We describe culture conditions for a high-efficiency in vitro regeneration system of Papaver nudicaule through somatic embryogenesis and secondary somatic embryogenesis. The embryogenic callus induction rate was highest when petiole explants were cultured on Murashige and Skoog (MS) medium containing 1.0 mg $1^{-1}$${\alpha}$-naphthaleneacetic acid (NAA) and 0.1 mg $1^{-1}$ 6-benzyladenine (BA) (36.7%). When transferred to plant growth regulator (PGR)-free medium, 430 somatic embryos formed asynchronously from 90 mg of embryogenic callus in each 100-ml flask. Early-stage somatic embryos were transferred to MS medium containing 1.0 mg $1^{-1}$ BA and 1.0 mg $1^{-1}$ NAA to germinate at high frequency (97.6%). One-third-strength MS medium with 1.0% sucrose and 1.0 mg $1^{-1}$$GA_3$ had the highest frequency of plantlet conversion from somatic embryos (91.2%). Over 90% of regenerated plantlets were successfully acclimated in the greenhouse. Secondary somatic embryos were frequently induced directly when the excised hypocotyls of the primary somatic embryos were cultured on MS medium without PGRs. Sucrose concentration significantly affected the induction of secondary embryos. The highest induction rate (89.5) and number of secondary somatic embryos per explant (9.3) were obtained by 1% sucrose. Most secondary embryos (87.2-94.3%) developed into the cotyledonary stage on induction medium. All cotyledonary secondary embryos were converted into plantlets both in liquid and on semisolid 1/3-strength MS medium with 1.0% sucrose.
This paper reported the establishment of mass production system of adventitious roots of Eleutherococcus sessiliflorus through the shake flask and bio-reactor culture. Induction of adventitious roots was started from the explants of germinated somatic embryos on half-strength Murashing and Skoog (MS) solid medium. The frequency of adventitious root formation was better in the explants comprising the basal hypocotyl parts than root explants alone. Among the different auxins tested (NAA, IBA and IAA), frequency of adventitious root induction was highest on medium with 0.5 mg/L NAA, and produced $16.3\pm1.9$ roots per explant. In shake-flask culture, deletion of $NH_4NO_3$ of MS medium was effective for induction of adventitious root compared with both full and half-strength MS media. Fresh weight increase of induced adventitious roots was performed well in medium with 0.5 mg/L IBA. When adventitious roots produced in shake-flask culture were transferred to 10-liter bioreactor, 5.5 times of fresh weight increase was gained after one month of culture. HPLC analysis revealed that the amount of eleutheroside E and E1 was higher in in vitro cultured adventitious roots than the 3 year-old field cultivated root barks of Eleutherococcus sessiliflorus. The content of eltutheroside B was much lower in adventitious roots than that of field cultivated one.
Transgenic plants with the herbicide-resistance gene (bar gene) were obtained via organogenesis from isolated mesophyll protoplasts of Nierembergia repens after applying electroporation. Transient ${\beta}-glucuronidase$ (GUS) activity of electroporated protoplasts assayed 2 days after applying an electric pulse showed that optimum condition (transient GUS activity 319 pmol 4 MU/mg per min and plating efficiency 2.43%) for electroporation was 0.5 kV/cm in field strength and $100{\mu}F$ in capacitance. The protoplasts electroporated with the bar gene at this condition initiated formation of microcolonies on medium after 2 weeks. After 4 weeks of culture, equal volume of fresh 1/2-strength Murashige and Skoog (MS) medium containing 0.2 mg/l bialaphos was added for selection of transformed colonies. After 6 weeks of culture, growing colonies were transferred onto regeneration medium containing 1.0 mg/l bialaphos, on which they formed adventitious shoots 1-2 months after electroporation. The adventitious shoots rooted easily after transfer onto MS medium with bialaphos lacking plant-growth regulators. Transformation of these regenerants with the bar gene was confirmed by Southern analysis. Some of the transformants showed strong resistance to the application of bialaphos solution at 10.0 mg/l.
Plantlet regeneration from the shoot apex was studied in three different genotypes of the chinese yam (Dioscorea opposita Thunb) cv. Jnagma and Danma, Dunggunma. The effects of plant growth regulators and inorganic salts concentration of the culture medium on bud induction and shoot growth were examined. The combinations of 0.2 mg/L BAP + 0.2mg/L kinetin, 0.01mg/L NAA + 0.2 mg/L kinetin and a single treatment of 0.2mg/L BAP were equally effective for bud and shoot formation from the shoot apices in the three cultivars. Auxin (2,4-D, NAA) treatment enhanced calli formation from the cultured apices. Also, the shoot apices of the cv. Dunggunma produced more callus and buds on the culture medium (MS) containing 0.05mg/L NAA and 0.5-1.0mg/L SAP. Lower salt strength of medium inhibited shoot elongation but did not have much effect on the shoot and bud induction from the shoot apices. These results will be useful to obtain disease-free plants of the Chinese yam.
