• 한국미생물·생명공학회지
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• 제20권3호
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• pp.280-288
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• 1992

Serratia marcescens ATCC 21074 균주가 세포밖으로 분비하는 metalloprotease 유전자를 대장균으로 클로닝하고 그 발현을 살펴보았다 Serratia marcescens ATCC 21074 균주의 염색체 DNA를 제한효소 HindIII로 절단하고 아가로스 전기영동 후 32P로 표지된 합성 oligonucleotide를 사용하여 southern hybridization한 결과 4.0Kb의 DNA 절편에 metalloprotease가 존재함을 알 수 있었다. 4.0Kb 염색체 DNA 절ㅊ편을 분리하여 pUC19에 연결한 후 대장균으로 transformation하였다.

• BMB Reports
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• 제32권3호
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• pp.306-310
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• 1999

The partial cDNA of the MT-c clone encoding snake venom metalloprotease was subcloned and expressed in E. coli. The expressed metalloprotease was purified by affinity chromatography in the presence of urea, and then successfully refolded into its functional form, retaining metalloprotease activity that hydrolyzes fibrinogen. The simple and convenient refolding strategy established in this work was highly efficient in recovering the recombinant enzyme activity. Experimental evidence suggests that the C-terminal amino acid stretch of 16 residues is a critical sequence for proper folding of the metalloprotease domain.

• 한국어병학회지
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• 제10권1호
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• pp.31-38
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• 1997

잉어로부터 분리한 Aeromonas hydrophila는 세포 밖으로 여러 종류의 proteases를 생산한다. A. hydrophila의 배양 상층액을 이용한 inhibitor assay를 통하여, 주된 활성을 나타내는 metallopretease와 약한 활성을 나타내는 serine protease가 있음을 알게 되었다. Gelatin SDS-PAGE를 통하여 두 개의 활성 band가 관찰되었으며, 이 들 중 넓게 퍼진 band는 metalloprotease에 특이하게 작용하는 inhibitor인 EDTA에 의해 활성이 상실되었고 따라서 metalloprotease임을 알 수 있었다. 다른 하나는 serine protease에 특이하게 반응하는 inhibitor인 PMSF에 의해 저해되어 serine protease임을 알 수 있었다. 이러한 두 extracellular protease의 활성은 $75^{\circ}C$에서 30 분간 열을 가한 후에도 Gelatin SDS-PAGE상에 남아있었다. 그런데, 주된 metalloprotease는 Sephadex G-75를 이용한 column chromatography를 거친 후 Gelatin Gel상에서 두 개의 band로 분리되었다.

• Journal of Acupuncture Research
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• 제24권2호
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• pp.231-239
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• 2007

Objectives : This study was designed to investigate the relation between the matrix metalloprotease-1 gene polymorphism and facial nerve palsy in Korean population. Methods : This study was carried out on 102 facial nerve palsy patients who were treated with oriental medicine therapy at the department of acupuncture & moxibustion, hospital of Oriental medical college, Daegu Hanny University and 104 healthy control subjects. Blood samples from all subjects were obtained for DNA extraction. We have investigated the genotyping of matrix metalloprotease-1 by using Pyrosequencing. Results : The genotypes of matrix metalloprotease-l gene were G/G homozygotes, A/G heterozygotes and A/A homozygotes. There was no significant difference between the control and facial nerve palsy groups. Conclusion: We concluded that there was no significant association between matrix metalloprotease-1 gene polymorphism and facial nerve palsy in Korean population. However, the findings of this study need to be confirmed in more patients and further studies.

• 미생물학회지
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• 제30권2호
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• pp.71-77
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• 1992

Serratia marcescens ATCC 21074 의 세포배양액으로 부터 순수분리한 metalloprotease 의 자가분해성 및 안정성과 관련된 몇가지 효소적 특성을 조사하였다. 최적 반응온도와 pH 는 각각 37.deg.C, pH 8.0 였으며 안정성은 pH 5.0-11.0 범위에서, 온도의 경우 10-37.deg.C 에서 비교적 안정한 것으로 나타냈다. Differential scanning calorimeter 로 이효소의 열적 성질을 분석한 결과 변셩 시작 온도는 37.6 .deg.C, endothermic peak 온도는 43.2 .deg.C, enthaply 변화량은 -8.4 mJ/mg 이었다. 이 효소는 30.deg.C 에서 24 시간 동안 거의 자가분해가 일어나지 않았으나 변성된 단백질의 셩우 쉽게 자가분해되는 것으로 나타났다. 또한 이효소는 trypsin, .alpha.-chymotrypsin, elastase 에 의해서 분해되지 않았으나 분해되지 않았으나 thermolysin 에 의해서는 쉽게 분해되었다.

