy-two mice, twenty-four mice were not sensitized and forty-eight mice were sensitized by intraperitoneal injection of OVA. Of the sensitized mice, twenty-four mice didn't administrate Sabaek-san and twenty-four administrated Sabaek-san. Mice were sensitized on days 1 and 14 by intraperitoneal injection of 20 fig OVA. On days 21, 22 and 23 after the initial sensitization, the mice were challenged for 30 minutes with an aerosol of 1% OVA in saline. Sabaek-san administered 200㎎/㎏ in the tail of the mouse, one time per day, for 7 days, beginning 14 days after first sensitization. Bronchoalveolar lavage was performed 72 hours after the last challenge, and total cell numbers in the BAL fluid were count. Also, level of MMP-9 in the BAL fluid were measured by Enzyme immunoassays and Western blot analysis. Enzyme immunoassay revealed that MMP-9 levels in the BAL fluids significantly increased 72 h after OVA inhalation compared with levels in the control group. After administration of the Sabaek-san, the levels of the MMP-9 in BAL fluids 72 h after OVA inhalation reduced dramatically. Western blot analysis revealed that MMP-9 levels increased in the all mice which were challenge with OVA without administered Sabaek-san compared the normal mouse. However, in the groups of the administered Sabaek-san, the MMP-9 level markedly decreased. Sabaek-san might be effect the treatment of the bronchial asthma as a inhibition of the MMP-9.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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