GABA 함량이 높은 청국장을 발효하는 Bacillus subtilis MC 31의 청국장 품질특성을 조사하였다. B. subtilis MC 31에 의해 발효된 청국장으로부터 24개의 아미노산이 검출되었고 그 중에서도 leucine이 가장 높은 함량을 나타냈다. B. subtilis MC31에 의해 발효가 된 청국장의 미생물의 생육 변화를 조사한 결과 총 균수가 정지기에 들어서면서 log $9.52{\pm}0.5$~log $9.049{\pm}0.5$ CFU/g까지 증가하였다. 청국장의 일반성분은 수분 $61.7{\pm}0.01%$, 회분 $1.52{\pm}0.01%$, 조단백 $17.66{\pm}0.04%$, 조지방 $8.96{\pm}0.03%$, 조섬유가 2.61%를 함유하였다. 암모니아태, 아미노태, 환원당은 모두 삶은 콩보다 청국장의 함량이 높게 조사되었지만 산도와 총 당은 청국장이 삶은 콩보다 함량이 낮았다. 청국장의 pH는 시간이 지날수록 알칼리화되고 점질물은 $4.7{\pm}0.05%$, protease activity는 $0.519{\pm}7.36$ g/l로 나타났으며 Fibrin plate와 Robbin실험을 통하여 fibrinolytic activity도 높음을 확인하였다. 이상의 결과로 미루어 보아 B. subtilis MC 31은 우수한 청국장 품질을 띄어 제조용 균주로 사용이 가능한 것으로 사료된다.
천연물을 이용하여 생리활성이 있는 성분을 추출 분리하여 그 유효 성분을 탐색함으로써 질병 예방 및 치료제로 이용하고자 하는 연구가 최근 활발히 진행되고 있다. 본 연구에서는 예부터 혈액 순환을 돕고, 지혈 작용에 효과가 있는 것으로 알려져 있는 식탁에 상용되는 야채인 부추를 이용하여 4종의 인체 암세포주인 HepG2, HeLa, MCF7 및 SK-N-MC를 이용하여 암세포 증식억제 및 암예방 QR 유도활성 효과를 측정하였다. MTT assay를 이용한 암세포 증식억제 실험 결과, 4종의 암세포주 모두 ethylether층인 ATMEE에서 아주 높은 농도 의존적이 암세포 증식억제 효과를 보였다. 즉 본 실험에 사용된 인체 암세포주 4종에서 시료의 농도가 $150\;{\mu}g/mL$일 때 각 세포주 모두 약 90% 이상의 높은 암세포 증식억제 효과가 나타났으며, 특히 신경아종세포주인 SK-N-MC 에서는 ethylether층의 시료 농도를 다른 층을 첨가시의 농도보다 적은 $100\;{\mu}g/mL$ 첨가에서도 이미 99.8%의 아주 높은 암세포 증식억제 효과를 나타내었다. 또 신경아종세포인 SK-N-MC에서는 ethylacetate층인 ATMEA의 경우에서도 최종 첨가 시료농도를 $200\;{\mu}g/mL$ 첨가했을 때 이미 91%의 높은 암세포 증식억제 효과가 나타났다. 암예방 quinone reductase(QR) 유도활성을 측정한 결과, 시료의 butanol 분획물 ATMB를 $50\;{\mu}g/mL$ 첨가했을 때 시료무처리구인 대조군을 1.0으로 한 경우 암예방 QR유도 효과가 아주 높은 3.92배의 활성이 나타났다. 본 연구 결과, 인체암세포 4종류에 대한 암세포 증식억제(cytotoxicity) 효과는 부추의 ethylether 분배층(ATMEE)에서 제일 뚜렷하였고, 암예방 QR 유도활성 효과는 butanol 분배층(ATMB)에서 가장 유도효과가 좋았다. 나아가 단계적인 생리활성 물질의 분리 동정이 계속 이루어져야 할 것으로 사료된다.
