To measure the time required for ginseng explants to become determined to form flower buds, we cultured zygotic embryos, seedlings, and cotyledonary nodes on MS medium supplemented with BA and GA$_3$of 5 ${\mu}$M each (flower inducing medium, FIM) for various periods and transferred to the basal medium. The explants required a minimum of 10 days on FIM to be determined. Histological observations revealed that the axillary meristem to be fated to develop into flower bud remained in a state of shoot meristem during the first 10 days of culture and differentiated into flower bud after 15 days of culture. We suggest that the in-vitro flowering system described in this study is useful in investigating (a) regulatory element(s) to cause the phase change from the vegetative to reproductive state by comparing predetermined explants with determined ones at the molecular level.
The experiments were conducted to establish the in vitro culture system of apple rootstock M.9. The meristem tissue of M.9 were pre-treated in antiox: dant solution containing 100 mgL$^{-1}$ ascorbic acid and 150 mgL$^{-1}$ citric acid for 30 minutes, transferred to the MS liquid medium added with 0.1 mgL$^{-1}$ IBA, 0.5 mgL$^{-1}$ GA, and 30 gL$^{-1}$ sucrose, which shaked by 50 rpm for 2 weeks, and then, cultured in same composition of MS agar medium. This treatment stimulated shooting from the tissue, the most favorably, compared with other treatments. All young shoots produced normal roots when they were shake-cultured on the 1/2MS liquid medium added with 0.5 mgL$^{-1}$ IBA, 30 gL$^{-1}$ sucrose and 1,000 times diluted solution of Hormex by 50 rpm for one week, and subsequently transferred to the 8 gL$^{-1}$ agar medium of the same composition as pre-culture medium minus Hormex.
Jun, Sang Eun;Cho, Kiu-Hyung;Hwang, Ji-Young;Abdel-Fattah, Wael;Hammermeister, Alexander;Schaffrath, Raffael;Bowman, John L.;Kim, Gyung-Tae
Molecules and Cells
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v.38
no.3
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pp.243-250
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2015
Patterning of the polar axis during the early leaf developmental stage is established by cell-to-cell communication between the shoot apical meristem (SAM) and the leaf primordia. In a previous study, we showed that the DRL1 gene, which encodes a homolog of the Elongator-associated protein KTI12 of yeast, acts as a positive regulator of adaxial leaf patterning and shoot meristem activity. To determine the evolutionally conserved functions of DRL1, we performed a comparison of the deduced amino acid sequence of DRL1 and its yeast homolog, KTI12, and found that while overall homology was low, well-conserved domains were presented. DRL1 contained two conserved plant-specific domains. Expression of the DRL1 gene in a yeast KTI12-deficient yeast mutant suppressed the growth retardation phenotype, but did not rescue the caffeine sensitivity, indicating that the role of Arabidopsis Elongator-associated protein is partially conserved with yeast KTI12, but may have changed between yeast and plants in response to caffeine during the course of evolution. In addition, elevated expression of DRL1 gene triggered zymocin sensitivity, while overexpression of KTI12 maintained zymocin resistance, indicating that the function of Arabidopsis DRL1 may not overlap with yeast KTI12 with regards to toxin sensitivity. In this study, expression analysis showed that class-I KNOX genes were downregulated in the shoot apex, and that YAB and KAN were upregulated in leaves of the Arabidopsis drl1- 101 mutant. Our results provide insight into the communication network between the SAM and leaf primordia required for the establishment of leaf polarity by mediating histone acetylation or through other mechanisms.
This experiment was designed to improve the in vitro production system of apple rootstock M.26 as being influenced by the growth regulators, TDZ, BA, IAA, IBA, zeatin, and GA$_3$. Different levels of potassium humate (KH), known as cytokinin and auxin-like substance, were also supplemented to the MS basal medium along with IBA 0.6 mg/L to find out it effect on root formation in apple rootstock M.26. ID initiate and establish the in vitro multiplication of shoots byway of meristem culture, MS medium added with zeatin 1.0 mg/L was found to be the most suitable, showing the 100% of survival rate of shoot tips. A combination of thidiazuron (TDZ) 0.2 mg/L and NAA 0.5 mg/L promoted the shoot proliferation when shoot tips were used as explants. MS basal medium plus IBA 0.6 mg/L was very effective for root induction, but an addition of potassium humate (250 mg/L) to the medium containing IBA 0.6 mg/L stimulated the induction and proliferation of the rook by far the better.
Leaves are indeterminate organs and possess a lot of genes which is involved in establishing leaf polarities. These polarities are regulated relatively early during leaf development and defined relative to the factors intrinsic to the primordia and interactions with the shoot apical meristem (SAM). Recently, several genes that control the polarity of lateral organs have been identified. Our genetic study of deformed root and leaf1 (drl1) mutant, which produces narrow, filament‐like leaves and defective meristems, revealed that DRL1 is involved in the regulation of SAM activity and leaf polarity. The DRL1 gene was found to encode a novel protein showing homology to Elongator‐associate protein (EAP) of yeast KTI12. The amino acid sequence of DRL1 is universally conserved in prokaryotes and eukaryotes. DRL1 and the plant DRL1 homologs clearly formed a monophyletic clade, suggesting the evolutionary conservation of DRL1 homologs was maintained in the genomes of all land plants.
