본 연구에서는 레트로바이러스 생산 세포인 CRIP/LacZ 세포의 배양시에 혈청의 역할을 대체 할 수 있는 여러 첨가불을 선정하고 그 농도를 정하는 실험올 수행하여, 레트로바이러 스 생산을 워한 무혈청 배지를 개발하였다. 그 결과 DMEM 을 기본배지로 하고 insulin, transfenin, BSA, EGF and linoleic acid를 포함한 무혈청 배지를 개발하였다. 이를 충전 층 연속배양기흘 이용한 레트로바이러스의 연속생산 실험에 본 결과 $6-7\times10^4 cfu/ml$서 수율을 가진 레트로바이러스를 약 8일간 생산할 수 있었다. 충전층 연속반응기에서도 T -flask와 같이 온도의 영향이 매우 중요하였고 $32^{circ}C$, 에서 가 장 높은 수율회 레트로바이러스를 생산할 수 있었다. 이는 레트로바이러스외 온도에 따흔 비활성속도가 바이러스 생산 수율에 매우 큰 영향음 마칩을 시사해 주논 결과이다. 또한 충전층 배양기에서 무혈청배지를 이용한 세포배양 시에는 무혈청배지 첨가물로 서1포 부착 물짚에 대한 연구가 필요하다고 생각된다.
To validate and to estimate the chemical hazard playa very important role to environment and human health. The detection of many synthetic chemicals including agrochemicals that may pose a genetic hazard in our environment is of great concern at present. Since these substances are not limited to the original products, and enter the environment, they have become widespread environmental pollutants, thus leading to a variety of chemicals that possibly threaten the public health. Pyrazosulfuron-ethyl [Ethyl-5-(4,6-dimethoxypyrimidin-2-ylcarbamoylsulfamoyl)-1-methylpyrazole-4-carboxylate, $C_{14}H_{18}N{6}O_{7}S,$ M.W. =414.39, CAS No. 93697-74-6], is one of well known rice herbicide belong in the sulfonyl urea group. To clarify the genotoxicity of this agrochemical, Ames bacterial reversion assay, in vitro chromosomal aberration assay with Chinese hamster lung (CHL) fibroblast and bone marrow micronucleus assay in mice were subjected. In Ames assay, although pyrazosulfuron-ethyl revealed cytotoxic at 5,000-140 $\mug/plate$ in Salmonella typhimurium TA100, no dose-dependent mutagenic potential in 4.4~70 $\mug/plate$ of S. typhimurium TA 98, TA 100, TA1535 and TA 1537 both in the absence and presence of S-9 metabolic activation system was observed. Using CHL fibroblasts, the 50% cell growth inhibition concentration $(IC_{50})$ of pyrazosulfuron-ethyl was determined as 1,243 $\mug/mL,$ and no chromosomal aberration was observed both in the absence and presence of S-9 mixture in the concentration range of 311-1,243 $\mug/mL.$ And also, in vivo micronucleus assay using mouse bone marrow, pyrazosulfuron-ethyl revealed no remarkable induction of MNPCE (micronucleated polychromatic erythrocytes/1000 polychromatic erythrocytes) in the dose range of 625-2,500 mg/kg body weight when administered orally. Consequently, Ames bacterial gene mutation with Salmonella typhimurium, in vitro chromosome aberration with mammalian cells and in vivo bone marrow micronucleus assay revealed no clastogenic potential of pyrazosulfuron-ethyl in this study.
Rubber particles emitted from automobile tire tread by abrasion were collected by Andersen sampler with atmospheric dusts. The samples of atmospheric dusts at each stage were analysed for rubber particles by Curie point pyrolysis-gas chromatography with Apiezon grease L column. Pyrolysis was done at 740$^circ$C for 5 seconds. In the pyrogram, NR rubber (bus and truck tire tread) was determined by isoprene peak, and SBR rubber (passenger car tire tread) was determined by styrene peak simultaneously. The size distribution of rubber particles was proportioned with the size of rubber particles. The concentrations of NR and SBR rubber were 0.23 $\mug/m^3$ and 1.31 $\mug/m^3$, respectively, in the atmospheric dusts which were collected from the street in front of Yonsei University on April 1986. The ratio of tire tread rubber in the atmospheric dusts was about 0.63%.
The purpose of this study was to investigate the effects of different objects and target location of dominant hand on the non-dominant hand movement kinematics in a bimanual reaching task. Fifteen right-handed volunteers were asked to reach from same starting point to the different target point of right and left hand with grasping the objects of different size. Independent variables were 1) three different object types (small mug cup, name pen, and PET bottle), and 2) three different target locations (shorter distance, same distance, and longer distance than the non-dominant hand) of the dominant hand. Dependent variables were movement time (MT), movement distance (MD), movement mean velocity ($MV_{mean}$), and movement peak velocity ($MV_{peak}$) of the non-dominant hand. Repeated measures two-way analysis of variance (ANOVA) was used to test for differences in the non-dominant hand movement kinematics during bimanual reaching. The results of this study were as follows: 1) MT of the non-dominant hand was increased significantly when traveling with grasping the mug cup and reaching the far target location, and was decreased significantly when traveling with grasping the PET bottle and reaching the near target location of the dominant hand. 2) MD of the non-dominant hand was significantly increased during reaching the far target location, and significantly decreased during reaching the near target location with dominant hand. 3) $MV_{mean}$ of the non-dominant hand was increased significantly when traveling with grasping the PET bottle, and was decreased significantly when traveling with grasping the mug cup of the dominant hand. Therefore, it can be concluded that the changes of the ipsilateral hand movement have influence on coupling of the contralateral hand movement in bimanual reaching.
