• 생명과학회지
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• 제20권2호
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• pp.253-259
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• 2010

본 연구는 땅콩나물 추출물이 glutamate가 유도하는 세포독성으로부터 신경세포를 보호하는 효과를 확인하였다. 땅콩나물을 부위별로 전체, 머리, 줄기 부분으로 나누어 methanol로 처리하여 얻어진 각각의 추출물 WME, HME 그리고 SME를 이용하여 glutamate에 의하여 유도된 세포독성에 대한 신경세포보호효과를 관찰하였다. 기지의 신경세포 N18-RE-105 세포주를 이용하여 MTT reduction assay, LDH release assay, 형태학적인 변화 및 apoptosis를 관찰한 결과로부터 HME에서 효율적인 신경세포보호효과를 보였다. 다음으로 HME를 이용하여 hexane, diethyl ether, ethyl acetate, water 층으로 분획하여 신경세포 보호 효과를 확인한 결과, diethyl ether 층에서 가장 높은 활성을 확인할 수 있었다. 그리고 HME의 apoptosis 억제 효과를 확인하기 위하여 flow cytometric analysis를 실시한 결과에서 glutamate 만을 처리하였을 경우 sub-G1기 세포가 58.5%의 확인되었으나 HME를 100 mg/ml 동시 처리하였을 때에는 sub-G1 세포가 9.1%로 감소하여 높은 apoptosis 억제 효과를 확인할 수 있었다. 이상의 결과로부터 땅콩나물 머리 부분 methanol 추출물에는 glutamate에 의한 세포독성으로부터 신경세포를 보호하는 효과가 있다는 것을 알 수 있었다.

• 농업생명과학연구
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• 제44권4호
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• pp.45-55
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• 2010

본 연구에서는 대표적인 퇴행성 신경질환인 알츠하이머성 치매에 대한 마늘 물, 100% 메탄올, 디클로로메탄 추출물들의 acetylcholinesterase (AChE) 저해 및 신경세포 보호효과를 조사하였다. 마늘 디클로로메탄 추출물은 농도 의존적으로 AChE를 저해하는 것으로 나타났으며, $IC_{50}$은 $36.1{\mu}g/mL$로 나타났다. MTT reduction assay를 이용해 amyloid ${\beta}$ protein ($A{\beta}$) 유도성 신경세포 독성에 대한 신경세포 보호효과를 측정한 결과, 세 가지 마늘 추출물들은 대부분 40% 미만의 세포생존율을 보였고 이 결과는 $A{\beta}$ 유도성 신경세포 독성보다 상대적으로 더 높은 세포독성을 보여주었다. LDH assay에서는 마늘 물 추출물이 37%의 LDH 방출량을 나타내 $200{\mu}M$의 vitamin C과 유사한 세포막손상 보호효과를 보였다. 마지막으로 neutral red uptake assay를 실시한 결과, MTT reduction assay와 마찬가지로 모든 마늘 추출물들에서 세포생존율의 감소를 확인하였으며 특히 디클로로메탄 추출물의 경우 현저하게 낮은 세포생존율을 나타내었다. AChE 저해활성을 갖는 마늘 디클로로메탄 추출물로부터 얻은 column fractionations에 함유된 생리활성물질을 탐색하기 위해 HPLC 분석을 실시하였으며, 마늘 98:2 fraction의 LC-MS 분석을 통하여 allyl methyl disulfide, diallyl monosulfide, diallyl disulfide로 추정되는 물질군이 확인되었다.

• 한국식품조리과학회지
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• 제28권6호
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• pp.821-828
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• 2012

In an attempt to identify the neuroprotective effect of Cudrania tricuspidata (CT) leaves against ROS (reactive oxygen species)-induced oxidative stress in neuronal cells, the extracts from CT leaves were investigated using PC12 cells and N18-RE-105 cells. The methanolic and ethanolic extracts from CT were denoted as CTM (Cudrania tricuspidata Leaves methanolic extracts) and CTE (Cudrania tricuspidata Leaves ethanolic extracts), respectively. The neuroprotective effects of the extracts were measured by DCF-DA assay, MTT reduction assay, and LDH release assay. The PC12 cells exposed to $H_2O_2$-induced oxidative stress and the N18-RE-105 cells exposed to glutamate-induced oxidative stress were treated with various concentrations of CTM and CTE. The results, CTM treatments resulted in the induction of a dose-dependent protective effect in PC12 cells and N18-RE-105 cells. Interestingly, CTE also showed neuroprotective effect in PC12 cells and N18-RE-105 cells. Therefore, these results suggest that CTM and CTE could be a new potential candidate as neuroprotective agents against ROS-induced oxidative stress in neuronal cells.

