• 제목/요약/키워드: MTT method.

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황금약침액(黃芩藥針液)이 LPS로 유도(誘導)된 RAW 264.7 대식세포(大食細胞)에서의 항염증효과(抗炎症效果) (Effects of Scutellariae Radix-acupuncture solution On Anti-inflammatory in RAW 264.7 macrophages)

  • 최영광;박성호;서일복;김호현;김정선;김이화
    • 대한약침학회지
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    • 제6권3호
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    • pp.5-14
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    • 2003
  • Objective : Recently, Herbal-acupuncture therapeutics has been used for the treatment of inflammatory diseases such as rheumatoid arthritis. Especially, we have been interested in chemical mediators concerned with inflammation such as prostaglandin, cytokine, nitric oxide. The purpose of this study is investigated that the effect of Scutellariae Radix-acupuncture solution in lipopolysaccharide-stimulated RAW 264.7 macrophages, performed several expeimental items : those are prostaglandin E. nitric oxide and cyclooxygenase-2. Method : The cytotoxicity of Scutellariae Radix-acupuncture solution in RAW 264.7 macrophages were measured by MTT-based cytotoxicity assay. In order to observe cyclooxygenase-2 mRNA expression in lipopolysaccharide-stimulated RAW 264.7 macrophages, RT-PCR was used. Prostaglandin $E_2$ formation and nitric oxide production was measured by competitive enzyme immunoassay and Griess assay. Results : 1. The MTT assay demonstrated that cytotoxic effect of Scutellariae Radix-acupuncture solution in RAW 264.7 macrophages were not appeared before concentration of 5mg/mL 2. Scutellariae Radix-acupuncture solution inhibited cyclooxygenase-2 mRNA expression in lipopolysaccharide-treated RAW 264.7 macrophages. 3. Scutellariae Radix-acupuncture solution inhibited nitric oxide production in lipopolysaccharide-treated RAW 264.7 macrophages. 4. Scutellariae Radix-acupuncture solution inhibited prostaglandin $E_2$ formation in lipopolysaccharide-treated RAW 264.7 macrophages. Conclusion : On the basis of these results, It was shown that Scutellariae Radix-acupuncture solution is significantly able to inhibit the production of $PGE_2$ and NO, as well as COX-2 mRNA expression. Our results may provide new mechanism by which Scutellariae Radix-acupuncture solution accounts for its beneficial effect on accelerating wound healing and anti-inflammation.

마늘 첨가 막걸리의 품질특성 및 항알레르기 효과 (Quality Properties and Anti-allergic Effect of Makgeolli Added with Garlic)

  • 고유진;강상동;강상태;류충호
    • 생명과학회지
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    • 제21권11호
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    • pp.1592-1598
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    • 2011
  • 본 연구에서는 다양한 기능성 및 생리활성 물질을 함유하고 있는 마늘의 활용방안을 제시하고 마늘 생산 농가의 안정적인 소득과 수급조절 및 건강 기능 증진을 위하여 마늘을 이용한 마늘 첨가 막걸리를 개발하고 품질특성 및 항알레르기 효과를 확인하였다. 사용된 마늘의 수분함량은 62.44%, 총당 15.31%, 회분 1.12%, pH 6.4, 총산은 1.03%로 마늘 첨가 막걸리의 총당, 환원당 함량, 총산 및 아미노산도는 다소 높게 나타났고 알코올 함량에 있어서 대조구에 비해 1%정도로 높게 나타났다. 주요 유기산은 lactic, citric, malic, oxalic 및 succinic acid로 나타났으며 이 중 lactic acid 함량이 203.2%로 대조구에 비해 약 16배 정도로 높게 나타났다. 마늘 첨가 막걸리의 total polyphenol 함량, DPPH 자유라디칼 소거 활성 및 total thiosulfate는 대조구 막걸리에 비해 다소 높게 나타났다. 이는 마늘에 함유되어 있는 유기 황 화합물 등에 의해 함량이 높게 나타난 것으로 사료된다. MTT 분석 결과 유의적인 차이를 보이지 않아 마늘 첨가 막걸리의 세포 독성은 없는 것으로 나타났으며, 알레르기 유발 및 예방효과를 확인하기 위한 histamine 유리량을 측정한 결과 마늘 첨가 막걸리와 대조구 막걸리 모두 histamine 유리억제효과를 보였으며 마늘 첨가 막걸리에서 보다 높은 효과를 확인할 수 있었다. 관능검사 결과 색에 대한 기호도는 특유의 색을 유지하여 대조구에 비해 다소 낮게 나타났지만, 맛, 향 및 전체적인 기호도는 대조구 막걸리에 비해 마늘 첨가 막걸리가 우수한 것으로 나타났다. 따라서 마늘 첨가 막걸리는 국내 막걸리 시장의 다양성을 증대시키고 우수한 기능성으로 막걸리 시장의 활성화를 이어 갈 수 있을 것으로 사료된다. 또한 한국의 전통주로 자리매김하기 위해서 저장성 연구 및 향기성분 분석, 제성기술 확립 등 연구가 수반되어야 할 것이다.