This study was carried out to establish a reproducible culture system for callus formation and adventitious shoot development from young stem segments of Vigna radinta, and histological work for orgin of callus tissue and adventitious shoot. Induction of callus from young stem explants of Vigna radiata was very effective on MS inorganic salts supplemented with 0.5 mg/L 2,4-D and 1.0 mg/L kinetin. For the adventitious shoot regeneration from the callus tissues, the hormone combination of 0.75 mg/L NAA, 1.5 mg/L kinetin and MS salts resulted in about 21% efficiency. Histological examination showed that callus tissues originated from out-growths by callus cambium rings with do novo meristematic activities, which were localized at the outside of the vascular cambium. Adventitious shoots were developed from shoot apical meristem originated from the surface of callus masses. The shoot apical meristem produced leaf primordium, which then became leaf.
When perceiving microbe-associated molecular patterns (MAMPs) or plant-derived damage-associated molecular patterns (DAMPs), plants alter their root growth and development by displaying a reduction in the root length and the formation of root hairs and lateral roots. The exogenous application of a MAMP peptide, flg22, was shown to affect root growth by suppressing meristem activity. In addition to MAMPs, the DAMP peptide PEP1 suppresses root growth while also promoting root hair formation. However, the question of whether and how these elicitor peptides affect the development of the vascular system in the root has not been explored. The cellular receptors of PEP1, PEPR1 and PEPR2 are highly expressed in the root vascular system, while the receptors of flg22 (FLS2) and elf18 (EFR) are not. Consistent with the expression patterns of PEP1 receptors, we found that exogenously applied PEP1 has a strong impact on the division of stele cells, leading to a reduction of these cells. We also observed the alteration in the number and organization of cells that differentiate into xylem vessels. These PEP1-mediated developmental changes appear to be linked to the blockage of symplastic connections triggered by PEP1. PEP1 dramatically disrupts the symplastic movement of free green fluorescence protein (GFP) from phloem sieve elements to neighboring cells in the root meristem, leading to the deposition of a high level of callose between cells. Taken together, our first survey of PEP1-mediated vascular tissue development provides new insights into the PEP1 function as a regulator of cellular reprogramming in the Arabidopsis root vascular system.
Homeostatic regulation of meristematic stem cells accomplished by maintaining a balance between stem cell self-renewal and differentiation is critical for proper plant growth and development. The quiescent center (QC) regulates root apical meristem homeostasis by maintaining stem cell fate during plant root development. Cell cycle checkpoints, such as anaphase promoting complex/cyclosome/cell cycle switch 52 A2 (APC/CCCS52A2), strictly control the low proliferation rate of QC cells. Although APC/CCCS52A2 plays a critical role in maintaining QC cell division, the molecular mechanism that regulates its activity remains largely unknown. Here, we identified SCFFBS1, a ubiquitin E3 ligase, as a key regulator of QC cell division through the direct proteolysis of CCS52A2. FBS1 activity is positively associated with QC cell division and CCS52A2 proteolysis. FBS1 overexpression or ccs52a2-1 knockout consistently resulted in abnormal root development, characterized by root growth inhibition and low mitotic activity in the meristematic zone. Loss-of-function mutation of FBS1, on the other hand, resulted in low QC cell division, extremely low WOX5 expression, and rapid root growth. The 26S proteasome-mediated degradation of CCS52A2 was facilitated by its direct interaction with FBS1. The FBS1 genetically interacted with APC/CCCS52A2-ERF115-PSKR1 signaling module for QC division. Thus, our findings establish SCFFBS1-mediated CCS52A2 proteolysis as the molecular mechanism for controlling QC cell division in plants.
Shoot apical meristem dome explants from cassava plants (Ghanaian local variety) produced somatic embryos at a frequency of 32% when cultured on MS medium supplemented with 2 mg/L 2,4-D. Somatic embryo segments formed secondary embryos at frequencies of up to 93% when cultured on medium containing 1 mg/L 2,4-D for 2 to 3 weeks. Since the somatic embryos were not capable of converting into plantlets, adventitious shoot were induced from the sliced embryo segments by culturing them on medium containing 0.1 to 5 mg/L BA. After 8 weeks of culture, numerous shoots formed on the segments at frequencies up to 100%. The shoots were rooted and successfully transplanted to potting soil.
The plant Empetrum nigrum, valued in the traditional system of medicine, is well known for its antibacterial, antifungal, and antioxidant properties. In the present work, the effect of removal of shoot apical meristem (SAM) on shoot proliferation was studied. It was observed that removal of SAM promoted shoot proliferation whereas intact tip resulted in higher survival percentage. Further, the effect of different concentrations of BA on above was also studied. During root formation the effect of light quality after treatment with IBA was investigated. For rooting, continuous red light without IBA resulted in maximum rooting percentage. The above factors when taken into consideration during micropropagation of this endangered plant can result in healthier plantlets. The results show that the species could be successfully conserved by in vitro propagation system.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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