Defatted sesame flour is the by-products obtained after oil extracting process. Although this flour has high quality and quantity of protein its use is limited only for animal feed and fertilization. Sesame seeds contain antinutrients such as oxalate, phytate and phenol compounds and these compounds lower their nutritive value. recently, ultrafiltration(UF) has been used to concentrate protein from various food sources. This study was carried out to examine the effects of UF with different membrane pore size on the components of sesame protein concentrates including antinutrients and to compare with that of conventional acid-precipitated sesame protein isolate. The protein contents of sesame protein concentrates prepared by JF using 10K, 30K, 100K were 84.2%, 82.7%, 76.4% and the protein yields were 36.44%, 34.69, 31.43% and the protein contents was 88.7% Alkali extraction process at pH 9.0 followed by UF technique reduced oxalate and phytate content. There were 85% and 94% reduction of oxalate and phytate content by UF with membrane pore size of 100K daltons, respectively. However, the content of total phenol compounds was not reduced by this method. About 99% of calcium and 50% of zinc were removed by UF with membrane of 100K daltons. total essential amino acid contents of sesame protein concentrates prepared by UF were decreased slightly when compared with acid-precipitated sesame protein concentrate.
Voacanga globosa (Blanco), a plant endemic to the Philippines, is traditionally used especially by indigenous people of Bataan in the treatment of ulcers, wounds and tumorous growths. This study aimed to provide scientific evidence to therapeutic properties by determining cytotoxic and pro-apoptotic activity of HPLC fractions from leaves on HCT116 human colon carcinoma and A549 human lung carcinoma cell lines. Ethanolic extraction was performed on V globosa leaves followed by hexane and ethyl acetate partitioning. Silica gel column chromatography and high performance liquid chromatography (HPLC) produced MP1, MP2 and MP3 fractions. Cytotoxic activity of the fractions was determined through MTT assay against the cancer cell lines HCT116 and A549 and the non-cancer AA8 Chinese hamster ovarian cell line. Pro-apoptotic activities of the most active fractions were further assessed through DAPI staining, TUNEL assay and JC-1 mitochondrial membrane potential assay with HCT116 cells. While the MPI fraction exerted no significant activity against all cell lines tested, MP2 and MP3 fractions demonstrated high toxicity against HCT116 and A549 cells. The MP3 fraction induced formation of apoptotic bodies, condensed DNA and other morphological changes consistent with apoptosis of HCT116 cells and TUNEL assay showed significant increase in DNA fragmentation over time. In these cells, the MP3 fraction also induced mitochondrial membrane destabilization, which is generally associated with the beginning of apoptosis. Phytochemical analysis demonstrated the presence only of saponins and terpenoids in the MP3 fraction. The results indicate that the MP3 fraction exerts cytotoxic activity on HCT116 cells via induction of apoptosis triggered by loss of mitochondrial membrane potential crucial for cell survival.
SLM을 이용한 short peptide의 분리를 목적으로 donor phase의 pH 및 acceptor phase의 염농도, membrane의 carrier 농도 차에 따른 peptide의 이동속도를 확인한 결과는 다음과 같다. 즉, pH 7.0 이하에서는 acceptor phase의 NaCl 농도나 carrier 농도에 상관없이 Gly-Tyr의 이동속도는 거의 영향을 끼치지 않았고, pH 7.0 이상에서는 이동속도가 급격히 증가함을 알 수 있었다. 그리고 Aliquat가 $8\%$ 함유된 D-SLM과 $20\%$ 함유된 H-SLM의 경우 Gly-Tyr의 이동속도는 H-SLM이 D-SLM보다 pH 9.0, 0.25 M NaCl 용액에서는 약 3배, pH 8.0, 1.0 M NaCl용액에서는 10배 정도 빠르게 이동하였다. 또한 H-SLM에서 acceptor phase의 NaCl 농도가 1.0 M 인 경우 0.25 M에 비해 10배 정도 이동속도가 빠른 것으로 나타났다. 따라서, short peptide인 Gly-Tyr의 SLM을 이용한 추출에서 donor phase의 pH 7.0 이상, carrier 농도가 높은 H-SLM 사용, acceptor phase의 염 농도가 높을수록 이동속도가 빠른 것으로 나타났다.