Choi, Donchan;Lee, Su Ji;Lee, Min Hyuck;Lee, Dong Kyu
한국발생생물학회지:발생과생식
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제21권2호
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pp.215-221
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2017
Bitter melon (Momordica charantia, MC) has been used in traditional Korean medicine in treating diabetes. In addition, some reports were emerged, showing the antifertility activities of MC in mammals. We investigated the effects of ethanolic MC extract on the reproductive activity of golden hamsters whose spermatogenetic capacity is controlled by their photoperiods. The animals were divided into 4 groups: long photoperiod (LP) control, short photoperiod (SP) control, and LP animals treated with MC. The animals were orally ingested with low (0.03 g/kg) or high (0.15 g/kg) concentrations of the ethanolic extracts for 8 weeks on the daily basis. The control animals received the vehicle. The animals were then mated with age-matched females, experienced pregnancy. As results, the LP control animals showed active large testes but SP control animals displayed remarkably reduced testes. The animals treated with both concentrations of MC extracts demonstrated large testes, indicating fertile activity as animals in LP. LP control animals had litters as expected, but SP controls had no litters at all. MC extract showed the same results as LP animals in generating offsprings. These results suggest that the MC extract does not change the photoperiodic influence on reproductive activity of male golden hamsters.
G protein-coupled receptors (GPCR) constitute the largest superfamily of cell membrane receptors, mediating diverse signal-transduction pathways. The melanocortin 4 receptor (MC4R) has been of interest for its physiological role and size, one of the smallest among the GPCRs, which makes it a good model system for the structural study of GPCRs. To study the molecular structure and tissue-specific expression of MC4R in olive flounder (Paralichthys olivaceus), the full-length MC4R gene was obtained using PCR amplification of genomic DNA as well as cDNA synthesis. Sequence analysis of the gene indicates that 978 bp of the MC4R gene encodes 325 amino acids without introns. Sequence alignment with the MC4Rs from other fish shows the highest degree of identity (96%) between Paralichthys olivaceous and Verasper moseri, followed by Takifugu rubripes and Tetraodon nigroviridis (89%). RNA was isolated from various tissues to examine the tissue distribution of MC4R by using RT-PCR. The results showed major expression of MC4R in the liver, brain, and eye, which is consistent with the expression pattern in other fish belonging to the order Pleuronectiformes.
Objectives PRAL (Prunus armniaca Linne Var) is a herbal formula in Oriental Medicine, known for its anti-inflammatory and anti-allergenic properties. However, its mechanism of action and the cellular targets have not yet been found enough. The purpose of this study is to investigate the effects of PRAL on Th2 cytokines expression in MC/9 mast cells. Methods The effect of PRAL was analyzed by ELISA, Real-time PCR, Western blot in MC/9 mast cells. mRNA levels of GM-CSF, IL-4, IL-5, IL-6, IL-13, TNF-${\alpha}$ were analyzed with Real-time PCR. Levels of IL-13, MIP-$1{\alpha}$ were measured using enzyme-linked immunosorbent assays (ELISA). NFAT, AP-1 and NF-${\kappa}B$ p65 were examined by Western blot analysis. Results PRAL inhibited GM-CSF, IL-4, IL-5, IL-6, IL-13, TNF-${\alpha}$ mRNA expression in a dose dependent manner. GM-CSF, IL-4, IL-5 mRNA expression were inhibited significantly in comparison to DNP-IgE control group at concentration of 100 ${\mu}g/ml$ and IL-6, IL-13, TNF-${\alpha}$ mRNA expression were inhibited at concentration of 50 ${\mu}g/ml$, 100 ${\mu}g/ml$. PRAL also inhibited the IL-13, MIP-$1{\alpha}$ production significantly in comparison to DNP-IgE control group in a dose dependent manner. IL-13 production was inhibited at a concentration of 200 ${\mu}g/ml$, 400 ${\mu}g/ml$ and MIP-$1{\alpha}$ was inhibited at a concentration of 100 ${\mu}g/ml$, 200 ${\mu}g/ml$, 400 ${\mu}g/ml$. Western blot analysis of transcription factors involving Th2 cytokines expression revealed prominent decrease of the mast cell specific transcription factors including NFAT-1, c-Jun as well as NF-${\kappa}B$ p65 but not NFAT-2 and c-Fos. Conclusion These results indicate that PRAL has the effect of suppressing Th2 cytokines production in the MC/9 mast cells. These data represent that PRAL potentiates therapeutic activities to the allergic disease by regulating Th2 cytokines in the MC/9 mast cells.