• 한국자원식물학회:학술대회논문집
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• 한국자원식물학회 2005년도 춘계 학술발표대회
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• pp.52-60
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• 2005

본 연구의 목적은 양파추출물의 간보호 및 항산화 효과를 조사하기 위함이다. 간 손상을 유발시키는 t-BHP (1.5mM) 존재하에 간세포를 0, 0.01, 0.05, 0.1 및 0.3 mg/ml의 다양한 농도의 양파추출물로 1시간 동안 일차배양하였다. 간세포 독성과 생존율은 배양액의 GOT와 LDH 활성 및 MTT 값으로 결정하였고, 지질과산화는 TBARS 농도로 측정하였다. 항산화에 미치는 효과는 catalase, GSH-Px, GSH-Rd 활성 및 DNA strand breaking assay로 결정하였다. t-BHP는 GOT와 LDH 활성 및 TBARS 농도를 증가시켰으며 MTT값은 감소시켰다. 0.05 mg/ml 이상 농도의 양파추출물 첨가는 1.5 mM 농도의 t-BHP에 의해 증가된 GOT 및 LDH 활성을 감소시켰으며 0.01 mg/ml 이상 농도의 양파추출물은 t-BHP에 의해 감소된 MTT 값을 증가시켰다. 또한 0.01 mg/ml 이상 농도의 양파추출물 첨가는 t-BHP에 의해 증가된 TBARS 농도를 감소시켜 양파추출물이 t-BHP에 의해 유발된 간손상과 지질과산화를 억제시켰다. 1시간 동안 1.5 mM 농도의 t-BHP 처리는 간세포의 catalase, GSH-Px 및 GSH-Rd 활성을 현저히 감소시켰다. 그러나 0.01 mg/ml 이상 농도의 양파추출물 첨가는 t-BHP에 의해 감소된 catalase, GSH-Px 및 GSH-Rd 활성을 증가시켰으며 특히 catalase 활성은 t-BHP 무첨가군 수준까지 증가시켰다. 또한 hydroxyl radical을 생성하는 Fenton 시약의 존재하에 plasmid DNA를 양파추출물과 함께 배양하였을 때양파추출물은 농도 의존적으로 hydroxyl radical에 의해 유도된 single-strand 절단을 억제하였다. 이상과 같이 간세포 일차배양에서 양파추출물은 t-BHP에 의해 유발된 간독성, 간세포 생존율 감소, 지질과산화를 농도 의존적으로 억제시켰고 또한 t-BHP에 의해 억제된 GSH-Px, GSH-Rd 및 catalase의 활성을 증가시켰다. 이와 같이 양파추출물의 간보호 및 항산화 효과는 항산화 효소, 특히 catalase의 활성 증가와 hydroxyl radical에 의해 유도된 산화억제 및 이에 따른 지질과산화 억제에 기인하는 것으로 사료된다.

• 대한본초학회지
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• 제26권1호
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• pp.111-117
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• 2011

Objectives : The present study was designed to investigate effects of mixed extract from korean medicinal herbs (MIX) on oxidation/reduction reaction-related and aging-related enzyme in vitro. Methods : We performed MTT assay, collagenase inhibition assay, elastase inhibition assay, tyrosinase inhibition assay, DPPH free radical scavenging assay, SOD-like activity and xanthine oxidase inhibition assay. Results : Recently, many studies have reported that elastin is also involved in inhibiting or repairing wrinkle formation, although collagen is a major factor in the skin wrinkle formation. The MIX showed 97% inhibition of collagenase activity, and 64% inhibition of elastase activity at 1 mg/ml concentration of MIX, next only to positive control, which indicate good efficacy for anti-wrinkle ingredient. Also it's treatment showed 34% inhibition of tyrosinase activity, to relate whitening effect, at the same dose of MIX. Antioxidant activities were determined by DPPH radical scavenging, xanthine oxidase (XO) inhibiting activity and SOD-like activity. Also these scavenging, XO-inhibiting and SOD-like activities were measured in 91%, 80%, and 63% inhibition, respectively, at a treated dose of 1 mg/ml, compare to control. Conclusions : These results suggest that possibility of mixed korean medicinal herbs as a functional ingredient for anti-wrinkle and whitening, anti-oxidation and anti-aging cosmetic formula.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제19권8호
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• pp.792-802
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• 2009