한방목초액의 항산화 및 항 아토피 효과 (Anti-oxidation and Anti-atopic Dermatitis Effect of Herbal Wood Vinegar)

  • 김타곤;노화정;전상희;김강배;김동욱
    • Korean Chemical Engineering Research
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    • 제48권6호
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    • pp.690-694
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    • 2010
  • 본 연구에서는 대나무, 계피, 생강 등 8종의 한약재를 포함한 한방목초액의 소재특성을 시험하여 화장품 및 피부질 환용 의약품에의 응용가능성을 조사하였다. 목초액의 항산화력은 DPPH 자유라디칼 소거법으로 측정되었으며 $50{\mu}g/ml$의 농축목초액 농도에서 97%의 매우 높은 항산화능을 보여주었다. 목초액의 항균력은 원판확산법으로 시험되었으며, 피부상재균인 Staphylococcus aureus에 대해 우수한 항균력을 보여주었다. 목초액의 미백효과는 tyrosinase 활성억제시험법으로 측정되었으며 대조군인 비타민 C에 비해 매우 낮아서 미백효과는 미미하였다. 목초액의 안전성 시험은 MTT assay에 의해 측정되었으며, 세포 독성이 비교적 높은 것으로 나타났다. 목초액의 화장품소재 안정성 시험 결과 색, 향, 외관 및 pH에서 큰 변화가 없어서 매우 안정하였다. 무모생쥐를 이용한 항 아토피 시험결과, 목초액은 DNCB에 의해 유도된 피부염증을 9일 째 거의 정상상태로 회복시켰으며, 피부내 IgE의 농도도 대조군에 비해 30% 감소시켜 항 아토피 효과가 우수한 것으로 나타났다. 따라서 목초액은 항산화력, 항균력 및 항 아토피 효과가 우수하여 화장품소재나 피부질환치료제로서의 응용 가능성이 큼을 알 수 있었다.

저령추출물의 항암, 항산화 및 항균효과 (Antitumoral, Antioxidant and Antimicrobial Activities of Solvent Ftactions from Grifola umbllatus)

