본 연구를 통해 BAGGT를 재조합 B. subtilis를 이용하여 대량 생산하기 위하여 유전자 클로닝, 발현 시스템 구축 및 배지 최적화를 진행하였다. 이중프로모터 시스템을 이용하여 야생형 균주에 비해 42배 효소 생산성이 향상된 발현 시스템을 구축하였다. 또한 PBD 분석을 통해 당밀과 CSL이 재조합 B. subtilis 시스템에서 BAGGT의 생산성에 큰 영향을 주는 인자임을 확인하였으며, 염류의 첨가에 의한 효소 생산성 증대 효과는 미비하거나 부정적이었다. 탄소원으로 당밀을 선택하고 고가의 질소원인 트립톤을 저가의 CSL로 교체한 후 CCD 분석을 통해서 결정된 최적배지 사용 시 최적화 이전의 LB 배지 대비 4.3배의 생산성 증대를 이루었으며, 이는 LB 배지에서 야생형 균주의 BAGGT 생산성 대비 180배의 효소 생산성 개선에 해당하였다. 본 연구를 통해 식품용 효소로서 BAGGT의 대량생산을 위한 공정을 구축하였으며, 이후 정미성 소재 생산에 활용할 수 있을 것으로 기대한다.
Kim, Hyun;Eom, Hyun-Ju;Lee, Jun-Soo;Seo, Jin-Ho;Han, Nam-Soo
한국생물공학회:학술대회논문집
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한국생물공학회 2005년도 생물공학의 동향(XVI)
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pp.68-72
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2005
Leuconostoc citreum is one of the representative strains of Leuconostoc spp. that show fast growth rates in fermented vegetables. Sequential experimental designs including the Plackett-Burman design, fractional factorial design, steepest ascent analysis, central composite design and response surface methodology were introduced tooptimize and improve the medium for Leuconostoc citreum. Fifteen medium ingredients were examined and glucose (20 g/l), yeast extract (12.5 g/l), sodium acetate trihydrate (6.12 g/l), potassium phosphate (42.55 g/l) and dibasic ammonium citrate (4.12 g/l)were chosen as the best components to give a critical and positive effect for cell-growth. The biomass was increased to 2.79 g/l (169%), compared to the 1.65 g/l in MRS medium.
Kim, Hyun;Eom, Hyun-Ju;Lee, Jun-soo;Han, Jin-soo;Han, Nam-Soo
Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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제9권4호
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pp.278-284
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2004
Leuconostoc citreum is one of the representative strains of Leuconostoc spp. that show fast growth rates in fermented vegetables. Sequential experimental designs including the Plackett-Burman design, fractional factorial design, steepest ascent analysis, central composite design and response surface methodology were introduced to optimize and improve the medium for L. citreum. Fifteen medium ingredients were examined and glucose ($20 g/\ell$), yeast extract ($12.5g/\ell$), sodium acetate trihydrate ($6.12g/\ell$), potassium phosphate ($42.55g/\ell$), and dibasic ammonium citrate ($4.12g/\ell$), were chosen as the best components to give a critical and positive effect for cell-growth. The biomass was increased to ($2.79g/\ell$), (169%), compared to the $1.65g/\ell$ in MRS medium.
본 연구는 배지 구성물질로서 폐펄라이트와 폐암면 입자를 함유한 다양한 생육배지에서 포인세티아의 생산 가능성을 구명하기 위하여 수행되었다. 두 가지 폐배지를 위주로 1:1과 1:3을 포함한 다양한 부피비로 혼합한 10가지 조합으로 실험하였으며, 25% 폐펄라이트:75% 피트모스의 혼합배지를 대조구로 하였다. 초장, 근장, 최대 가지 길이, 뿌리수, 엽면적, 포엽장과 포엽폭은 폐펄라이트를 함유한 배지에서 대조구에 비해 큰 유의차를 보였다. 하지만 경경과 포엽수는 차이가 없었다. 본 결과로 폐펄라이트와 폐배지의 포인세티아 식물의 재배 시 재활용의 가능성이 입증되었다.
The uptake of phenolsulfonphthalein (PSP) and of paraaminohippuric acid (PAH) by cortical slices of the rabbit kidney was investigated while varying the composition of medium. The overall uptake of these substances displayed typical active transport characteristics and was significantly enhanced in presence of acetate. When the phosphate buffer was used the optimal pH was 7.4 for both substances. However, when the tris-buffer was used the optimal pH was 7.4 for PSP and 8.3 for PAH. Removal of $Na^+$ from the medium resulted in a significant reduction in the uptake. Similar results, though lesser in magnitude, were obtained when either $K^+\;or\;Ca^{++}$ was removed from the medium. However, there was no additive effect when $K^+\;and/or\;Ca^{++}$ were additionally removed from the $Na^+-free$ medium. The presence of ${NH_4}^+$ greatly reduced while $Li^+\;and\;Mg^{++}$ moderately reduced the uptake of both substances. However, choline had no effect. In substrate-leached slices, acetate greatly enhance the uptake of organic acids; but this action was not demonstrable in absence of $Na^+,\;K^+\;or\;Ca^{++}$.