The effects of MS salt strength, sucrose, and cultural conditions on bulblet formation and growth were investigated to optimize the conditions for micropropagating bulblets from in vitro bulb scales of Lilium Oriental Hybrid 'Casa Blanca'. There was no difference on bulblet formation in the range of 1/2~2 $\times$ strength of MS salt, but it was inhibited remarkably in 3 $\times$ strength of MS salt. The growth of regenerated bulblets was most stimulated on MS basal medium. Favorable bulblet formation and its growth from bulb scales were achieved when grown on the media with 1 : 2 or 1 : 3 in the ratio of NH$_4$^+ : NO$_3$^- , as well as on MS basal medium (NH$_4$^+ : NO$_3$^- = about l : 2). Therefore, MS basal medium was very suitable for bulblet formation and growth from bulb scales. Bulblet formation was inhibited but its growth was stimulated with increase sucrose concentration in the medium. The growth of regenerated bulblets was very effective on the media with 9~12% sucrose. Addition of activated charcoal (AC) to the medium inhibited bulblet formation from bulb scales, but enhanced the growth of regenerated bulblets. Especially, the medium containing 1 g/L AC was most effective on the growth of bulblets. No difference was found on bulblet formation and growth from bulb scales under light and dark conditions. In vitro micropropagation of L. Oriental Hybrid 'Casa Blanca' was supposed very reasonable to enhance the growth of the bulblets after forming of bulblets from in vitro bulb scales, and then, subculture the bulb scales from the grown bulblets on MS medium with 9% sucrose and 1 g/L AC.
KIM Doo-Sang;KIM Hyeung-Rak;KIM Jeong-Han;PYEUN Jae-Hyeong
Korean Journal of Fisheries and Aquatic Sciences
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v.33
no.1
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pp.70-74
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2000
Agar for microbiological medium was prepared with pilot-scale for industrial application by the process of microfiltration ($0.4 {\mu}m\;pore size$) in $40{\~}50{\circ}C$, washing with sot water, and treatment with $0.25\;N NaOH\;at\;70{\circ}C$. Transparency, gel strength, viscosity, sulfate content, and syneresis ratio of agar prepared from Gelidium amansii was compared with commercial agar for microbiological medium. Gel strength and transparency were increased with processing, however, it's viscosity, sulfate content, and syneresis ratio were reduced. The final agar product was superior to commercial agar for microbiological medium.
This study was conducted to investigate the effect of growth regulators and medium composition on the growth of each stage in apical meristem culture for mass propagation of Zanthoxylum piperitum var. inerme Makino. The source material, shoot tip segments were taken from three-years old graft trees. Apical meristems were cultured in vitro on basal MS, GD, WS, half strength MS(1/2MS) and half strength GD(1/2GD) media supplemented with various concentrations for growth regulators(BA, IBA) and inorganic nutrients. The results summarized are as follows: 1. In culture establishment stage, ratio of culture establishment was 96.7% and the best resuit was obtained using MS medium supplemented with 1.0mg/l BA and 0.2mg/l IBA. 2. In shoot multitication stage, both shoot multiplication and growth were achieved in average 5.6cm. These results were obtained on in MS medium supplemented with 1.0mg/l BA and 0.2mg/l IBA. 3. In roothing stage, phloroglucinol(PG) acted as IBA synergist in root initiation. The most faverable combinations for root development was half-strength MS medium supplemented with 162mg/l PG and 0.2mg/l IBA, and ratio of rooting was 58.0%. 4. In Vitro formed plantlets were transplanted to paper pots in greenhouse with 85% of relative humidity. 96% of survival rate was obtained from artificial soil mix having same volume of sand, vermiculite, peat, and soil.
Kang Gwan-Ho;Oh Owel-Sun;Goo Dae-Hoe;Eun Jong-Seon;Kim Hyung-Moo
Journal of Plant Biotechnology
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v.32
no.4
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pp.281-285
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2005
To establish the mass proliferation system of Ardisia pusilla DC, the shoot tips of Ardisia pusilla DC were cultured on the MS and half-strength MS medium supplemented with $0{\sim}5.0$ mg/L BA or $0{\sim}0.5$ mg/L thidiazuron(TDZ), respectively. A few multiple shoot formation observed when the shoots were cultured on MS medium containing TDZ. However, the frequency of multiple shoot formation was reached up to 82.4%, when the shoots were cultured on half-strength MS medium supplemented with 0.5 mg/L BA. Also the number of shoot per explant was 7.1. To promote rooting from multiple shoot, newly formed shoots were transferred to half-strength MS medium containing 0.5 mg/L IBA or 0.5 mg/L NAA, respectively. Regenerated plantlets were grown to normal mature plants in soil.
The top-to-bottom compression strength of corrugated board box is the most important mode of loading during it's no, and it depends largely on the edgewise compression strength of the corrugated board in the cross-machine direction and to a considerable extent on the flexural stiffness in both principal directions (CD; cross-machine direction, MD; machine direction) of the corrugated board. Corrugated board is a sandwich structure with an orthotropic property. The purpose of this study was to elucidate the principal design parameters for board combination of corrugated board from the viewpoint of bending strength through the finite element analysis [FEA] fur the various corrugated board. In general, the flexural stiffness [FS] in the MD was 2-3 times larger than that in the CD, and the effect of liner for the FS of corrugated board was much bigger than that of corrugating medium. The flexural stiffness index [FSI] was high when the stiffness of liner was in the order of inner, outer, and middle liner in double-wall corrugated board [DW], and the effect of the stiffness arrangement or itself reinforcement of corrugating medium on the FSI was not high. In single-wall corrugated board [SW] with DW. the variation of FSI with itself stiffness reinforcement of liner was much bigger than that with stiffness arrangement of liner. The highest FSI was at the ratio of about 2:1:2 for basis weight distribution of outer, middle, and inner liner if the stiffness of liner and total basis weight of corrugated board were equal in DW Secondarily. basis weight was in the order of inner, outer, and middle liner. However, the variation of FSI with basis weight distribution between liner and corrugating medium was much bigger than that with itself basis weight distribution ratio of liner and corrugating medium respectively in both DW and SW. md the FSI was high as more total basis weight was divided into liner. These phenomena fur board combination of corrugated board based on the FEA were well verified by experimental investigation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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