  • 하영득
    • 한국식품저장유통학회지
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    • 제8권4호
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    • pp.481-487
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    • 2001
  • 본 연구에서는 다양한 기능성을 가지는 저령을 80% methanol로 추출한 후 그 농축액을 ehyl acetate와 water로 순차 분획하고, 각 분획물을 이용하여 인간유래 위암세포인 SNU668의 생장 저해 효과와 항산화 효과 및 각종 위장질환의 원인균으로 보고된 H. pylori에 대한 항균활성을 조사하였다. 인간유래의 위암세포인 SNU668에 대한 저해 효과는 methanol fraction 1 mg/$m\ell$의 농도에서 가장 강한 암세포 저해 활성을 보였고, water fraction 1 mg/$m\ell$의 농도에서는 43.9%의 저해 활성을 보였다. 그러나 ethyl acetate fraction에서는 23.7%로 비교적 낮은 저해율을 보였다. 반면에, 성인 남성의 정상 임파구는 분획종류에 관계없이 모두 90% 이상의 높은 생존율을 보였다. 한편, 저령 추출물의 항산화 효과는 생존을 75.2%를 보인 methanol 추출물이 43.7%의 생존율을 보인 water 분획물 보다 높았고, ethyl acetate 분획물은 항산화 효과 역시 가장 낮게 나타났다. H. pylori에 대한 저령의 항균활성은 1mg/disk의 농도에서 80% methanol 추출물 및 모든 분획물에서 H. priori에 대해 항균활성을 나타냈으며, 그중 water 분획물이 12mm의 inhibition zone을 형성하여 가장 우수한 항균활성을 보였다. Methanol 추출물과 ethyl acetate 분획물은 각각 11 및 9.5 mm의 inhibition zone을 형성하였다. H. pylori로부터 분리된 urease의 활성은 urea broth에서의흡광도와 pH의 변화를 조사한 결과, 23$^{\circ}C$에서 반응 1시간 동안 560 nm에서의 흡광도가 0에서 0.93까지 증가하였으며, pH는 7.0으로부터 8.1까지의 증가를 보였다. H.pylori로부터 분리된 urease의 활성은 80% methanol 추출물과 모든 분획물에 의해 억제되었으며, 각 분획물의 억제능은 항균실험 결과와 유사한 유형으로서 역시 10mg/$m\ell$의 농도에서 1시간 후 55%의 억제를 보인 water분획물의 억제능이 가장 우수했다.

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비파(枇杷)의 항암효과에 대한 암세포특이성 검정 (Anticancer Effect of Eriobotrya japonica Lindl by Specificity Test with Several Cancer Cell Lines)

  • 황태익;임현옥;이재와
    • 한국약용작물학회지
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    • 제4권4호
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    • pp.314-320
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    • 1996
  • 비파의 항암효과에 대하여 조사하였다. 비파를 잎 줄기 과실 종자로 나누어 정상세포와 여러 가지 암세포주를 비교하여 특이적으로 암세포를 공격하는지 여부를 MTT방법에 의해서 조사한 결과는 다음과 같다. 1. 비파의 4가지 부위를 MeOH 와 물로 추출하여 정상세포와 암세포 (SNU-1, SNU-C4)에 처리하였다. 이 가운데서 과육의 물추출 분획이 정상세포는 영향이 없이 암세포를 고사시켰다. 2. 과육의 물추출 분획을 Sephadex LH-20으로 분리정제하여 9개의 분획으로 나누어 이 분획들을 사람 정상세포와 7가지 암세포에 처리하였다. 이 9개의 분획중 8번째 분획이 정상세포에 영향을 미치지 않고 유방암, 간암, 위암에 특이적으로 세포독성을 나타냈다. 3. 제 8분획의 생체에서 암치유 효과를 알아보기 위해서 mouse에 복수암을 유발시켜 (10마리) 구강투여하거나 복강에 주사하였다. 암이 유발된 대조구는 10일 부터 13일 사이에 모두 죽었다. 그러나 투여군은 2개월사이에 1마리씩 죽었고 나머지는 모두 생존하였다. 상기는 결과는 비파과육에 는 암세포에 특이적으로 작용하여 세포독성을 나타내는 물질을 가지고 있다는 것을 확인해주었다.

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산수유(Cornus officianalis) 에탄올 추출물의 항산화, 항돌연변이 활성 및 암세포 성장 억제 효과 (Antioxidative, Antimutagenic, and Cytotoxic Activities of Ethanol Extracts from Cornus officianalis)

