Perchlorate (${ClO_4}^-$) is an emerging contaminant found in surface water and soil/groundwater. Microbial removal of perchlorate is the method of choice since perchlorate-reducing bacteria (PRB) can reduce perchlorate to harmless end-products. A previous study [3] showed experimental evidence of autotrophic perchlorate removal using elemental sulfur granules and activated sludge. The granular sulfur is a relatively inexpensive electron donor, and activated sludge is easily available from a wastewater treatment plant. A batch test was performed in this study to further investigate the effect of various environmental parameters on the perchlorate degradation by sludge microorganisms when elemental sulfur was used as electron donor. Results of the batch test suggest optimum conditions for autotrophic perchlorate degradation by sludge microorganisms. The results also show that sulfur-oxidizing PRB enriched from activated sludge removed perchlorate better than activated sludge. Taken together, this study suggests that autotrophic perchlorate removal using elemental sulfur and activated sludge can be improved by employing optimized environmental conditions and enrichment culture.
[ ${\alpha}$ ]Galactosidase was purified from a culture filtrate of Mortierella sp. by CM-sephadex C-50, and subsequent Sephadex G-100 column chromatography. The final preparation thus obtained showed a single band on SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. The molecular weight was determined to be 56 kDa. $Gal^3Man^4$ ($6^3$-mono-O-${\alpha}$-D-galactopyranosyl-4-O-${\beta}$-D-mannotetraose), $Gal^{2,3}Man_5$ ($6^{2,3}$-di-O-${\alpha}$-D-galactopyranosyl-4-O-${\beta}$-D-mannopentaose), $Gal_2Man_3$ ($6^2$-mono-O-${\alpha}$-D-galactopyranosyl-4-O-${\beta}$-D-mannotriose), $Gal^2Man_6$ ($6^2$-mono-O-${\alpha}$-D-galactopyranosyl-4-O-${\beta}$-D-mannohexaose) and $Gal^2Man_5$ ($6^2$-mono-O-${\alpha}$-D-galactopyranosyl-4-O-${\beta}$-D-mannopentaose), prepared from 3 types of microbial ${\beta}$-mannnanase, were used as substrates. $Gal^3Man_4$ and $Gal^2Man_3$ had a stubbed ${\alpha}$-galactosyl residue on the $2^{nd}$ and $3^{rd}$ mannose from the reducing end of mannotetraose and mannotriose, thus ${\alpha}$-galactosidase showed a preference for stubbed ${\alpha}$-galactosyl residue. ${\alpha}$-Galactosidase hydrolyzed $Gal^3Man_4$ more rapidly than $Gal^2Man_3$. However, ${\alpha}$-galactosidase hardly acted on $Gal^{2,3}Man_5$, $Gal^2Man_6$ or $Gal^2Man_5$. The enzyme hydrolyzed melibiose to galactose and glucose, raffinose to galactose and sucrose, and also stachyose to galactose and raffinose.
A diesel-degrading bacterium, Gordonia sp. SD8, was isolated from soil contaminated with petroleum, and its diesel degradation was characterized in a soil as well as a liquid culture system. SD8 could grow in the mineral salt medium supplemented with diesel as a sole carbon and energy source. The maximum specific growth rate ($0.67{\pm}0.05\;d^{-1}$) and diesel degradation rate ($1,727{\pm}145$ mg-TPH $L^{-1}\;d^{-1}$) of SD8 showed at 20,000 mg-TPH $L^{-1}$ and $30^{\circ}C$, and then this bacterium could degrade high strength of diesel of 40,000 mg-TPH $L^{-1}$. The residual diesel concentration in the inoculated soil with SD8 was 3,724 mg-TPH kg-dry $soil^{-1}$ after 17 days, whereas the diesel concentration in the non-inoculated soil was $8,150{\pm}755$ mg-TPH kg-dry $soil^{-1}$. These results indicate that Gordonia sp. SD8 can serve as a promising microbial resource for the bioremediaion of contaminated soil with petroleum hydrocarbons including diesel.
Growth curves of Listeria monocytogenes in modified surimi-based imitation crab (MIC) broth were obtained by measuring cell concentration in MIC broth at different culture conditions [initial cell numbers, $1.0{\times}10^{2},\;1.0{\times}10^{3}\;and\;1.0{\times}10^{4}$, colony forming unit (CFU)/mL; temperature, 15, 20, 25, 37, and $40^{\circ}C$] and applied to Gompertz model to determine microbial growth indicators, maximum specific growth rate constant (k), lag time (LT), and generation time (GT). Maximum specific growth rate of L. monocytogenes increased rapidly with increasing temperature and reached maximum at $37^{\circ}C$, whereas LT and GT decreased with increasing temperature and reached minimum at $37^{\circ}C$. Initial cell number had no effect on k, LT, and GT (p > 0.05). Polynomial and square root models were developed to express combined effects of temperature and initial cell number using Gauss-Newton Algorism. Relative coefficients of experimental k and predicted k of polynomial and square root models were 0.92 and 0.95, respectively, based on response surface model. Results indicate L. monocytogenes growth was mainly affected by temperature and square root model was more effective than polynomial model for growth prediction.
