• Archives of Pharmacal Research
• /
• 제28권3호
• /
• pp.370-375
• /
• 2005

The objective of this study was to develop a new reverse micelle-based microencapsulation technique to load tetracycline hydrochloride into PLGA microspheres. To do so, a reverse micellar system was formulated to dissolve tetracycline hydrochloride and water in ethyl formate with the aid of cetyltrimethylammonium bromide. The resultant micellar solution was used to dissolve 0.3 to 0.75 g of PLGA, and microspheres were prepared following a modified solvent quenching technique. As a control experiment, the drug was encapsulated into PLGA microspheres via a conventional methylene chloride-based emulsion procedure. The micro­spheres were then characterized with regard to drug loading efficiency, their size distribution and morphology. The reverse micellar procedure led to the formation of free-flowing, spherical microspheres with the size mode of 88 ~m. When PLGA microspheres were prepared follow­ing the conventional methylene chloride-based procedure, most of tetracycline hydrochloride leached to the aqueous external phase: A maximal loading efficiency observed our experimental conditions was below $5\%$. Their surfaces had numerous pores, while their internal architecture was honey-combed. In sharp contrast, the new reverse micellar encapsulation technique permitted the attainment of a maximal loading efficiency of 63.19 $\pm$$0.64\%$. Also, the microspheres had smooth and pore-free surfaces, and hollow cavities were absent from their internal matrices. The results of this study demonstrated that PLGA microspheres could be successfully prepared following the new reverse micellar encapsulation technique.

• 한국미생물생명공학회:학술대회논문집
• /
• 한국미생물생명공학회 1977년도 추계학술발표회 및 특별 강연초록
• /
• pp.192-193
• /
• 1977

It is certainly a difficult work to find out novel-type "practical" antibiotic from natural sources. In fact, chemically modified antibiotics, such as synthetic penicillins, cephalosporins, derivatives of tetracycline, lincomycin, rifamycin and kanamycin are most widely used in medical practice at present. However, as the possibility of success gained by chemical modification is limited, it would be the buty of our applied microbiologists to offer novel antibiotics to chemist and physician without interruption. In this lecture, some practical problems in new antibiotic research will be discussed.(중략)

• 한국동물위생학회지
• /
• 제28권3호
• /
• pp.203-213
• /
• 2005

Oxytetracycline, tetracycline, chlortetracycline and doxycycline in honey were separated by solid phase extraction (SPE) and determined with high performance liquid chromatography (HPLC) with UV/Visible detector. Analysis was carried out using following conditions: XTerra $C_8$ column $(3.9\times150mm\;i.d. 5{\mu}m)$, mobile phase composed of 0.01M oxalic acid : methanol : acetonitrile (820 : 80 : 100, v/v/v), isocratic pump at a flow rate of 0.9 ml/min. and $50{\mu}l$ of injection volume, UV/Visible detector with wavelength of 360nm. The calibration curves of four tetracyclines showed linearity $(\gamma^2>0.999)$ at concentration range of $100\~1,000 ng/ml$. The recoveries in fortified honey represented more than $70\%$ with low coefficient of variation $(<10\%)$ for concentration range of four tetracyclines. The detection limits for oxytetracycline, tetracycline, chlortetracycline and doxycycline were 13.8, 14.6, 26.2 and 24.9ng/g in acacia honey. respectively. We also monitored tetracyclines residue in domestic honey [n : 38, acacia (20), wild flower (18) ] and foreign honey [n=22, legally distributed (13), illegally distributed (9)] using modified Charm II screening and HPLC confirmation methods. Seven of the 60 samples $(11.7\%)$ were suspect positive using modified Charm II screening test. Chlortetracycline residue was found in one foreign honey (illegally distributed) tested at concentrations of 0.22 ppm. Conclusively, for more effective control of tetracyclines used in beekeeping should be further survey for residues in honey and also national guidelines (maximum residue limit : MRL) and methods should be obligatory.

