The objective of the present study was to investigate the survival effect after transplantation of pig spermatogonia cells into mouse testis. Donor cells were collected from porcine testis and the isolated spermatogonial stem cells were labeled with a fluorescent marker before transplantation and transplanted into testes of busulfan-treated recipient mice. Testes were examined for the presence and localization of labeled donor cells immediately after transplantation or every week for 4 wk. Transplanted germ cells were present in the seminiferous epithelium at 4 weeks after the transplantation, but any differentiating porcine-derived cells were not detected in mouse testis. These results indicate that porcine-derived spermatogonial stem cells can be survived in the recipient, but suggest that porcine-derived male stem cells can not proceed to further differentiating step without helping of immunosuppressor agents.
Lee Geum-Sil;Kim Eun-Yeong;Min Hyeon-Jeong;Park Se-Pil;Jeong Gil-Saeng;Im Jin-Ho
한국동물번식학회:학술대회논문집
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한국동물번식학회 2002년도 춘계학술발표대회 발표논문초록집
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pp.83-83
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2002
This study was to compare the characteristics of parthenogenetic mES (P-mES) cells and in vitro fertilization mES cells. Mouse oocytes were recovered from superovulated 4wks hybrid F1 (C57BL/6xCBA/N) female mice. The oocytes were treated with 7% ethanol for 5 min and 5 ㎍/㎖ cytochalasin-B for 4 h. For IVF, the oocytes were inseminated with epididymal sperm of hybrid Fl male mice (1×10/sup 6//㎖). IVF and parthenogenetic embryos were cultured in M16 medium for 4 days. Cell number count in blastocysts was carried out differential labelling using propidium iodide (red) and bisbenzimide(blue). (omitted)
Male mice (ddY strain) were fed with the chow diet containing 10% sucrose supplemented with orotic acid at the 1% level or/and taurine at the 5% levels for 14 days. The concentrations of triacylglycerol and cholesterol in the liver were significantly lower in the orotic acid group than the control group. When taurine and orotic acid were administered simultaneously, the concentrations of triacylglycerol and cholesterol in the liver were higher and lower, respectively, compared to the orotic acid group. The concentration of triacylglycerol in the serum was higher in the taurine group than that of the control or the orotic acid groups, and the simultaneous supplementation of orotic acid and taurine further enhanced. There were no significantly difference in body weight gain, diary food intake, and the concentrations of serum cholesterol and hepatic phospholipid. These results suggest that dietary taurine stimulated the increasion of hepatic triacylglycerol by orotic acid in mouse.
Adult male ICR mice were exposed to methylmercuric chloride (CH$_3$HgCI) through drinking water for 80 days. The distribution of mercury in the kidney, liver, spleen and cerebellum of the mouse was examined according to a autometallographic silver-enhancement technique based on a physical development process which renders mercury deposit visible. Grains of mercury traces were located in the proximal convoluted tubules. Lesser staining of the grains was seen in the collecting tubules of medulla. The glomerular basement membrane was void. In the liver, mercury accumulations were present primarily in the hepatocytes around portal area containing interlobular bile duct, artery and portal vein. Also grains of mercury traces were accumulated in the white pulp of the spleen and Purkinje cell layer of the cerebellum.
Eurycoma longifolia Jack was evaluated for aphrodisiac property on sexually naive male mice using the electrical copulation cage. Optimum condition was provided for this study and the male mice were treated with 500 mg/kg of either chloroform, methanol, water or n-butanol fractions from E. longifolia Jack. However, the mice in the yohimbine and control groups received 30 mg/kg and 3 ml/kg of yohimbine and normal saline respectively. The male mice were then conditioned to seek either an estrous female, sexually vigorous male or no mouse, a measurement of right, wrong or no choice respectively. Besides this, hesitation time which was the time spent before the sexually naive male mice crossed the electrical grid (maintained at 0.12 mA) was also determined. Results showed that E. longifolia Jack possesses aphrodisiac property on the sexually naive male mice as shown by the slow and transient reduction in hesitation time and also a similar manner in the increase in the % of sexually naive male mice scoring right choice throughout the investigation period. Hence, this further supports the folkuse of this plant as aphrodisiac.
For many animals the centrosome consists of a pair of centrioles and surrounding pericentriolar materials (PCMs). PCMs have been known to play roles during cell division. It is known that centrioles are necessary to assemble centrosomal components. However, many types of oocytes undergo meiosis without centrioles. It is known that in nonmurine mammalian species, the sperm introduces an intact proximal centriole unlike sea urchin where two centrioles are introduced. In case of mouse sperm, the presence of centrosome is not clear In this study, a monoclonal antibody was developed to investigate centrosome during mouse germ cell and early embryo development. Results of immunostaining and Western blotting in CHO cells suggest that the monoclonal antibody recognizes a nuclear and centrosomal protein, thus called NCP. The NCP monoclonal antibody was used to screen a cDNA expression library prepared from 12.5 mouse brain to isolate NCP gene. Nucleotide size of NCP gene obtained from immunoscreening was about 5.5kb. It is determined that the NCP may be closely related with pericentriolar material -1 gene (Pcm-1) from the result of sequencing analysis. The molecular weight, 66kDa, calculated by known DNA sequence in database is consistent with that of detected from Western blotting using CHO cell lysates. Therefore, it is assumed that NCP may be alternative splicing form of Pcm-1 of which molecular weight is 228kDa. In mouse oocytes, NCP was distributed in nucleus as in CHO cells. It was shown that the NCP was localized around neck region, probably the centrosome in mouse neck region. Interestingly, dramatic change in distribution of NCP was also shown in male germ cell development. Finally, we observed the cellular distribution of NCP during early embryo development. NCP was detected in nucleus as well as centrosome foci. It is suggested that the centrioles reassembly we occurring in blastocysts and then affects the distribution of NCP.
