• Applied Biological Chemistry
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• 제40권1호
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• pp.30-33
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• 1997

환경친화형 생물농약개발을 위한 방안의 일환으로, 벼별구 등 농해충병원사상균 Metarhizium anisopliae의 분자생물학적 육종을 위해 영양요구성 돌연변이를 상보하는 선택유전자, ura5 (Orotate phosphoribosyl transferase)를 cloning하였다. Cloning방법으로는 기존에 알려진 사상균의 ura5 유전자들간에 확인된 상보성 염기배열을 합성하여, 이것을 primer로 사용하여 PCR기법에 의해 부분적으로 cloning하였다 또한, PCR기법에 의해cloning된 uras유전자단편의 염기배열을 결정한 결과, Trichoderma resei의 ura5유전자와는 아미노산수준에서 약 85%의 상동성을 나타내었으며, 이 단편을 이용하여 Metarhizium anisopliae의 genomic library로 부터 ura5유전자가 포함된 약 4.4 kb의 DNA단편을 cloning 하였다.

• 농약과학회지
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• 제2권2호
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• pp.90-96
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• 1998

곤충 병원균을 미생물 살충제로서 이용하기 위한 대량배양 기술을 확립코자 미생물 살충제로 잠재성이 있는 Metarhizium anisopliae var. majus ARS 978의 대량배양을 위해 액체배양 조건을 확립하였다. 최적배양을 위한 온도와 pH는 각각 $28^{\circ}C$와 pH 7.0 이었다. M. anisopliae ARS 978의 균체량, 효소들의 활성 및 포자의 생성에 1.0 %(v/v) molasses, 1.0%(w/v) 주박, 0.3 %(w/v) $CaCO_{3}$가 가장 적합한 최적배지 조건이었다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제9권3호
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• pp.334-339
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• 1999

More innovative molecular markers were investigated for rapid and consistent differentiation of Metarhizium anisopliae var. majus from M. anisopliae var. anisopliae. A total of 28 isolates were obtained from various countries and hosts: 13 isolates of M. anisopliae var. anisopliae, 12 isolates of M. anisopliae var. majus, and 3 isolates of M. anisopliae collected in Korea. This study involved restriction enzyme digestions of a PCR product amplified from nuclear internally transcribed spacer (ITS) and a portion of the 28S rDNA regions. Among 11 different restriction enzymes used in this study, MboⅠ digestion particularly produced a restriction pattern that had characteristics of M. anisopliae var. majus. This restriction pattern was consistent in all isolates of M. anisopliae var. majus regardless of their geographic origins and insect hosts. Mapping experiments revealed that MboⅠ sites of M. anisopliae var. majus are identical to those of M. anisopliae var. anisopliae with an exception for the presence of an additional site in the PCR product. Results from this study provide an additional method for identification and differentiation of isolates of these two varieties of M. anisopliae for use in the field and laboratory experiments.

• 아시안잔디학회지
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• 제11권3호
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• pp.185-191
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• 1997

Biological control of turfgrass insect pest Blitopertha orientalis, forest insect pests, Agelastica coerulea, Meganola melancholia, and Glyphodes perspectalis,vegetable insect pests, Plutella xylostella and Agrotis segetum were conducted with entonopathogenic fungus, Metarhizium anisopliae J-22 isolated from black pine forest soil in Cheju province. Mortality of B. orientalis larvae was 53.3% at the rate of 3.4 $\times$ 1O 7 conidia /ml. A. coerulea and M melancholia larvae showed 100% mortalities at 9.6 $\times$ 106 conidia /ml and 2.7 $\times$ 10 7 conidia /ml as well. However, G. perspectalis larvae were not dead even at 4$\times$ 1O 7 conidia /ml. On the other hand, M anisopliae J-22 was effective against P. xylostella larvae showing 100% mortality at 4 $\times$ 10 7 conidia /ml. KEy words:Entomopathogenic fungi, Biological control, Metarhizium anisopliae, Pathogenicity,Blitopertha orientalis, Agelastica coerulea, Meganola melancholia, Glyphodes perspectalis,Plutella xylostella, Agrotis segetum.