• Archives of Pharmacal Research
• /
• 제23권3호
• /
• pp.257-260
• /
• 2000

The tetracycline-controlled transactivator (tTA)-mediated gene activation system was examined in virus infected cells to determine its role in the control of gene expression. In the presence of tTA, the gene expression from the tetO-modified minimal promoter was efficiently activated in the uninfected cells, whereas essentially no activation was observed from the only minimal promoter without the seven direct repeats of 42 bp tetO sequences. However, essentially no activation was observed when only the minimal promoter was used, without the seven direct repetitions of the 42 bp tetO sequences. On the other hand, in the infected cells, a substantial background of $\beta$-glucuronidase expression was detected in the absence of tTA, even though tTA stimulated the gene expression by ~7-fold. This background expression indicates that the sequences within or nearby tetO are involved in the background stimulation of the gene expression by HCMV and HSV-1 . These results suggest that the application of the tTA-mediated gene activation system may not be extremely useful for studying the biological roles of HCMV and HSV genes In the viral replicative cycles, because of the basal activity of the gene expression.

• Journal of Periodontal and Implant Science
• /
• 제24권3호
• /
• pp.581-596
• /
• 1994

치근활택술만 시행한 군과 치근활택술후 테트라사이클린 25, 50, 75, 100, 150mg/ml 농도로 5분간 처리한 군 사이에 치근면에서의 치주인대세포에 대한 증식 및 전개에 미치는 효과를 비교하기 위해 심한 치주질환으로 이환된 치아를 발치하여 철저한 치근활택술을 시행한 후 치주질환에 이환된 치근면만을 이용하여 치근절편을 제작하였다. 5분간 절편을 각 농도별로 침수시킨 후 세포증식률을 알아보기 위해 각 절편을 24 well 조직배양기에 넣고 $1{\times}10^5$개의 치주인대세포를 가진 배양액 1ml씩을 넣어 6시간동안 배양 후, 새로운 배양기에 옮기고 24, 48, 72시간동안 배양하여 0.05% trypsin/0.02% EDTA로 처리하고 세포를 분리하여 광학위상차현미경을 이용하여 세포수를 측정하고 단위치근면적당 세포수를 계산하였다, 세포증식률의 실험에서는 24, 48, 72시간 모두에서 치근활택술군, 테트라사이클린 25, 150, 50, 75, 100mg/ml 처리군 순으로 세포 수가 증가함을 보였으며 각 군 모두에서도 시간경과에 따라 부착세포수도 증가하는 경향을 보였다. 24시간에서는 치근활택술군과 테트라사이클린 75mg/ml, 100mg/ml 처리군 사이, 48시간에서는 치근활택술군과 테트라사이클린 100mg/ml 처리군 사이, 72시간에서는 치근활택술군과 테트라사이클린 50, 75, 100mg/ml와 테트라사이클린 25mg/ml와 100mg/ml 사이에 통계학적으로 유의성을 보였다(p<0.05). 전반적으로 치근활택술군보다 테트라사이클린으로 처리한 치근면 특히 농도 100mg/ml 처리군에서 좋은 세포증식률을 보였으며 150mg/ml에서는 100mg/ml 처리군에 비해 세포 증식률이 감소하는 경향을 보였다. 주사전자현미경 관찰에서는 세포배양 30분 후에는 치근활택술군에서는 세포외형이 전반적으로 구형을 보이면서 부착된 양상을 보였고 테트라사이클린 처리군에서는 세포질이 방사형으로 약간 확장되고 중간부는 소기포로 덮히고 둥글게 보였다. 세포수에 있어서도 테트라사이클린 처리군이 더 많이 부착되어 있는 양상을 나타내었고 상아세관의 노출도 관찰할 수 있었다. 세포배양 6시간이 경과한 후 세포는 치근활택술군에서는 세포질이 방사형으로 확장되어 보이고, 테트라사이클린 처리군에서는 세포의 변연일부가 함몰되어 극성을 나타내기 시작했다. 세포배양 24시간이 경과한 후 치근활택술군에서는 세포가 뚜렷한 극성을 보이고 테트라사이클린 처리군에서는 조금 더 신장된 방추형을 보였다. 이상의 연구 결과, 치주인대세포의 전개는 치근면을 테트라사이클린으로 처리시 테트라사이클린 l00mg/ml 처리군이 50mg/ml 처리군보다 초기에는 약간 더 진전된 양상을 보였으나 시간이 경과함에 따라 거의 유사하게 나타났으며, 치근활택술군보다는 우수하게 진행되었고, 세포증식률에서는 테트라사이클린 100mg/ml 처리군이 가장 많은 세포수를 보였으므로 임상적용시에는 테트라사이클린 100mg/ml가 적절할 것으로 사료된다.