Antimicrobial peptides (AMPs) are considered to be a promising alternative to conventional antibiotics for future generations. We identified four novel hexapeptides with antimicrobial activity: KCM11 (TWWRWW-$NH_2$), KCM12 (KWRWlW-$NH_2$), KCM21 (KWWWRW-$NH_2$), and KRS22 (WRWFIH-$NH_2$), through positional scanning of a synthetic peptide combinatorial library (PS-SCL). The ability of these peptides to inhibit the growth of a variety of bacteria and unicellular fungi was evaluated. KCM11 and KRS22 preferentially inhibited the normal growth of fungal strains, whereas KCM12 and KCM21 were more active against bacterial strains. Bactericidal activity was addressed in a clear zone assay against phytopathogenic bacteria, including Pectobacterium spp., Xanthomonas spp., Pseudomonas spp., etc. KCM21 showed the highest activity and was effective against a wide range of target organisms. Application of KCM21 with inoculation of Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum on detached cabbage leaves resulted in an immune phenotype or a significant reduction in symptom development, depending on the peptide concentration. Cytotoxicity of the four hexapeptides was evaluated in mouse and human epithelial cell lines using an MTT test. The results revealed a lack of cytotoxic effects.

• Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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• 제11권2호
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• pp.160-163
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• 2006

A total number of 31 types of seaweed were assessed with regard to their effects on the proliferation of mouse spleen and thymus cells in a culture, using an MTT reduction assay. Acetone:dichloromethane (1:1) extracts of three seaweed plants: Derbesia marina, Sargassum sp., and Hisikia fuziformis, exhibited significantly positive effects on the survival of mouse spleen and thymus cells in vitro. The acetone:dichloromethane (1:1) extracts of Sargassum sp., in particular, much more potent effects on thymus cell activation than did any of the other types of seaweed. However, the methanol extracts of Sargassum ringgoldianium and Chondrus crispus exerted a stimulatory influence only on the proliferation of mouse spleen cells, whereas the methanol extracts of Grateloupia lanceolata exhibited significant cell proliferation properties in both spleen and thymus cells.

• 한국식품조리과학회지
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• 제15권3호
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• pp.231-237
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• 1999