• Applied Biological Chemistry
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• 제41권3호
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• pp.219-223
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• 1998

작물 병해충에 대한 무공해 미생물 농약 개발의 일환으로 곤충 병원성 곰팡이 Metarhizium anisopliae의 분자생물학적 육종을 위해 이 균주의 형질전환계를 확립하였다. M. anisopliae의 원형질체를 제작하여 benomyl 약제에 대하여 저항성을 나타내는 Aspergillus flavus 유래의 ${\beta}-tubulin$ 유전자를 갖는 pBRG-4 plasmid DNA를 polyethylene glycol 방법으로 형질 전환하였다. 이 형질전환은 pBRG-4 DNA $50\;{\mu}g$당 10개의 효율로 이루어졌으며, 그 결과 야생형 균주들의 $2.5\;{\mu}g/ml$ 농도의 benomyl 존재 하에서도 성장이 억제되는데 반하여 선발된 형질전환체들은 $5.0\;{\mu}g/ml$ 농도의 benomyl 함유 배지에서도 잘 성장하였다. 또한 이 형질전환체들의 chromosomal DNA를 분리하여 Southern 분석한 결과 ${\beta}-tubulin$ 유전자가 homologous recombination에 의하여 M. anisopliae의 genome속에 삽입 되었음을 확인하였다.

• 한국응용곤충학회지
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• 제36권2호
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• pp.179-184
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• 1997

농약이 한국산 곤충병원성곰팡이 Beauveria bassiana와 Metarhizium anisopliae에 미치는 영향을 알아본 결과, SMAY배지상에서의 농약농도에 따른 곰팡이 포자형성수는 metalaxyl과 tolclofos-methyl 처리에서는 대조구와 큰 차이가 없었으나. fenitrothion과 mepronil 처리에서는 권장량의 $\frac{1}{2}$배 처리에서도 포자형성이 미약하였다. 농약과의 동시 처리가 곤충병원성 곰팡이에 미치는 영향을 알아보기 위하여 농약희석액에 병원성 곰팡이를 1-5시간 동안 침지시켜 병원성을 알아본 결과 전 약종에서 100%의 병원성을 나타내었다. 배추밭에서 농약전처리가 M. anisopliae의 병원성에 끼치는 영향을 알아본 결과는 Bt나 teflubenzuron, metalaxyl, carbofuran 처리구는 대조구와 병원성에서 차이를 보이지 않았으나 alachlol 처리구에서는 병원성이 80% 이하로 떨어졌다. 잔디밭에서 농약의 후처리가 병원성곰팡이의 병원성과 지속성에 미치는 영향을 알아본 바 iprodione+thiram과 tolclofos-methyl 처리구에서는 4달째까지 병원성이 지속되었고 fenitrothion처리구에서는 3개월 후부터 B. bassiana와 M. anisopliae의 병원성이 상실되었으며 mepronil처리구에서는 M. anisopliae가 병원성을 상실하였다.

• 한국균학회지
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• 제24권1호통권76호
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• pp.49-55
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• 1996

살충성진균 Metarhizium anisopliae가 시들음병을 일으키는 Fusarium oxysporum, 잿빛곰팡이 병을 일으키는 Botrytis cinerea, 겹둥근무늬병을 일으키는 Alternaria solani 등에 대하여 항진균활성을 갖는지 알아보았다. 그 결과 Plate상에서 균사생장저해 실험과 inhibition rate실험을 했을 때 항진균활성이 검정되었으며 또한 YPD배지에서 배양된 M. anisopliae로부터 얻은 배양여액을 식물병원균에 30%농도로 첨가했을 때 이들의 포자발아율은 B. cinerea, F. oxysporum에서 각각 21.5%(control: 88.2%), 53.0%(control: 78.6%)로 감소하였으며 발아개시 시간도 8시간 정도 지연되었다. 또한 현미경을 통한 미세구조관찰에서는 10% 배양여액을 첨가했을 때 F. oxysporum의 균사로부터 후막포자가 생성되고 생장저해가 일어나는 것이 확인되었다. 이상의 결과로부터 M. anisopliae의 항진균활성은 fungistatic effect를 나타냄을 알 수 있었다.