• Reproductive and Developmental Biology
• /
• 제28권3호
• /
• pp.197-202
• /
• 2004

골다공증 치료제로 이용되고 있는 hPTH는 체내의 혈중 칼슘 농도를 조절하는 인간의 부갑상선 호르몬이다. 본 연구에서는 hPTH를 효율적으로 생산하는 돼지세포를 구축하고자 다양한 retrovirus vector를 이용하였는데 다음과 같은 결과를 관찰하였다. 1) hPTH 유전자의 전이를 확인하기 위해 RT-PCR을 수행한 결과, 형질전환된 모든 돼지세포에서 420 bp의 hPTH에 해당하는 단편을 확인할 수 있었으며, WPRE가 도입되지 않은 실험군보다 WPRE서열이 도입된 실험군에서 더 강한 밴드를 확인하였다. 2) ECLIA 측정 결과 hPTH 유전자가 도입된 모든 세포에서 hPTH가 생성되었으며, 특히 Tet-On system에서는 doxycycline을 처리한 실험군에서 hPTH의 발현이 유도되었음을 확인하였다. 또한 RT-PCR과 ECLIA을 수행하여 hPTH의 도입 여부와 단백질 생산을 비교한 결과, WPRE 서열이 hPTH 유전자의 downstream 위치에 도입된 실험군에서 가장 많은 단백질이 생산됨을 확인할 수 있었다.

• Journal of Applied Biological Chemistry
• /
• 제64권2호
• /
• pp.177-184
• /
• 2021

축산용 항생제는 투여된 양의 일부만이 체내에서 사용되며 나머지는 분뇨로 배출되며 이를 활용한 퇴비를 농경지에 살포함으로써 농업환경에 유입되어 2차 오염 등을 초래하고 있다. 따라서, 농업환경 중 항생제 관리기준 설정 등 사후 관리 기술이 필요하다. 본 연구는 국내 사용빈도가 높은 것으로 알려진 tetracycline 및 sulfonamide 계열 등의 항생제를 대상으로 매체별 잔류량을 비교하고 퇴비 시용 전·후 농경지 토양 중 잔류항생제의 위해성을 평가하기 위하여 수행되었다. Buffer 및 SPE를 사용한 전처리 방법은 ppb 수준에서 70% 이상의 회수율을 나타냈으며, 검출한계(LOD)의 범위는 퇴비와 토양에서 각각 0.13-0.46 ㎍/kg과 0.05-0.25 ㎍/kg이었다. 잔류 항생제 분석결과 퇴비 중 tetracycline 계열 항생제의 잔류 농도는 5.38-196.0 ㎍/kg, sulfonamide 계열은 below the detection of limit (BDL)-259.0 ㎍/kg 수준으로 검출되었다. 농경지 토양의 경우 각각 0.30-53.3 ㎍/kg, BDL-4.16 ㎍/kg의 잔류 수준을 나타냈으며 토양분배계수(Kd) 값이 높은 tetracycline 계열 항생제의 잔류 농도가 sulfonamide 계열보다 높았다. 퇴비 시용 전후의 농경지 토양의 항생제에 대한 인체위해도는 항생제 종류에 따른 차이가 있었으나, 전체 HQ가 1 이하에서 안전하다는 기준에 의하면 조사된 항생제 5종 모두 인체 위해성이 매우 낮았으며 시용 전·후의 영향이 전체 위해도에 미치는 비율을 고려하면, 퇴비시용이 토양의 항생제에 대한 인체위해성에 미치는 영향은 미비한 것으로 판단되었다.

• 대한수의학회지
• /
• 제36권2호
• /
• pp.495-511
• /
• 1996

To investigate the effectiveness of the freeze-dried allografts and fibrin glue in bone grafts, the status of new bone formation and union of the grafted bone were observed in three types of grafting bones; autogenic bone(AT), allogenic bone(AL), and allogenic bone particles mixed with fibrin glue(FG). These were transplanted into non-union fracture model of 7 adult dogs with 2cm defect made in the proximal metaphysis of both fibulae. The autogenic and allogenic grafting bones had been treated by a modified freeze-dried method. The serial radiogram were observed the repair process of grafted bones biweekly until 17 or 21 weeks after transplantation and the observation of histological aspects, tetracycline double labeling and microradiography in the grafted bones were undertaken at 17 or 21 weeks after transplantation. The incorporation of bone minerals to the non-union fracture models were accomplished in 4 of 5 cases grafted with AL and in 2 of 4 cases grafted with AT. None of 5 cases grafted with FG were incorporated. The process of new bone formation and resorption in the grafted bones were observed three types; resorption of the grafted bones after newbone formation(type A) in 4 cases, new bone formation after resorption(type B) in 2 cases and complete or incomplete resorption without new bone formation(type C) in 8 cases. The modified freeze-dried method used in this study contributed to inhibite the rejection in allogenic grafts but the union period of the grafted freeze-dried bone was more prolonged than that of fresh autografts. Fibrin glue did not contribute to induce a new bone formation ofbone grafts.