Acetobacter xylinum A TCC 23769에 의한 미생물 생룰로오스의 생산을 위한 최적배지가 개발되었다. 미생물생룰로오스의 생산을 위한 각 영양성분의 최 척농도는 리터당 10 g peptone, 20 g yeast extract, 5g glucose, 1.56 g $Na_2HPO_4$, 1.8 g$KH_2PO_4$, 0.05 g $MaSO_4$, 0.002g $FeCl_3$, 5 g citric acid 그리고 10 mL ethanol로 결정되었다. 개발된 배지에서 수득한 생룰로오스의 생산성은 구연산과 에탄융의 상승효과 로 정치배양시 보고된 결과보다 매우 높은 포도당 단위그람당 0.446 그람이었다. 개발된 배지에서 정치배양시 세포성장 빛 셀룰로오스의 생산 또한 조사 되었다.
Stable poly(methyl methacrylate-co-divinylbenzene) (poly(MMA-co-DVB)) microspheres were prepared by precipitation polymerization using acetonitrile as the main medium under various polymerization conditions, including modifications of the agitation speed, monomer and initiator concentrations, DVB content in the monomer mixture, and the use of various cosolvents. Gentle agitation was required to obtain smooth spherical particles. The individually stable microspheres were obtained at monomer concentrations of up to 15 vol% in an acetonitrile medium. The number-average diameter increased linearly with respect to increases in the monomer and initiator concentrations. We found, however, that the uniformity of the microspheres was independent of the variation of the polymerization ingredients because nuclei formation was solely influenced by the crosslinking reaction of the monomers. We obtained higher yields for the polymerization at higher concentrations of monomer and initiator. The concentration of DVB in the monomer mixture composition played an important role in determining not only the size of the microspheres but also the yield of the polymerization. In addition, although we employed various cosolvents as the polymerization medium, we found that acetonitrile/2-methoxyethanol was the only system that provided spherical particles without coagulation. This finding indicates that the precipitation polymerization is strongly dependent on the solvent used as the medium.
Rhizopus japonicus ATCC33959로부터 미생물성 chitosan을 생산하기 위한 최적 조건을 조사하였다. 탄소원으로써 starch와 glucose(1:1)를 3.0%, 질소원으로써 yeast extract를 3.0%, 무기염류로써 ZnSO4를 0.02% 첨가하고 pH를 5.0으로 맞춘 배지에 Rhizopus japonicus ATCC22959의 포자를 접종한 후 3$0^{\circ}C$에서 96시간 배양하는 것이었다. Chitosan 생산을 위한 기본 배지와 최적 배지에 각각 1.25$\times$105개의 포자를 접종하여 배양한 후 chitosan의 생산성을 비교한 결과는 각각 0.08g/200ml와 0.51g/200ml로 약 6.4배정도 수율이 증가하였다.
본 시험은 산삼 배양액 급여가 성별(암퇘지와 거세돼지)에 따른 돈육 품질에 미치는 영향을 조사하기 위해 $60{\pm}3kg$의 버크셔 120두를 공시하여 산삼 배양액을 급여하지 않은 대조구와 산삼 배양액을 1일 두당 1 L를 출하 시(약 110 kg)까지 약 70일 동안 음수로 급여한 처리구로 하여 실시하였다. 지방산 조성은 대조구보다 처리구가, 암퇘지보다 거세돼지가 단가 불포화 및 포화지방산 비율은 증가하고 상대적으로 불포화지방산 비율은 감소하였다. 아미노산 조성은 대조구보다 처리구가 필수 아미노산 함량은 적은 반면 황함유 및 방향족 아미노산 함량은 많았으며, 암퇘지보다 거세돼지가 필수 및 맛 관여 아미노산 함량은 적은 반면, 감미계, 황함유 및 방향족 아미노산 함량은 많은 결과였다. 신선육의 관능평가 결과 처리 간에는 암퇘지의 육색만 대조구보다 처리구가 높게 나타났으며, 성별 간에는 대조구의 모든 항목과 처리구의 drip loss와 marbling은 암퇘지보다 거세돼지가 높게 나타났다. 가열육의 관능 평가 결과 성별 간에는 대조구의 향과 전체적 기호도만이 암퇘지보다 거세돼지가 높게 나타났다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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