Predictive growth model of Vibrio parahaemolyticus in modified surimi-based imitation crab broth was investigated. Growth curves of V. parahaemolyticus were obtained by measuring cell concentration in culture broth under different conditions ($Initial\;cell\;level,\;1{\times}10^{2},\;1{\times}10^{3},\;and\;1{\times}10^{4}\;colony\;forming\;unit\;(CFU)/mL$; temperature, 15, 25 37, and $40^{\circ}C$; pH 6, 7, and 8) and applying them to Gompertz model. Microbial growth indicators, maximum specific growth rate (k), lag time (LT), and generation time (GT), were calculated from Gompertz model. Maximum specific growth rate (k) of V. parahaemolyticus increased with increasing temperature, reaching maximum rate at $37^{\circ}C$. LT and GT were also the shortest at $37^{\circ}C$. pH and initial cell number did not influence k, LT, and GT values significantly (p>0.05). Polynomial model, $k=a{\cdot}\exp(-0.5{\cdot}((T-T_{max}/b)^{2}+((pH-pH_{max)/c^{2}))$, and square root model, ${\sqrt{k}\;0.06(T-9.55)[1-\exp(0.07(T-49.98))]$, were developed to express combination effects of temperature and pH under each initial cell number using Gauss-Newton Algorism of Sigma plot 7.0 (SPSS Inc.). Relative coefficients between experimental k and k Predicted by polynomial model were 0.966, 0.979, and 0.965, respectively, at initial cell numbers of $1{\times}10^{2},\;1{\times}10^{3},\;and\;1{\times}10^{4}CFU/mL$, while that between experimental k and k Predicted by square root model was 0.977. Results revealed growth of V. parahaemolyticus was mainly affected by temperature, and square root model showing effect of temperature was more credible than polynomial model for prediction of V. parahaemolyticus growth.
Ku, Kyojin;Park, Inah;Kim, Doyeon;Kim, Jeongah;Jang, Sangwon;Choi, Mijung;Choe, Han Kyoung;Kim, Kyungjin
Molecules and Cells
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v.43
no.3
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pp.276-285
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2020
Circadian rhythm is an endogenous oscillation of about 24-h period in many physiological processes and behaviors. This daily oscillation is maintained by the molecular clock machinery with transcriptional-translational feedback loops mediated by clock genes including Period2 (Per2) and Bmal1. Recently, it was revealed that gut microbiome exerts a significant impact on the circadian physiology and behavior of its host; however, the mechanism through which it regulates the molecular clock has remained elusive. 3-(4-hydroxyphenyl)propionic acid (4-OH-PPA) and 3-phenylpropionic acid (PPA) are major metabolites exclusively produced by Clostridium sporogenes and may function as unique chemical messengers communicating with its host. In the present study, we examined if two C. sporogenes-derived metabolites can modulate the oscillation of mammalian molecular clock. Interestingly, 4-OH-PPA and PPA increased the amplitude of both PER2 and Bmal1 oscillation in a dose-dependent manner following their administration immediately after the nadir or the peak of their rhythm. The phase of PER2 oscillation responded differently depending on the mode of administration of the metabolites. In addition, using an organotypic slice culture ex vivo, treatment with 4-OH-PPA increased the amplitude and lengthened the period of PER2 oscillation in the suprachiasmatic nucleus and other tissues. In summary, two C. sporogenes-derived metabolites are involved in the regulation of circadian oscillation of Per2 and Bmal1 clock genes in the host's peripheral and central clock machineries.
MicroRNAs (miRNAs) are abundant in bovine milk and milk derived from other livestock, and they have functional roles in infants and in the secretion process of mammary glands. However, few studies have evaluated miRNAs in dairy processes, such as during cheese making and ripening. Thus, we investigated the characteristics of milk-derived miRNAs during the manufacturing and ripening of Camembert cheese as well as the microbiota present using the quantitative reverse transcription polymer chain reaction (RT-qPCR) and 16S rRNA pyrosequencing, respectively. Pyrosequencing showed that the cheese microbiota changed dramatically during cheese processing, including during the pasteurization, starter culture, and ripening stages. Our results indicated that the RNA contents per $200mg/200{\mu}l$ of the sample increased significantly during cheese-making and ripening. The inner cheese fractions had higher RNA contents than the surfaces after 12 and 22 days of ripening in a time-dependent manner (21.9 and 13.2 times higher in the inner and surface fractions than raw milk, respectively). We performed a comparative analysis of the miRNAs in each fraction by RT-qPCR. Large amounts of miRNAs (miR-93, miR-106a, miR-130, miR-155, miR-181a, and miR-223) correlated with immune responses and mammary glands were present in aged cheese, with the exception of miR-223, which was not present on the surface. Considerable amounts of miRNAs were also detected in whey, which is usually disposed of during the cheese-making process. Unexpectedly, there were no significant correlations between immune-related miRNAs and the microbial populations during cheese processing. Taken together, these results show that various functional miRNAs are present in cheese during its manufacture and that they are dramatically increased in amount in ripened Camembert cheese, with differences according to depth.