• Tuberculosis and Respiratory Diseases
• /
• 제53권6호
• /
• pp.619-634
• /
• 2002

배 경 : Matrix metalloproteinase(MMPs), 특히 주로 염증세포에서 분비되는 MMP-9은 여러 가지 급성폐손상 모델 및 급성호흡곤란증후군 환자에서 증가하고, 최근에는 주기적인 물리적 스트레스가 폐포대식세포 및 결체조직세포에서 MMP-9의 생성 및 활성을 증가시키는 것으로 보고된 바 있다. 따라서 본 연구에서는 기계환기로 인한 백서의 급성폐손상에서 MMP-9의 발현 및 MMP 억제제(MMPI)의 효과에 대해서 연구하고자 하였다. 방 법 : Sprague-Dawley 백서를 적은 일호흡량(tidal volume, $V_T$)과 적절한 호기말양압(positive end-expiratory pressure, PEEP)을 적용한 LVT군과 많은 일호흡량과 PEEP을 적용하지 않은 HVT군 및 동일한 조건에서 MMPI를 투여한 HVT+MMPI의 세 군으로 나누어 실험하였다. MMPI로는 CMT-3(chemically modified tetracycline-3)를 기계환기 3일 전부터 구강으로 투약하였다. 폐손상의 정도는 습건중량비와 급성 폐손상지수로 측정하였고, MMP-9의 발현은 면역조직화학염색으로 고찰하였다. 결 과 : 습건중량비, 급성 폐손상지수 및 MMP-9의 발현이 HVT 군에서 다른 두군에 비하여 유의하게 높았고(p<0.05), HVT+MMP군에서 HVT군에 비하여 폐손상의 정도 및 MMP-9의 발현이 현저하게 낮았다(p<0.05). 결과적으로 MMPI의 투여가 MMP-9의 발현을 저하시킴으로써 기계환기로 인한 폐손상의 정도를 유의하게 감소시키는 것으로 관찰되었다 결 론 : 많은 일호흡량과 PEEP을 적용치 않은 기계환기는 폐조직에서 MMP-9의 발현을 유의하게 증가시켜 폐손상을 유발하고, MMPI는 MMP-9의 작용을 억제함으로써 기계환기로 인한 폐손상의 정도를 유의하게 감소시키는 것으로 판단된다.

• 한국산학기술학회논문지
• /
• 제12권11호
• /
• pp.4951-4958
• /
• 2011

본 연구에서는 전 세계적으로 표준화된 전통적 항균제 감수성 검사방법인 CLSI(C linical and Laboratory Standards Institute)디스크 확산법과 디스크 확산법을 이용 해 MIC를 측정할 수 있도록 새롭게 고안된 E-test 방법과 최근 도입된 미량 액체 배지 희석법을 이용한 항균제 감수성 검사 자동화 장비인 MicroScan MICroSTR EP plus panel를 이용한 MIC 측정방법들의 일치도를 비교하여 MicroScan MICroS TREP plus panel 검사방법의 유용성을 관찰하고자 하였다. 대상균주는 2009년 2월부터 8월까지 6개월 동안 대전의 한 대학병원 임상환자에서 분리된 폐렴사슬알균 53균주와 알파용혈 사슬알균 51균주를 대상으로 하였으며 항 균제는 cefotaxime, chloramphenicol, clindamycin, erythromycin, levofloxacin, penicillin, tetracycline, trimethoprim/sulfamethoxazole, vancomycin 등 9가지 항균제를 평가 대상으로 하였다. 폐렴사슬알균 뿐만 아니라 알파용혈 사슬균에 대해서도 비교분석을 하였고 그 결과 알파용혈 사슬균에 대해 높은 일치율이 관찰되어 임상미생물 검사실에서 신속 정확한 최소발율 억제농도를 측정하는데 많은 도움이 되리라 생각된다.