In this study, we improved the eggshell-membrane separation process by separating the shell and membrane with EDTA solution, evaluating effects of three different extraction solutions (acetic acid, EDTA, and phosphate solution), and co-purifying multiple eggshell proteins with two successive ion-exchange chromatography procedures (CM Sepharose Fast Flow and DEAE Sepharose Fast Flow). The recovery and residual rates of eggshell and membrane separated by the modified method with added EDTA solution were 93.88%, 91.15% and 1.01%, 2.87%, respectively. Ovocleidin-116 (OC-116) and ovocalyxin-36 (OCX-36) were obtained by loading 50 mM Na-Hepes, pH 7.5, 2 mM DTT and 350 mM NaCl buffer onto the DEAE-FF column at a flow rate of 1 mL/min, ovocleidin-17 (OC-17) was obtained by loading 100 mM NaCl, 50 mM Tris, pH 8.0 on the CM-FF column at a flow rate of 0.5 mL/min. The purities of OCX-36, OC-17 and OC-116 were 96.82%, 80.15% and 73.22%, and the recovery rates were 55.27%, 53.38% and 36.34%, respectively. Antibacterial activity test suggested that phosphate solution extract exhibited significantly higher activity against the tested bacterial strains than the acetic acid or EDTA extract, probably due to more types of proteins in the extract. These results demonstrate that this separation method is feasible and efficient.
헤미셀룰로오스 가수분해액은 당은 물론 카르복시산, 푸란유도체 및 페놀화합물과 같은 여러 종류의 에탄올 발효 저해물질을 포함한다. 본 연구에서는 이런 저해물질들을 제거할 수 있는 분리 기술로서 에멀젼형 액막법이 적용되었다. 기본 모사 헤미셀룰로오스 가수분해액은 당인 자일로스, 용매인 묽은 황산 수용액과 카르복시산인 초산으로 구성되었으며, 필요에 따라 푸란유도체인 푸르푸랄 또는 페놀화합물인 p-hydroxybenzoic acid(HBA)가 그 가수분해액에 추가되었다. 본 연구에서 고려된 모든 에멀젼형 액막계에서 약산인 초산과 HBA는 선택적으로 제거가 가능하였지만, 알데히드인 푸르푸랄은 상당히 제거하기가 어려웠다. 또한, 기본 모사 가수분해액에 HBA가 추가된 에멀젼형 액막계에서 추출제로 tributyl phosphate를 사용하여 원료상에 있는 초산과 HBA를 99%까지 동시에 선택적으로 제거할 수 있었다.
The purpose of this investigation was to evaluate the effect of the porous hydroxyapatite particles (Interpore $200^{(R)}$) and guided tissue regeneration membrane ($Gore-Tex^{TM}$ augmentation material) on amount and shape of generating new bone adjacent to implant. Implants were placed immediately after extraction in the bilateral 3rd, 4th premolars of the mandible of the adult dogs. In all experimental groups, artificial bony defects were formed at the buccal cortex area, 3.3mm in width and 3.0mm in depth. In the control group : sutured without HA particles & membranes after placing implants, the experimental group 1 : membrane was place over the artificial bony defect, the experimental group 2 : bony defect was filled with HA particles and covered with membrane. The examination of bone-implant interfaces using light microscope and fluorescent microscope concluded as follows. 1. In all three experimental groups, osseointegration was observed without epithelial migration. 2. In the healing degree of bony defect area, the experimental group 1, 2 showed more prominent healing than control group, and the experimental group 1 showed the most excellent bone formation. 3. In fluorescent microscopic finding, bone remodeling was observed in regenerated bone tissue at defect area of experimental group 1, but in experimental group 2, irregular, discontinuous linear fluorescence was observed at the lower portion of defect area and sign of bone remodeling was weak.
Park, Wan-Je;Cho, Yang-Je;Ahn, Dong-Ho;Jung, Sang-Bo;Lee, Na-Gyong;Kim, Hyun-Su;Hahm, Kyung-Soo;Kim, Yu-Sam
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제7권2호
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pp.144-150
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1997
We developed a simple and efficient method to prepare a Pseudomonas vaccine of outer membrane (OM) proteins free from lipopolysaccharide (LPS). A three step purification process including extraction, ultrafiltration and ultracentrifugation effectively removed LPS from the OM protein fraction. Approximately 2 mg of the OM proteins was obtained from 1 g of wet cell. LPS contaminant in the vaccine preparation was less than 0.003% (w/w) of protein and protease activity was not detectable. To achieve a wide range of protection, OM proteins prepared from four attenuated P. aeruginosa strains were mixed in equal amounts and used as a vaccine, which elicited in rabbits a high titer of antibody reactive to all of the seven Fisher types. The antisera from the immunized rabbit had a strong reactivity to vaccine proteins larger than 25 kDa. In a burned mouse infection model, immunization with the vaccine significantly enhanced bacterial clearance in the Pseudomonas infected skin. The vaccination also provided mice an excellent protection against Pseudomonas infection (11, 16). Data on antigenicity, mutagenicity, acute, subacute toxicity and pharmacological tests confirmed the safety of the vaccine (1, 3, 10, 12, 17). These data demonstrate that this method can be applied to manufacture a bacterial vaccine of OM proteins with safety and prophylactic efficacy at a practical low cost.
