Panax ginseng discarded and lower than 4th grade is caused by red skin disease showing red color skin in ginseng. This kind of red skin ginseng is found a lot in Panax ginseng rather than Panax quinquefolium, and it is considered that red skin disease might be caused by gene. Therefore, this study was carried out to detect genes resistant to red skin disease using RT-PCR. RNA was extracted from three years old ginseng root of both red skin and normal portion in the same root. After RNA extraction, PCR amplification was performed from cDNA using many random primers. As a result, specific band for red skin was found. It is considered that the gene forming band has possibility to be related with red skin disease, and this gene should be decided if it's related with red skin disease. If that gene is related with red skin disease, it will be used for transformation to foster for resistance to red skin disease as well as for selection marker. Bowever, if it's not related with red skin disease, more primers should be used to find gene related with red skin disease.
Protoplasts of both strains were produced by lysozyme digestion at $30^{\circ}C$ for 180min. Both strains were treated with $40{\mu}g$/ml of lysozyme in 30mM Tris-HCl buffer(pH 7.5) containing 10% sucrose at the late logarithmic growth phase. It was found that the efficiency of protoplast formation was high at $30^{\circ}C$ and pH 7.5 by measuring the decrease in absorbance. Optimum concentrations of sucrose $Ca^{2+}, \;Mg^{2+}$ for protoplast formation were determined to be 15%, 20mM and 6mM, respectively. Hydrolysis of cell wall and protoplast formation efficiency for L. plantarum showed better results than those for Leu. mesenteroides. The resistances to antibiotics erythromycin and chloramphenicols were chosen as the selection marker for the fusant between L. plantarum and Leu. mesenteroides. Production phase of protoplast in Leu. mesenteroides was also compared with L. plantarum in this paper.
The objectives of this study were to identify QTLs for agronomic traits using introgression lines from a cross between a japonica weedy rice and a Tongil-type rice. A total of 75 introgression lines developed in the Tongil-type rice were characterized. A total of 368 introgressed segments including 285 homozygous and 83 heterozygous loci were detected on 12 chromosomes based on the genotypes of 136 SSR markers. Each of 75 introgression lines contained 0-9 homozygous and 0-8 heterozygous introgressed segments with an average of 5.8 segments per line. A total of 31 quantitative and 2 qualitative loci were identified for 14 agronomic traits and each QTL explained 4.1% to 76.6% of the phenotypic variance. Some QTLs were clustered in a few chromosomal regions. A first cluster was located near RM315 and RM472 on chromosome 1 with QTLs for 1,000 grain weight, culm length, grain width and thickness. Another cluster was detected with four QTLs for 1,000 grain weight, grain length, grain width and grain length/width ratio near the SSR marker RM249 on chromosome 5. Among the 31 QTLs, 9 (28.1%) Hapcheonaengmi3 alleles were beneficial in the Milyang23 background. ILs would be useful to confirm QTLs putatively detected in a primary mapping population for complex traits and serve as a starting point for map-based cloning of the QTLs. Additional backcrosses are being made to purify nearly isogenic lines (NILs) harboring a few favorable Hapcheonaengmi3 alleles in Milyang23 background.
Kim, Mi-Reu;Lee, Jeong Jin;Min, Jiyoung;Kim, Sun Ha;Kim, Dae-Gyu;Oh, Sang-Keun
Korean Journal of Agricultural Science
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v.48
no.1
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pp.151-161
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2021
Fusarium wilt disease of tomato plants caused by Fusarium oxysporum f.sp. lycopersici (FOL race2) is one of the most important diseases of tomatoes worldwide. In the competition between tomato and FOL, the FOL can win by overcoming the immune system of tomato plants. Resistant interaction between the FOL race2 and tomato plants is controlled by avirulence genes (AVR2) in FOL and the corresponding resistance genes (I2) in tomato plants. In this study, 7 FOL isolates (KACC) were used to test their pathogenicity, and FOL race2 was selected because it is a broad problem in Korea. The Fol40044 isolates showed the most severe pathogenicity, and the avr2 gene was also isolated and identified. Moreover, to select resistance, 20 tomato varieties were inoculated with the Fol40044, and the degree of pathogenicity was evaluated by analyzing the expression of the avr2 gene. As a result, three resistant tomato varieties (PCNUF73, PCNUF101, PCNUF113) were selected, and the expression of the avr2 gene was much lower than that of the control Heinz cultivar. This result shows that the screening assay is very efficient when the avr2 gene is used as a marker to evaluate the expression level when selecting varieties resistant to tomato wilt disease. Based on these results, it is possible to isolate the I2 gene, which exhibits resistance and molecular biological interactions with the AVR2 gene from the three tomato-resistant varieties. The I2 gene provides breeders more opportunities for Fusarium disease resistance and may contribute to our understanding of their interactions with the FOL and host plant.