• 생태와환경
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• 제53권1호
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• pp.73-79
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• 2020

Metarhizium anisopliae (녹강균)는 흰점박이꽃무지에게 질병을 일으키는 곤충 병원성 곰팡이 중 하나이다. 이러한 곰팡이의 병원성은 환경 조건에 의해 영향을 받는다. 녹강균에 대한 흰점박이꽃무지 유충의 민감성을 알기 위해 온도(20℃, 25℃, 30℃), 상대습도(RH 40%, 50%, 60%, 70%), 톱밥 수분함량(40%, 50%, 60%)이 다른 사육 조건에서 유충의 치사율을 확인하였다. 녹강균을 처리한 흰점박이꽃무지 유충의 치사율은 온도에 따라 차이가 나타나지 않았으나, 낮은 상대습도(RH 40%)와 톱밥 수분함량(40%)에서 유충의 치사율이 높았다. 녹강균에 대한 1령, 2령, 3령 유충의 치사율은 1령에서 가장 높게 나타났다.

• 농약과학회지
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• 제18권4호
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• pp.417-421
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• 2014

난방제 해충인 파밤나방의 친환경적 방제를 위하여 토양에서 곤충병원성 곰팡이를 수집한 다음, 파밤나방 유충에 대해 우수한 방제효과가 있는 곰팡이 Metarhizium anisopliae FT83을 분리하여 파밤나방의 생육단계별 살충율을 검정하였다. M. anisopliae FT83의 파밤나방 1령~3령 유충에 대한 살충율은 $1{\times}10^8conidia/ml$ 수준에서 100%이었고 반수치사시간은 0.5일, 2.6일, 2.5일이었으며 4령과 5령에 대한 살충율은 각각 $83.3{\pm}6.2%$, $86.0{\pm}5.7%$였으며 반수치사시간은 4.2일, 3.6일이었다. 번데기와 알에 대한 살충율도 100%로 파밤나방의 전 생육단계에 대해 높은 살충활성을 나타내었다.

• Mycobiology
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• 제40권2호
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• pp.111-116
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• 2012

Ten strains of the entomopathogenic fungi Metarhizium anisopliae and Beauveria bassiana were evaluated to find the most effective strain for optimization studies. The first criterion tested for strain selection was the mortality (> 50%) of Spodoptera litura larvae after inoculation of the fungus for 4 days. Results on several bioassays revealed that B. bassiana BNBCRC showed the most virulence on mortality S. litura larvae (80% mortality). B. bassiana BNBCRC also showed the highest germination rate (72.22%). However, its conidia yield ($7.2{\times}10^8$ conidia/mL) was lower than those of B. bassiana B 14841 ($8.3{\times}10^8$ conidia/mL) and M. anisopliae M6 ($8.2{\times}10^8$ conidia/mL). The highest accumulative radial growth was obtained from the strain B14841 (37.10 mm/day) while the strain BNBCRC showed moderate radial growth (24.40 mm/day). M. anisopliae M6 possessed the highest protease activity (145.00 mU/mL) while M. anisopliae M8 possessed the highest chitinase activity (20.00 mU/mL) during 96~144 hr cultivation. Amongst these criteria, selection based on virulence and germination rate lead to the selection of B. bassiana BNBCRC. B. bassiana B14841 would be selected if based on growth rate while M. anisopliae M6 and M8 possessed the highest enzyme activities.