This study was carried out to determine the concentration of gaseous nitrate$(HNO_3)$ particulate nitrate$(NO_3^-)$ and conversion rate of NOx to nitrate in atmosphere in Seoul from Oct 1991 to July 1992. The average concentration of gaseous nitrate in daytime(09:00 - 17:00) was 9.93, 3.37, 7.40 and 10.40$\mug/m^3$ and, in highttime was 6.21, 7.31, 4.79 and 3.86$\mug/m^3$ respectively. The concentratin of $HNO_3$ was greater in summer and daytime than winter and nighttime. But the concentration of $NO_3^-$ was greater in winter and nighttime than in summer and daytime. The average conversion rate of NOx to $HNO_3$(Fn) indaytime was 13.18, 3.78, 9.13 and 23.13% and, in nighttime was 3.06, 1.37, 1.70 and 8.72% during fall, winter, spring and summer respectively. But the average conversion rate of NOx to $NO_3^-$(Fn') in daytime was 5.79, 5.77, 2.63 and 3.90% and in nighttime was 5.95, 6.51, 3.25 and 4.84% respectively. The average conversion rate of NOx to total nitrate $(HNO_3 + NO_3^-)$(Fn') was 12.72, 7.81, 7.82 and 18.40% respectively. The average conversion rate of NOx to $HNO_3$(Fn) was greater than $NO_3^-$(Fn') about 1.6 times.
In order to investigate the oceanic condition of fishing ground in the southwestern coastal sea of Korea, the oceanographic observation were carried out by the trainingship of Yosu university on May, August and November in 1998. Main features in the observation are as follows; 1) the ranges of temperature, salinity, density and chlorophyll-a were from $14.5^{\circ}C\;to\;18.0^{\circ}C,\; from\;33.5\textperthousand\;to\;34.5\textperthousand$from 24.0 to 25.5 and from $1.0\mu$g/l in spring (May) from $15.0^{\circ}C\;to\;27.5^{\circ}C,\;from\;0.0\textperthousand\;35.0\textperthousand$9.0 to 26.0 and from 0.5$\mu\textrm{g}$/l to 4.0$\mu\textrm{g}$/l in summer(August), and from $ to 21.0^{\circ}\;31.0\textperthousand$, from 22.0 and from $4.0\mug/l\;to\;20.0\mug/l$ in autumn(November), respectively, 2) the temperature in the coastal region was higher than that in the open ocean while salinity, density and chlorophyll-a were lower, and the convection was identified between the surface and the bottom during in spring and autumn, 3) the chlorophyll-a in the this region was varied in each season, being highly distributed offshore Yosu Bay, 4) on evidence of sea water intrusion toward Kumun island was observed.
본 연구는 non-O157 EHEC의 혈청형별 증균 및 선택배지에서의 분리 조건 및 비교 시험을 하여 최적의 검출 방법을 제시하고자 하였다. EC medium with MUG broth, BRILA broth, mTSB broth with novobiocin 3종의 증균배지 성능 및 배양 조건의 비교 결과 EC-MUG 증균배지를 $42^{\circ}C$에서 24시간 배양하면 EHEC의 효율적인 증균이 이루어질 수 있을 것이라 생각된다. ENDO agar, Chromocult agar, TBX agar, CHROMagar$^{TM}$ STEC medium 4종의 선택배지에 가장 효과적인 배지를 확인결과 TBX agar가 검출율이 가장 높았으나 1종의 배지를 사용했을 경우 다양한 EHEC 혈청형 균를 검출 하기는 어렵다고 생각된다. 그러므로 EHEC를 효과적으로 검출하고자 할 경우 TBX agar와 보완이 가능한 그 외의 배지를 사용하여야 효과적인 검출이 가능할 것으로 생각된다. 또한, 각 배지가 혈청형에 따른 분리효율이 다르므로 본 연구 결과를 참조하여 가장 적합한 배지를 선택 해야 할 것으로 보인다. 향후 non-O157 EHEC의 적절한 기질을 사용하여 다양한 혈청형을 모두 검출 할 수 있는 효율적인 배지의 개발이 필요하다고 생각된다.