Rheumatoid arthritis refers to acute and chronic arthritis due to unexplained autoantibody attack. Rheumatoid arthritis should be accompanied by difficulty in mobility and severe distress due to the progression of systemic arthritis. Therefore, this study early diagnoses the effects of Rheumatoid factor (RF), C-reactive protein (CRP), and Anti-cyclic citrullinated peptide (Anti-CCP), which are typical serum markers for rheumatoid arthritis by meta-analysis. Pubmed and EMBASE, were used as PICO criteria, and two independent researchers selected papers according to the criteria set in this study. The selection criteria was a study of patients with rheumatoid arthritis who developed early onset, and the paper was evaluated using the NCS. Forest plot and Funnel plot graphs for each serum marker were calculated using Revman 5.4. After finding 193 papers on Pubmed and 184 papers on EMBASE and selecting according to the criteria, a total of 41 papers were used for the analysis. The magnitude of the effect that appears in the Forest plot of RF with the Mean differnce value is 134.34, CRP is 21.42 and Anti-CCP is 270.41. The magnitude of the effect of Anti-CCP in meta-analysis was analyzed to be larger than that of RF and CRP, and it is considered that the development of early-diagnosis serum markers using Anti-CCP and additional retrospective studies are highly effective. The combination of RF, CRP, and Anti-CCP as a panel marker is expected to be very efficient.
Objective: FKBP prolyl isomerase 5 (FKBP5) has been shown to play an important role in metabolically active tissues such as skeletal muscle. However, the expression of FKBP5 in Muscovy duck tissues and its association with body weight are still unclear. Methods: In this study, real-time quantitative polymerase chain reaction was used to detect the expression of FKBP5 in different tissues of Muscovy duck at different growth stages. Further, single nucleotide polymorphisms (SNPs) were detected in the exon region of FKBP5 and were combined analyzed with the body weight of 334 Muscovy ducks. Results: FKBP5 was highly expressed in various tissues of Muscovy duck at days 17, 19, 21, 24, and 27 of embryonic development. In addition, the expression of FKBP5 in the tissues of female adult Muscovy ducks was higher than that of male Muscovy ducks. Besides, an association analysis indicated that 3 SNPs were related to body weight trait. At the g.4819252 A>G, the body weight of AG genotype was significantly higher than that of the AA and the GG genotype. At the g.4821390 G>A, the genotype GA was extremely significantly related to body weight. At the g.4830622 T>G, the body weight of TT was significantly higher than GG and TG. Conclusion: These findings indicate the possible effects of expression levels in various tissues and the SNPs of FKBP5 on Muscovy duck body weight trait. FKBP5 could be used as molecular marker for muscle development trait using early marker-assisted selection of Muscovy ducks.
Huan huan Yan;Yi tong Shang;Li hong Wang;Xue qin Tian;Van-Tuan Tran;Li hua Yao;Bin Zeng;Zhi hong Hu
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.34
no.5
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pp.1178-1187
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2024
Cordyceps militaris is a significant edible fungus that produces a variety of bioactive compounds. We have previously established a uridine/uracil auxotrophic mutant and a corresponding Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation (ATMT) system for genetic characterization in C. militaris using pyrG as a screening marker. In this study, we constructed an ATMT system based on a dual pyrG and hisB auxotrophic mutant of C. militaris. Using the uridine/uracil auxotrophic mutant as the background and pyrG as a selection marker, the hisB gene encoding imidazole glycerophosphate dehydratase, required for histidine biosynthesis, was knocked out by homologous recombination to construct a histidine auxotrophic C. militaris mutant. Then, pyrG in the histidine auxotrophic mutant was deleted to construct a ΔpyrG ΔhisB dual auxotrophic mutant. Further, we established an ATMT transformation system based on the dual auxotrophic C. militaris by using GFP and DsRed as reporter genes. Finally, to demonstrate the application of this dual transformation system for studies of gene function, knock out and complementation of the photoreceptor gene CmWC-1 in the dual auxotrophic C. militaris were performed. The newly constructed ATMT system with histidine and uridine/uracil auxotrophic markers provides a promising tool for genetic modifications in the medicinal fungus C. militaris.