• Mycobiology
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• 제32권2호
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• pp.74-78
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• 2004

An alkaline protease produced by Aspergillus niger C-15 was purified and characterized. The enzyme was purified 19.41-fold with a specific activity of 74150 U/mg and a recovery of 34.4% by gel filtration and ion exchange chromatography. The molecular weight of the enzyme was estimated to be 34 kDa. The optimum pH and temperature for the protease activity were pH 8.0 and $60^{\circ}C$, respectively. The enzyme activity inhibited by EDTA suggests that the preparation contains a metalloprotease. The enzyme activity of the metalloprotease was completely inhibited by 5 mM $HgCl_2$ and $FeCl_3$, while partially inhibited by $CuSO_4$, and $MnCl_2$. When polyols such as glycerol, mannitol, sorbitol and xylitol, were added to the reaction medium, most polyols tested enhanced protease activity. Especially, glycerol showed the highest effect. The alkaline metalloprotease was stable at high temperature and retained more than 90% of the initial activity at $60^{\circ}C$ and 86.4% under addition of glycerol.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제36권1호
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• pp.6-11
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• 2008

방사선 조사 후에 생존한 병원성 미생물의 안정성을 연구하기 위하여 패혈증을 일으키는 Vibrio vulnificus ATCC 29307의 병원성 인자인 metalloprotease (vvp) 유전자의 발현과 효소 활성의 변화를 감마선 조사 후에 시간대별로 확인하였다. V. vulnificus는 다른 병원성 미생물들에 비하여 비교적 높은 방사선 감수성을 보였으며 방사선 조사 직후 유도기를 거친 후에 성장이 다시 시작되었다. 감마선을 조사하였을 경우 vvp 유전자의 발현은 비조사구에 비하여 $3{\sim}6$시간 정도 빨리 유도되었으나 총 metalloprotease의 활성은 감소하였다. 또한, vvp 유전자의 발현이 최대로 증가한 시점에서 metalloprotease의 활성을 비교한 결과 감마선이 조사된 균의 경우 감마선이 조사되지 않은 균에 비하여 약 $70{\sim}80%$ 수준으로 생산량이 감소하는 것을 알 수 있었다. 결론적으로, 감마선 조사 후 생존한 Vibrio vulnificus에서 병원성 인자 (vvp)의 발현 및 활성은 증가하지 않았으며 본 연구결과는 감마선 조사 식품의 미생물학적 안정성을 보여주는 기초 자료중의 하나로 활용될 수 있을 것으로 판단된다.

• Bulletin of the Korean Chemical Society
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• 제32권spc8호
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• pp.3113-3116
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• 2011

• 대한견주관절학회:학술대회논문집
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• 대한견주관절학회 2008년도 제16차 학술대회
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• pp.11-12
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• 2008

• 대한수의학회지
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• 제55권3호
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• pp.175-179
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• 2015

Proteases play important roles in parasite development and host parasite interactions. The protease of Kudoa spp. has been recognized as a key factor of severe proteolysis of fish muscle post-mortem; however, there is little information available regarding the protease of Kudoa (K.) septempunctata, which was recently identified as a cause of food poisoning in humans. The present study was conducted to isolate and characterize proteases to elucidate the type of protease contained in the parasite and determine the optimal pH for protease activity. We confirmed the cysteine protease and metalloprotease produced by K. septempunctata. While the cysteine protease showed optimal activity at pH 5 that decreased rapidly with increasing pH, the optimal activity of metalloprotease was pH 7, and it remained stable from pH 6 to pH 8. These results indicate that the pH of cysteine protease is not proper for fish muscle postmortem, and that metalloprotease can act in human intestines. Overall, the present study provides important information that improves our understanding of the role of protease physiology and the subsequent food poisoning caused by K. septempunctata.