  • 전연희;김미현;김미라
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제37권1호
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    • pp.1-7
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    • 2008
  • 본 연구에서는 산수유 에탄올 추출물의 항산화능, 항돌연변이 및 항암활성을 분석하여 새로운 생리활성 물질의 탐색과 고부가가치의 기능성식품으로서의 이용 가능성을 알아 보고자 하였다. 산수유 에탄올 추출물의 전자공여능은 농도 의존적으로 증가하여 500 ppm의 농도에서는 합성항산화제인 BHT보다 높았고 천연항산화제인 L-ascorbic acid와 유사하였다. 뿐만 아니라, S. Typhimurium TA100에 대해 산수유 에탄올 추출물은 직접돌연변이원인 4-NQO 사용 시 항돌연변이 효과가 우수한 것으로 나타났다. 또한, 산수유 에탄올 추출물은 $700{\mu}g/plate$ 첨가하였을 때 인체 간암 세포와 자궁경부암 세포의 증식을 모두 78% 이상 억제하였다. 산수유 에탄올 추출물은 비교적 높은 함량의 폴리페놀과 플라보노이드를 함유하고 있어, 이들 물질이 항산화와 항암효과에 영향을 미칠 것으로 사료되었다. 그러나 산수유에는 비타민 C를 비롯한 다른 항산화 성분도 함유되어 있으므로 이들의 항산화성도 추출물의 항산화력에 영향을 주었을 것으로 생각된다. 결론적으로, 산수유 에탄올 추출물은 항산화능과 항돌연변이 활성이 있었으며 인체 간암세포, 자궁경부암 세포 및 대장암 세포에 대해 항암 활성이 있는 것으로 나타나 기능성식품의 소재로서의 이용 가능성을 보여주었다.

폐암 세포주에서 5-Aminolevulinic Acid에 의해 유도된 Protoporphyrin IX의 형광 진단을 위한 In Vitro 연구 (In Vitro Study of Fluorescence Detection for Protoporphyrin IX Induced from 5-Aminolevulinic Acid in Incubated Lung Cancer Cells)

  • 김명화;김현정;이인선;김경찬;이창섭
    • KSBB Journal
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    • 제22권2호
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    • pp.67-72
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    • 2007
  • 형광을 이용한 암 진단을 위해 배양된 정상 폐세포 및 폐암 세포주에 광민감제인 5-ALA를 투여하고 세포 내 외에서 생성된 protoporphyrin IX (PpIX)의 형광을 측정하여 5-ALA 투여의 최적 농도를 조사하였다. 정상 폐세포주 (Hel299) 및 폐암 세포주 (A549, NCI-H460)에 5-ALA를 $0\sim800{\mu}g/mL$ 농도별로 투여하여 24시간 동안 배양한 다음 MTT assay로 세포증식 저해율 및 이때 생성되는 PpIX의 양을 형광의 강도로 측정하였다. 그 결과 Hel299 및 A549에서는 5-ALA의 처리농도가 증가할수록 세포 증식의 저해율이 증가하였으나 NCI-H460에서는 세포 증식이 저해되지 않았다. 그리고 폐암세포인 A549와 NCI-H460에 대한 5-ALA의 최적농도는 $100{\mu}g/mL$이며, 이때의 형광 (emission) 스펙트럼은 여기 파장이 410 nm일 때 세포 외에서는 615.8 nm와 660.8 nm, 616.7 nm와 660.2 nm, 세포 내에서는 603.2 nm와 661.4 nm, 603.5 nm와 661.4 nm에서 각각 형광 봉우리가 관찰되었다. 또한 PpIX를 형광 강도로 측정하면, PpIX는 정상세포에서는 낮은 농도로 축적이 되는 반면에 암세포에서 높은 농도로 축적되었으며, 세포 외보다는 세포 내에서 더 높은 농도로 축적됨을 알 수 있었다.

생약의 간암세포에 대한 항종양효과와 항암제와의 상승작용 (Studies on Antitumor Effect and Synergistic Action of Natural Products with Anticancer drugs against Hepatic Tumors)

  • 박경식;김성훈;김병탁
    • 혜화의학회지
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    • 제4권1호
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    • pp.211-223
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    • 1995
  • 연구배경: 간암은 우리나라에서 암의 사망율 중 2위인데 한방임상에서 간암의 치료에 인진, 포공영, 시호등이 자주 사용되고 있는데 이들 한약의 간암세포에 대한 항종양효과와 간암치료에 사용되는 항암제와의 상승작용을 실험적으로 입증할 필요가 있어 실험에 착수하였다. 방법: in vitro에서 시호, 인진, 포공영 및 포공영 EE층의 인체 간암세포인 PLC(hepatoma), Hep 3B(hepatocellular carcinoma) 및 Hep G2(hepatocellular carcinoma) 등에 대한 세포독성과 간암치료에 다용되는 mitomycin C(MMC), cisplatin(CPT), 5-fluorouracil(5-FU) 등의 항암제와의 상승효과를 MTT법에 의해 측정하였다. 결과: 인진은 비교적 PLC와 Hep 3B에 대하여 항종양효과가 있고, 시호는 Hep G2에 대해 보다 효과적이고, 항암제중 MMC와의 상승적 작용이 뚜렷하여 앞으로 인진으로 부터 항암활성물질의 분리가 필요하며 한약과 항암제와의 병용투여 가능성을 제시한다고 사료된다.