제주재래흑돼지와 Landrace의 상호교차교배를 통하여 생산된 F2 집단에 대해 총 4개의 유전자(ADCYAP1R1, FABP3, MC4R, MYL2)에서 5 좌위의 단일염기변이의 다형성을 조사하고, 성장형질들과 통계적 연관성을 분석하였다. 조사된 5종의 SNP 좌위에서 모두 다형성이 관찰되었으나, FABP3 g.-158T>C 염기치환에 대한 유전자형 중 T/T 동형접합자는 제주재래흑돼지에서는 발견되지 않았고, Landrace에서는 ADCYAP1R1의 intron 2 337 G/G 동형접합자가 발견되지 않았다. ADCYAP1R1 유전자형은 3주령체중, 20주령체중, FABP3 유전자의 g.-135delT에 대한 유전자형은 후기일당증체량에 고도의 유의차를 보였고(P<0.01), g.-158T>G 유전자형은 성장초기단계의 체중, 20주령체중, 후기일당증체량에 대해 고도의 유의차를 나타내었다(P<0.01). MC4R은 초기일당증체량의 차이에 의해 10주령체중의 유의차를 보였고(P<0.05), 후기일당증체량과도 고도의 유의차를 나타내었다(P<0.01). F2의 체장은 ADCYAP1R1, MC4R, MYL2 유전자형에 대한 통계적 유의차를 나타내었으나(P< 0.05), 이중 MC4R의 유전자형에 따른 체장의 차이가 가장 큰 폭으로 확인되었다. 본 연구의 결과들은 제주재래흑돼지와 관련된 다원교잡체계를 이용한 양돈산업에서 성장형질의 생산성 향상을 위한 제주재래흑돼지 종모돈의 선발이나, 제주재래흑돼지 품종 자체의 품종개량을 위한 분자육종체계 구축에서 유용한 기초자료가 될 것으로 사료된다.
Objectives : The purpose of this study was to investigate the effect of Gentianae Radix on neurogenesis and apoptosis in ethanol- induced newborn rats hippocampus dentate gyrus. Methods : In vivo, laboratory animals were divided into three groups; Normal group(N), Control group(C) and Treated group (TG)(n=7 for each group). N were treated saline daily for five days. C were treated 1.5 g/kg ethanol and saline daily for five days. TG were treated 1.5 g/kg ethanol and 300 mg/kg Gentianae Radix daily for five days. BrdU(5-bromo-2-deoxyuridine) assay was used to test neurogenesis in the dentate gyrus. And TUNEL(Terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labeling) assay was used to test apoptosis in the dentate gyrus. Three groups were measured body weight, serum ethanol concentration, BrdU-positive cells and TUNEL-positive cells in the dentate gyrus. In vitro, MTT(3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide) assay was used to test viability in SK-N-MC cells. BrdU assay was used to test neurogenesis in SK-N-MC cells. DNA fragmentation and caspase-3 enzyme activity assay were used to test apoptosis in SK-N-MC cells. And treated ethanol and Gentianae Radix of all in vitro tests were made various concentration. Results : In vivo, Gentianae Radix modulated ethanol-induced neurogenesis and apoptosis in newborn rats hippocampus dentate gyrus. In vitro, TG 100 ${\mu}g/ml$ have significantly modulated ethanol-induced neurogenesis and apoptosis in SK-N-MC cells. And only TG 100 ${\mu}g/ml$ have significantly protected SK-N-MC cells from ethanol-induced cytotoxicity. Conclusions : Gentianae Radix may have the effect that modulated ethanol-induced neurogenesis and apoptosis in SK-N-MC cells.
The grouting method is widely used as the impermeable effect and ground reinforcement in construction. But, it has a problem that cement and grout material are not mixed well in the injection tip equipment and an opposite flow and interception state of the chemical grouting is happened. so, continuous work is difficult. McG method installed a special grouting and device, made possible go well mixing of grouting material and prevent flowing backward and block of nozzle also diversify powder rate of cement that is grouting material to select sutible material in layer conditions. YSS that lowered $Na_2O$ influencing durability and circumstance is developed by gel-forming reaction material. so eco-circumstance and durability is increased by minimizing dissolution of underground water. In this study, it is assumed that seepage state of the injection material using a special injection tip equipment and a unconfined compressive strenth by mixing a various injection material of various. And it is confirmed that strenth increase effect and permeable decrease of the improved body through the test execution and field execution.