닥나무 추출물의 항암효과를 검토하기 위하여 닥나무뿌리 껍질 methanol 추출물로부터 얻은 분획물(hexane, chloroform, ethylacetate, butanol, aqueous 층)들의 0.05∼1.0mg/ml 농도에 대해서 MTT assay를 통한 세포독성 측정 및 암세포 증식억제 효과를 in vitro로 검색하였고, in vivo에서 BALB/c mouse를 이용한 고형암 성장저지 실험 및 비장 장기 중량변화의 항암실험을 행하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 세포독성 실험에 의한 MTT assay 결과 모든 분획물들은 농도 의존성으로 효과가 나타났으며 1.0 mg/ml 농도에서 ethylacetate층은 sarcoma 180 cell에 대하여 75.7%의 가장 높은 세포독성 효과를 나타내었고 그 다음 aqueous, hexane, butanol, chloroform 층 순으로 각각 62.7%, 58.7%, 52.6%, 40.1%의 효과를 보였다. 각 분획물들에 의한 sarcoma 180 cell에 증식억제 효과는 배양일(1, 2, 3, 6일)이 증가함에 따라 암세포수는 증가하였으며 처음 1일째에 암세포 증식억제가 가장 많이 되었다. 1.0mg/ml 농도로 시료를 첨가하여 6일간 배양했을 때 ethylacetate 층은 60%의 억제율로 가장 현저 한 활성을 보였고 aqueous(42%), hexane(31%), butanol(30%), chloroform(19%)층 순으로 암세포 증식억제율을 나타내었다. 또한 암세포 증식에 대한 현미경 관찰을 해 본 결과 ethylacetate층은 대조군에 비하여 암세포 증식억제 정도와 형태 변화가 두드러지게 나타났다. BALB/c mouse에서 sarcoma 180 cell에 대한 각 분획물들의 고형암 성장저지효과는 1.0mg/kg으로 시료투여했을 때 ethylacetate 층은 대조군에 비하여 41%의 유의적인 저지율을 나타냈으며(p<0.05), 그 다음은 유의적이지는 않으나 aqueous 층 처리구가 39%,의 저지율을 나타내었다. 비장의 체중에 대한 중량변화는 대조군의 경우 1.08%인데 비해, ethylacetate층 처리군은 2.10%로 증가하였고 나머지 처리군에서는 대조군과 차이를 나타내지 않았다(p<0.05). 한편, mouse의 체중 변화는 대조군과큰 차이가 없었으므로 시료 추출물로 인한 체중 및 장기의 독성 문제는 없을 것으로 사료된다. 이상의 연구 결과로 닥나무 뿌리 껍질 methanol 추출물로부터 얻은 분획물중 ethylacetate와 aqueous 층은 세포독성 효과와 암세포 성장억제 효과 및 고형암 성장 저지 효과가 크게나타났으며, 체중에 대한 면역관련 장기인 비장의 중량증가로부터 면역계 활성과도 관계가 있을 것으로 사료된다. 따라서 닥나무 뿌리 껍질의 효능이 큰 분획물로부터 항암활성 물질을 분리 정제하고 기전확립의 연구가 앞으로 더욱 보충되어야 할 것이며, 암예방을 위한 기능성 식품 및 치료제의 개발에 대한 가능성 확인을 본 연구를 통하여 확인할 수 있었다.

• Food Science and Biotechnology
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• 제17권2호
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• pp.343-348
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• 2008

In this study, antioxidant activity of methanol extract of Glycyrrhiza uralensis Fisch (GUE) against $H_2O_2$-induced DNA damage in human leucocytcs and cell death in PC12 cells was determined. The effect of GUE on $H_2O_2$-induced DNA damage in human leucocytcs was evaluated by the comet assay, where GUE ($1-50\;{\mu}g/mL$) was a dose dependent inhibitor of DNA damage induced by $H_2O_2$. The protective effect of GUE against $H_2O_2$-induced damage on PC12 cells was investigated by MTT reduction assay and lactate dehydrogenase release assay. A marked reduction in cell survival induced by $H_2O_2$ was significantly prevented by $1-50\;{\mu}g/mL$ of GUE. The enzyme activity of caspase-3 was elevated in $H_2O_2$-treated PC12 cells, while preincubation with GUE for 30 min inhibited $H_2O_2$-induced caspase-3 activation in a dose-dependent manner. In conclusion, GUE ameliorates $H_2O_2$-induced DNA damage in human leucocytes and has neuroprotective effect by preventing cell death in PC12 cell, suggesting that GU may be a potential candidate for novel therapeutic agents for neuronal diseases associated with oxidative stress.

• 대한본초학회지
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• 제22권4호
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• pp.81-86
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• 2007

Objectives : The purpose of this study is to examine the antioxidant activity in the germ cells of the extract of Rehmanniae Radix Preparat (RR). Methods : The extract was studied for diphenyl-picryl-hydrazyl (DPPH) radical scavenging activity, GC-1 cell viability by a modified MTT assay, the effects on H2O2-induced cytotoxicity by MTT assay and lipid peroixidation by malondialdehyde (MDA) formation, respectively. Results : The results showed that the extract scavenged DPPH radical in a dose-dependent manner by up to 43.1%. The extract at concentrations of 100 ${\mu}g/ml$ showed peak level of 136.5% in growth of GC-1 cell. The hydrogen peroxide-induced cytotoxicity was blocked by the extract at concentrations of 10, 50 and 100 ${\mu}g/ml$. The extract (50 and 100 ${\mu}g/ml$) also displayed a dose-dependent reduction of MDA formation on hydrogen peroxide-induced lipid peroxidation. Conclusions : In conclusion, the extract of Rehmanniae Radix Preparat has strong antioxidant activity.