Two diallelic markers at candidate gene loci, the prolactin receptor 3 (PRLR3) gene and the retinol-binding protein 4 (RBP4) gene were evaluated for their association with growth and litter size traits in Berkshire. Genetic evaluation was conducted for 5,919 pigs with pedigree information, which included 3,480 growth performance records and 775 litter size records of 224 sows. From the same herd, genotyping was carried out on 144 and 156 animals for PRLR3 and RBP4, respectively. After assigning a genotype to subjects in which both parents had a homozygous genotype, numbers of genotyped animals increased to 474 and 338, for the PRLR3 gene and RBP4 gene, respectively. The genotype effects of two markers were estimated with breeding values of the genotyped animals. The additive effects of total number of piglets born and number of piglets born alive in the PRLR3 locus were -0.28 and -0.13, respectively. The dominance effect of the RBP4 locus on average daily gain was -10.58 g. However, the polymorphism of the RBP4 locus in total number of piglets born and number of piglets born alive has shown -0.34 and -0.33 of the additive genetic effects. In view of the results, MAS (marker-assisted selection) favoring B alleles of RBP4 and PRLR3 loci could potentially accelerate the rate of the genetic improvement in the litter size traits.
We conducted QTL mapping for 6-year growths of open-pollinated half-sib progenies from a selected clone 7-1037 in Pinus taeda. With an AFLP marker analysis on haploid DNA samples from the megagametophytes of the open-pollinated seeds, we constructed 20 framework maps spanning a total of 1,869 cM in total length and 18.5 cM in an average interval length between markers. Composite interval mapping reveals that one QTL explains 5.9% of the total phenotypic variation of height, and three QTLs account for 3.9~5.6% of the variation of diameter at breast height (DBH). There are no correlations between the QTLs. The genetic effects of the QTLs are 39.6 cm in height and 7.20~9.41 mm in DBH, respectively, The average effects of gene substitution of the markers closely linked with the QTLs are 44.3 cm in height and 8.38~11.81 m in DBH. Under an assumption that the within-family heritability for the growth traits of loblolly pine is less than 0.2, the QTLs account for 26.8% of the additive genetic variance of the progenies. In terms of relative selection efficiency, the individual selection based on QTL markers could be 5 times as high as phenotypic selection. The results in this study indicate that the QTL mapping method with open-pollinated half-sib family could be more practical and applicable to the conventional seed orchard-based selection work than other mapping methods with a single full-sib family, in particular from the viewpoint that it can provide crucial information for within-family individual selection such as breeding value.
Sam Woong Kim;Young Jin Kim;Tae Wook Lee;Won-Jae Chi;Woo Young Bang;Tae Wan Kim;Kyu Ho Bang;Sang Wan Gal
Journal of Life Science
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v.33
no.11
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pp.897-904
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2023
This study was done to develope genetic markers with the unique characteristics of genes according to the genomic information of Bacillus velezensis K10. B. velezensis K10 maintained a total of 4,159,835 bps, which was found to encode 5,136 open reading frames (orfs). B. velezensis K10 was found to have much more gene migration due to external factors overall compared to standard strain B. velezensis JS25R. In order to discover genetic selection markers, orfs on the genome to be easily induced to gene mutation were surveyed such as recombinase, integrase, transposase, and phage-related genes. As a result of the investigation, 9 candidate markers were isolated with high possibility as genetic selection markers. Although a part in the various origin's areas showed specificities in comparison with homology, the selected markers were all existed in phage-related areas because they were relatively lower homologies in phage-related genes. PCR analysis was done on B. licheniformis K12, B. velezensis K10, B. subtilis, and B. cereus to establish them as inter-species candidate selection markers. As a result, it was confirmed that B. velezensis K10-specific PCR products were formed in a total of 6 primer sets such as BV3 and BV5 to 9. On the other hand, analysis at the subspecies level observed the formation of B. velezensis K10-specific PCR products in 4 primer sets such as BV3, 5, 8, and 9. Among them, since BV5 and BV8 were detected by very specific results, we suggest that BV5 and 8 can be used as B. velezensis K10 gene selection markers at the species and sub-species level.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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