Phenobarbital sodium(PB) 또는 3-methylcholanthrene(3-MC)이 살충제 carbofuran의 쥐에 대한 독성과 이의 독성경감효과를 구명하기 위하여 이들을 단독 또는 조합으로 경구투여한 후 쥐의 생존율을 조사하였고, 쥐에서 carbofuran 의 in vitro 대사에 미치는 영향을 구명하기 위하여 쥐 간의 추출액에 이들을 단독 또는 조합으로 처리한 후 대사산물을 조사하였다. 쥐에 대한 carbofuran의 $LD_{50}$(96hrs)은 6.9 mg/kg이었고, 주 대사산물의 독성은 3-hydroxycarbofuran > 3-ketocarbofuran > 3-hydroxycarbofuran phenol 순으로 높게 나타났으며, 모화합물보다는 그 독성이 매우 낮았다. 쥐의 생존율은 carbofuran 8.4 mg/kg만을 투여했을 때 0%이었으나 carbofuran과 PB 또는 3-MC 20 mg/kg을 각각 조합투여시 $60{\sim}80%$로 높아졌고, 60 mg/kg 투여시에는 100% 생존하여 PB 및 3-MC의 carbofuran에 대한 독성경감 효과가 매우 컸다. 간 추출액에서 in vitro 대사의 대부분은 microsomal fraction에서 이루어지고 있었다. Carbofuran 단독처리시 주 대사산물은 3-hydroxycarbofuran이었으나 carbofuran과 PB 또는 3-MC 조합처리시 3-ketocarbofuran이었다. 또한, 기질 및 처리별 대사산물의 생성율을 조사한 결과 microsomal fraction에 carbofuran 단독 및 PB 또는 3-MC와의 조합처리 모두 co-factor로서 NADP+G-6-P+G-6-P-DG 첨가시(phase I system) 가장 높았고, $105,000{\times}g$ 상징액에서는 carbofuran 단독처리의 경우 co-factor로서 NADPH+ GSH 첨가시(phase II system)에 그리고 PB 또는 3-MC와 조합처리의 경우 co-factor 중 NADPH+FAD 첨가시(phase II system)에 가장 높았다. 대사산물 생성율은 carbofuran 단독처리보다 carbofuran과 PB 또는 3-MC 조합처리에서 $2{\sim}3$배 높았다.
교감신경절 전달에 무스카린성 수용체 아형과 니코틴성 수용체가 기능적으로 어떻게 작용하는지를 알아 보기 위하여 척수가토에서 척수를 통한 교감신경절전섬유의 자극에 의한 승압반응과 신경절 $M_1$수용체 및 니코틴성 수용체 흥분제인 McN-A-343과 DMPP의 승압반응에 대한 $M_1$수용체 길항제인 pirenzepine, $M_2$수용체 길항제인 AF-DX116 및 니코틴성 수용체 길항제인 mecamylamine의 영향을 조사하였다. 먼저 $M_1$ 및 $M_2$수용체의 작용을 선택적으로 차단하는 pirenzepine과 AF-DX116의 용량을 구하기 위해 chlorisondamine-처리가토에서의 $M_1$수용체를 통한 작용인 McN-A-343의 혈압상승작용과 $M_2$수용체를 통한 작용인 bethanechol (BCh)에 의한 심박수감소작용을 50% 억제하는 양$(LD_{50})$을 각각 구한 결과 pirenzepine의 혈압상승작용에 대한 $ID_{50}$가 $30\;{\mu}g/kg$였으며 AF-DX116의 심박수감소작용에 대한 $ID_{50}$가 $27\;{\mu}g/kg$였다. 제 8흉추부위에 삽입한 전극을 통한 교감신경절전섬유 전기자극에 의해 혈압상승작용 $(24{\pm}1.8\;mmHg)$을 나타냈으며 이 혈압상승작용은 pirenzepine 3, 10, 30 및 $100\;{\mu}g/kg$에 의해 $20{\sim}25%$정도 용량에 관계없이 비슷한 정도로 억제되었으나 AF-DX116 $100\;{\mu}g/kg$에 의해서는 영향받지 않았다. Mecamylamine은 용량의존적으로 이 승압작용을 억제하였으며 mecamylamine의 이 억제작용은 pirenzepine $30\;{\mu}g/kg$에 의해서는 유의하게 강화되었으나 AF-DX116 $100\;{\mu}g/kg$에 의해서는 영향받지 않았다. 척수이단가토에서 McN-A-343 $(100\;{\mu}g/kg)$ 및 DMPP $(100\;{\mu}g/kg)$는 혈압상승작용을 나타냈으며 pirenzepine과 AF-DX116은 McN-A-343의 승압작용은 용량의존적으로 억제하였으나 DMPP의 승압작용에는 영향을 미치지 못하였고 mecamylamine은 양약물의 승압작용을 모두 용량 의존적으로 억제하였다. 이상의 실험성적은 척수가토에서 절전교감신경절 자극에 의한 혈압상승에는 $M_1$수용체의 흥분이 일부 관여하나 $M_2$수용체의 흥분은 관여하지 않으며 교감신경절전달에서 $M_1$수용체의 흥분이 니코틴성 전달을 부분적으로 용이하게 하나 $M_2$수용체는 작용하지 않음을 시사하고 있다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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