Journal of Korean Society of Occupational and Environmental Hygiene
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v.27
no.1
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pp.70-76
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2017
Objectives: This on-site study was performed to evaluate the reduction efficiency of an air cleaner on particulate matters and biological agents in a swine facility. Materials and Methods: Particulate matter was measured using a real-time monitoring recorder and biological agents were sampled with a one-stage impactor and then analyzed based on the microbial culture method. An experimental process for the reduction effect on airborne pollutants through air cleaner operation consisted of three conditions: no treatment, wet scrapper by water spray and wet scrapper by disinfectant spray. Results: Geometric mean levels of particulate matter(TSP, $PM_{10}$, $PM_{2.5}$ and $PM_1$) were presented at $1,608{\mu}g/m^3$, $1,373.8{\mu}g/m^3$, $401.8{\mu}g/m^3$ and $144.5{\mu}g/m^3$ for no treatment; $1,503{\mu}g/m^3$, $1,017{\mu}g/m^3$, $159.4{\mu}g/m^3$ and $69.8{\mu}g/m^3$ for wet scrapper by water spray; and $1,222.17{\mu}g/m^3$, $477.17{\mu}g/m^3$, $33.2{\mu}g/m^3$ and $11.1{\mu}g/m^3$ for wet scrapper by disinfectant spray, respectively. In the case of biological agents, the geometric averaged concentrations of total airborne bacteria and fungi were as follows: $45,371cfu/m^3$ and $13,474cfu/m^3$ for no treatment, $43,286cfu/m^3$ and $8,610cfu/m^3$ for wet scrapper by water spray, and $2,440cfu/m^3$ and 1,867 cfu/ for wet scrapper by disinfectant spray, respectively. Regardless of particulate matter and biological agent, the highest concentrations were found for no treatment, while the lowest concentrations were found with wet scrapper by disinfectant spray. Conclusions: Based on the results obtained from this on-site evaluation, there was a significant reduction effect on particulate matter and biological agents through the application of an air cleaner in this study.
Kim, A-Reum;Jeong, Moon-Jin;Ahn, Yong-Soon;Kim, Mi-Na;Kim, Sung-Im;Lim, Do-Seon
Journal of dental hygiene science
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v.15
no.2
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pp.209-219
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2015
In order to explore an effect of interaction of Streptococcus gordonii, Fusobacterium nucleatum and Porphyromonas gingivalis that are bacteria relevant to periodontal disease on its growth, the bacteria were incubated in trypticase soy hemin menadione broth at $37^{\circ}C$$CO_2$ incubator for 7 days through anaerobic jar by single and co-culture with heat treated dead bacteria under anaerobic gas pack. In order to confirm growth level, absorbance was measured and for confirming colony structure and form, it was observed with scanning electron microscope. In order to confirm an effect on pathogenicity of P. gingivalis, real time reverse transcriptase polymerase chain reaction was implemented for expression analysis for rgpA gene that produces HRgpA which is gingipain. As a result, the following conclusion was obtained. Colony formation of S. gordonii and P. gingivalis was increased by other dead bacteria and in case of F. nucleatum, its colony formation was showed an aspect of being increased by dead bacterium of P. gingivalis but decreased by dead bacterium of S. gordonii. Therefore, it is considered that the strains being used for this study would affect interactively through bacterial cell itself as well as their interaction factor at the time of colony formation.
Kim, Beom-Geun;Khirul, Md Akhte;Kwon, Sung-Hyun;Cho, Dae-Chul
Korean Journal of Environment and Ecology
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v.33
no.5
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pp.596-604
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2019
This study conducted a sediment culture experiment to investigate the effects of sediment oxygen demand (SOD) and environmental factors on sediment and water quality. We installed a leaching tank in the laboratory, cultured it for 20 days, and analyzed the relationship between P and Fe in the sediment. As a result, the dissolved oxygen of the water layer decreased with time, while the oxidation-reduction potential of the sediment progressed in the negative direction to form an anaerobic reducing environment. The SOD was measured to be 0.05 mg/g at the initial stage of cultivation and increased to 0.09 mg/g on the 20th day, indicating the tendency of increasing consumption of oxygen by the sediment. The change is likely to have caused by oxygen consumption from biological-SOD, which is the decomposition of organic matter accumulated on the sediment surface due to the increase of chl-a, and chemical-SOD consumed when the metal-reducing product produced by the reduction reaction is reoxidized. The correlation between SOD and causality for sediment-extracted sediments was positive for Ex-P and Org-P and negative for Fe-P. The analysis of the microbial community in the sediment on the 20th day showed that anaerobic iron-reducing bacteria (FeRB) were the dominant species. Therefore, when the phosphate bonded to the iron oxide is separated by the reduction reaction, the phosphate is eluted into the water to increase the primary productivity. The reduced substance is reoxidized and contributes to the oxygen consumption of the sediment. The results of this study would be useful as the reference information to improve oxygen resin.
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