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산삼의 배양 및 그 응용에 관한 연구

  • 신미희
    • 대한화장품학회지
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    • 제27권2호
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    • pp.45-56
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    • 2001
  • 산삼은 고유의 생약으로 민간 또는 한방에서 효능을 인정받아 왔으나 산삼의 희귀성으로 인하여 산삼에 대한 연구가 활발하지 못하였다. 따라서 본 실험은 식물 조직 배양 기술을 이용하여 산삼 부정근을 대량으로 배양하고 추출하여 화장품 원료로서의 적용 가능성을 연구하였다. 본 실험에서 사용한 산삼 부정근은 강원도 평창에서 채취한 110년생 천종삼으로 산삼으로부터 유래된 캘러스에서 부정근을 유도한 후 절취하여 생물 배양기에서 액체 현탁액으로 대량 배양하였다. 약 5주간의 배양기간을 거쳐 증식된 산삼 부정근을 세척하여 건조시킨 후 추출하여 산삼 부정근 추출물을 얻었다. 산삼 부정근 추출물의 미백 효과 측정을 위하여 tyrosinase 억제 실험과 DOPA 자동산화 그리고 B-16 melanoma cell를 이용한 미백 실험을 실시하였고 유해성 검증을 위해서 안전성 실험과 세포 독성 실험을 실시하였다. in vitro 상의 유해성 실험은 transformed mouse fibroblast L929를 배양하여 NR assay, MTT assay를, in vivo 상의 안전성 실험은 인체 첩포를 이용한 Patch test를 실시하여 피부 반응의 관찰을 통해서 자극 혹은 알레르기성 반응의 발생여부를 실시한 결과 무해하였으며 melanin 생성 억제 실험 결과 미백효과가 우수한 것으로 나타났다.

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정상 및 암 세포주에서의 5-Aminolevulinic Acid에 의해 유도된 Protoporphyrin IX의 형광 검출을 위한 In Vitro 연구 (In Vitro Study of Fluorescence Detection for Protoporphyrin IX Induced from 5-Aminolevulinic Acid in Cancerous and Normal Cells)

  • 김명화;김현정;이인선;김경찬;이창섭
    • KSBB Journal
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    • 제21권3호
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    • pp.171-174
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    • 2006
  • 형광을 이용한 암 진단을 위해 배양된 정상 및 암세포주에 광민감제인 5-ALA를 투여하고 세포 내 외에서 생성된 Protoporphyrin IX(PpIX)의 형광을 측정하여 5-ALA 투여의 최적농도를 조사하였다. 정상 간세포주(Chang) 및 자궁경부암 세포주(HeLa)에 5-ALA를 농도별로 투여하여 ALA에 의해 유도된 PpIX의 생성을 확인하고, MTT assay로 세포생존율을 측정하였다. 배양된 cell에 5-ALA를 투여한 후 24시간 동안 배양함으로써 생성되는 PpIX의 양은 형광의 강도로 측정하였다. HeLa 세포주에 대한 5-ALA의 최적농도는 $50{\mu}g/ml$이며, 이 때의 형광(emission) 스펙트럼은 여기 파장이 410 nm일 때 602.3 nm, 659.9 nm에서 형광 봉우리가 관찰되었다. PpIX의 형광 강도를 측정한 결과, PpIX는 정상세포에서는 낮은 농도로 축적이 되는 반면에 암세포에서 더 높은 농도로 축적되었으며, 세포 외보다는 세포 내에서 더 높은 농도로 축적됨을 알 수 있었다.