A novel three-phase hollow fiber liquid phase microextraction was developed for the determination of malachite green (MG) in environmental waters, which selected [BMIM][$PF_6$] mixed with 1% trioctylphosphine oxide (TOPO) as supported phase. Several parameters (accepter phase pH, sample pH, supported phase membrane, volume of accepter phase, salinity, extraction time) that could affect extraction performance were investigated. Under the optimal extraction conditions, the established approach showed excellent characters as: high enrichment factor (212), wide linear range ($0.20-100{\mu}gL^{-1}$), low detection limit ($0.01{\mu}gL^{-1}$), good reproducibility (RSD, 8.9%, n=5) and satisfactory recovery (84.0-106.2%). The method was applied to detect MG at Yangtze River and pond waters in Zhenjiang, Jiangsu province, and 4 sites among 15 sampling sites were found MG with the concentration of $1.73-11.06{\mu}gL^{-1}$, which confirmed that the proposed environmentally friendly method was simple and effective for monitoring MG in aquatic system.
Purpose: Following tooth extraction, alveolar ridge preservation (ARP) can maintain the dimensions of ridge height and width. Although previous studies have demonstrated the effects of ARP, few if any studies have investigated the compressive force applied during grafting. The aim of this study was to determine the effects of different compressive forces on the graft materials during ARP. Methods: After tooth extraction, sockets were filled with deproteinized bovine bone mineral with 10% porcine collagen and covered by a resorbable collagen membrane in a double-layered fashion. The graft materials were compressed using a force of 5 N in the test group (n=12) and a force of 30 N in the control group (n=12). A hidden X suture was performed to secure the graft without primary closure. Cone-beam computed tomography (CBCT) was performed immediately after grafting and 4 months later, just before implant surgery. Tissue samples were retrieved using a trephine bur from the grafted sites during implant surgery for histologic and histomorphometric evaluations. Periotest values (PTVs) were measured to assess the initial stability of the dental implants. Results: Four patients dropped out from the control group and 20 patients finished the study. Both groups healed without any complications. The CBCT measurements showed that the ridge volume was comparably preserved vertically and horizontally in both groups (P>0.05). Histomorphometric analysis demonstrated that the ratio of new bone formation was significantly greater in the test group (P<0.05). The PTVs showed no significant differences between the 2 groups (P>0.05). Conclusions: The application of a greater compressive force on biomaterials during ARP significantly enhanced new bone formation while preserving the horizontal and vertical dimensions of the alveolar ridge. Further studies are required to identity the optimal compressive force for ARP.
This study was performed to confirm the optimal extraction method for antimicrobial peptides from the Hard-shelled mussel. Extractions were performed with two processes including 1% HAc/boiling and 1% HAc/non-boiling methods and used extracts for the comparison of the antimicrobial activity, protease stability, action mechanism, AU-PAGE (acid-urea PAGE), and HPLC chromatograms. 1% HAc/boiling extract showed potent antibacterial activities both against Gram-positive and negative bacterium but 1% HAc/non-boiling extract showed antibacterial activity only against Gram-positive bacteria. Treatment of 1% HAc/boiling extract with proteases retained almost antibacterial activity against B. subtilis, but abolished significant antibacterial activity against E. coli D31. Only 1% HAc/boiling extract showed two discrete clearing antibacterial zones including slow migrating and rapid migrating zones. Both extracts showed strong DNA-binding ability but did not show bacterial membrane permeabilizing ability. In comparison of the chromatogram obtained from C18 or cation-exchange HPLC, the eluted peaks from 1% HAc/boiling extract showed high hydrophobic property or absorbance compared to 1% HAc/non-boiling extract, respectively. The concentration of the purified antimicrobial peptide was also higher in 1% HAc/boiling extract than in 1% HAc/non-boiling extract. Our results suggest that the effective extraction condition for antimicrobial peptides from marine invertebrate is boiling process in a weak acetic acid solution (1%).
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[게시일 2004년 10월 1일]
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