표식 유전자를 이용하여 체세포 잡종체를 선발하기 위한 연구의 일환으로 감자조직에는 T-DNA를 도입하여 식물호르몬 무첨가 배지에서도 생장가능한 형질전환체을 획득하고, 담배조직에는 NPT H gene을 도입하여 kanamycin에 대해서 저항성을 나타내는 형질전환체를 획득하여 각각의 특성구명과 원형질체를 유리하여 도입된 유전자 marker를 이용해서 융합을 시도한 바 그 결과는 다음과 같다. 1. 감자 괴경에서 Agrobacterium tumefaciens Ach5와 A. rhizogenes ATCC15834를 접종하여 crown gall tumor 및 hairy root를 유기하였으며 이러한 tumor조직은 식물 호르몬 무첨가 배지에서 생장이 가능하였다. 2. 감자에서 유기된 hairy root로부터 callus 형성은 2.4-D 2mg/1 첨가된 MS 배지에서 가장 양호하였으며 casein hydrolysate 1g/1가 첨가하면 유연 한 callus의 증식이 더욱 왕성하였다. 3. Activated charcoal이 0.5~2.0g/1 첨가된 배지에서는 crown gall tumor callus의 절단면이 갈변되는 것을 방지 할 수 있어 생존률을 높일 수 있었으나 hairy root에서는 갈변되어 고사되었다. 4. 2, 4-D 2mg/1와 casein hydrolysate 1g/1를 첨가한 배지에 hairy root callus를 현탁배의한 결과 양호한 많은 callus 덩어리들을 단시간에 얻을 수 있었다. 5. $Tri^-$parental mating으로 NPTII gene이 coding되어있는 binary vector인 pGA643을 wild type 및 disarmid된 Agrobacterium 내에 도입하여 Agrobacterium tumefaciens Ach5/pGA643, A.tumefaciens $A_4T$/pGA643, A. tumefaciens LBA4404/pGA643를 획득하였다. 이 세 개의 conjugant를 사용하여 0.7% agarose gel 상에서 pGA643을 확인하였다. 6. pGA643이 도입왼 Agrobacterium tumefaciens LBA4404와 담배 조직과 동시배양하여 kanamycin $100\mug$/ml 첨가된 배지에 생존하는 callus를 선발하였으며 동일배지에서 callus의 증식이 가능하였다. 7.형질전환된 담배 callus로부터 식물체 형성은 BA 2mg/1를 첨가한 배지에서 가능하였다. 8. 재분화된 담배의 엽조직은 kanamycin.이 $1000\mug$/ml 첨가된 MS 배지에서도 왕성히 callus가 유기되어, 이는 재분화체에서도 NPTII gene이 그대로 유지되고 있음을 확인할 수 있었다. 9. 담배의 정상 shoot와 형질전환된 shoot를 kanamycin이 $100\mug$/ml이 함유된 MS배지에 기내삽목한 결과, 정상 shoot는 발근이 되지 않고 황화 되었으나 형질전환된 shoot는 발근이되었으며 정상적으로 생장을 하였다. 10. 감자의 T-DNA가 도입된 현탁배양 callus는 cellulase 2%, macerozyme 2%, dricelase 1%에서 양호하게 유리되었다. 11. Osmoticum으로서 mannitol 농도 0.8M에서 담배와 감자의 두 조직 모두 원형질체유리가 가장 효과적이었다. 생존력은 T-DNA가 도입된 감자의 hairy root를 callus로 탈분화 시킨 후 현탁배양한 callus가 mannitol 0.5M에서 97%를 나타냈고, 그리고 NPTII gene이 도입된 담배의 엽조직은 mannitol 0.7M에서 94%로 최고를 타나냈다. 12. 원형질체 융합은 PEG solution 처리 15분 후부터 관찰되기 시작하여 20분에 완전히 융합되었고, 융합된 원형질체는 선발 marker인 호르몬 무첨가 및 kanamycin 첨가배지에서 배양 5일 후에 세포벽이 재생되었으며 4주일 후부터 colony들이 관찰되었다.
Kim, Hun;Kim, Seong-Jun;Park, Sue-Nie;Oh, Jong-Won
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제14권1호
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pp.121-127
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2004
Amphotericin B (AmB), an amphipathic polyene macrolide, is an antifungal drug produced by Streptomyces nodosus. Recently, AmB has been shown to exert antiviral activity against rubella virus and human immunodeficiency virus by different mechanisms. In this study, we evaluated the antiviral effect of AmB against Japanese encephalitis virus (JEV) and investigated which step of the viral life cycle was inhibited by AmB to understand the mechanism of antiviral action of AmB. AmB reduced both plaque size and number in the infected cells in a dose-dependent manner. In addition, a 200-fold reduction of infectious virus titer was observed by treatment of infected cells with $5\mug/ml$ of AmB. AmB acted at the post virus-infection step, but not during adsorption of virus to host cells. Western blot analysis revealed that the accumulated level of JEV envelope protein dramatically decreased in the infected cells by treatment with $5-10\mug/ml$ of AmB. Our results indicate that AmB inhibits the replication of JEV at the postinfection step by interfering with viral replication and/or by inhibiting the synthesis of viral proteins.
Byung Hee Yoon;Hak Soo Lyu;Jee Hyun Hahn;Chan Mug Ahn
Bulletin of the Korean Chemical Society
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제12권4호
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pp.380-382
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1991
Pictet-Spengler reaction of the N-hydroxytryptophan ethyl ester (4) with N-protected thiazolidine aldehyde (8) has been carried out. The product, compound (9b), might be a possible precursor for the eudistomins C, E, K, and L.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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