These studies were carried out to examine the sex of preimplantation mouse embryo. For the investigation of sex-ration of mouse embryos, morula and blastocysts stage embryos treated with H-Y antiserum (10%, v/v) and FITC anti-mouse-IgG were divided into the positive and negative embryos. Positive and negative identified embryos were observed the viability according to the in vitro cultured and the sex ratio was also investigated by chromosomal analysis. The results obtained in these studies were summarized as follows: 1. Two hundred sixty-seven recovered embryos of morula or blastocyst stage were incubated in medium containing H-Y antiserum and FITC anti-mouse-IgG. Positively or negatively identified embryos were 139 and 128. This trend indicated the approximal sex ratio was 1:1. 2. Sex ratio was measured using the embryos treated with indirect immunofluorescence assay to examine the relationship between embryo developmental stage and sex ratio. Sex ratio of morula stage embryos was 45.2% positive and 54.8% negative, on the other hand, the ratio switched to 56.4% positive and 43.6% negative embryo in blastocyst stage. 3. Fourty-seven positive and 57 negative embryos were obtained out of 104 morula stage embryos treated with indirect immunofluorescence assay. Survived positive or negative embryos during in vitro culture were 42 and 49, respectively out of 47 and 57 embryos. 4. The numbers of negative and positive embryos were 171 and 92 out of 163 blastocyst embryos which were incubated in the medium containing H-Y antiserum and FITC anti-mouse-IgG. The result of karyotype test showed the successful rate of sexing embryo is positive and negative embryos was63.0% (58/92) and 62.0% (44/71). The final female to male ratio within 58 positive embryos was 22.7:77.6, and the ratio of the 44 negative embryos was 77.3:22.7.
Placenta specific 8 (PLAC8, also known as ONZIN) is a multi-functional protein that is highly expressed in the intestine, lung, spleen, and innate immune cells, and is involved in various diseases, including cancers, obesity, and innate immune deficiency. Here, we generated a Plac8 knockout mouse using the CRISPR/Cas9 system. The Cas9 mRNA and two single guide RNAs targeting a region near the translation start codon at Plac8 exon 2 were microinjected into mouse zygotes. This successfully eliminated the conventional translation start site, as confirmed by Sanger sequencing and PCR genotyping analysis. Unlike the previous Plac8 deficient models displaying increased adipose tissue and body weights, our male Plac8 knockout mice showed rather lower body weight than sex-matched littermate controls, though the only difference between these two mouse models is genetic context. Differently from the previously constructed embryonic stem cell-derived Plac8 knockout mouse that contains a neomycin resistance cassette, this knockout mouse model is free from a negative selection marker or other external insertions, which will be useful in future studies aimed at elucidating the multi-functional and physiological roles of PLAC8 in various diseases, without interference from exogenous foreign DNA.
Objectives : This study was designed to investigate the effects of Sasim-tang (SST) on proinflammatory cytokine production in a photothrombotic ischemia mouse model. Methods : Photothrombotic ischemia was induced in stereotactically held male Balb/c mice using rose bengal (10 mg/kg) and cold light. The target of photothrombotic ischemic lesion was 1 mm anterior to bregma and 3 mm lateral to midline with 2 mm in diameter, which are decreased by oral administration of SST. Results : SST protected ischemic death of brain cells through inhibition of pro-inflammatory cytokines production and catalytic activation of caspase-3 protease in photothrombotic ischemia mouse model. Conclusions : The results of this study suggest that SST can have protective effects on brain cell damage in a photothrombotic ischemia mouse model.
Human papillomavirus (HPV), especially type 16 and 18, has been closely associated with carcinomas and uterine cevical cancer, recently. From in vitro assays, E6 and E7 genes of HPV16 are closely linked with transformation of cell lines of rodent fibroplasts. However, the transforming activity of E6 and E7 genes of HPV type 16 in vivo has not been fully elucidated. For explaining this mechanism, we prepared a expression system with the promoter of mouse mammary tumorvirus long terminal repeat and E6E7's open reading frames. This expression system was introduced in rodent cell lines, No. 7, 3Y1 and shown normal transforming abilities. And, we produced transgenic mice with E6, E7 expression system. These transgenic mice were confirmed from Southern blot analysis. One male of them was observed enlargement of the testis after 5 months postdelivery.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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