• Title/Summary/Keyword: MTT assay

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배풍등 분획물의 항균 및 암세포 증식 억제효과 (The Effects on Antimicrobial and Cytotoxicity of Solanum Iyratum Fractions)

  • 신미옥
    • 생명과학회지
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    • 제15권6호
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    • pp.948-954
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    • 2005
  • 민간에서 만성간염, 수종, 옹종, 습진, 류마치스성 관절통, 소변분리, 말라리아, 황달을 치료하는데 사용하며, 해열 진통제로 약용하고 있는 배풍등을 metanol (SLM)로 먼저 추출하고 이를 hexane (SLMH), ethylether (SLMEE), ethylacetate(SLMEh), butanol (SLMB) 및 수층 (SLMA) 등 다섯가지의 각 용매별로 분획하여 배풍등의 항균 및 항발암 효과를 연구하였다. 먼저 paper disc method를 이용하여 배풍등의 항균효과를 알아보았다. P. mirabilis, S. aureus, S. marcescens 및 B. substilis의 4가지 사용균주에 배풍등의 각 분획물을 처리한 결과, 모든 균주에서 SLMEA층에서 가장 높은 항균 활성 효과를 나타내었고, 그 다음으로는 SLMEE에서 항균 활성 효과를 나타내었다. 배풍등의 암세포 증식억제 효과(cytotoxicity)를 MTT assay로 실험한 결과, 4종의 암세포주 HeLa, MCF-7, HT-29 및 HepG2 모두 배풍등의 ethylether 분획층인 SLMEE총에서 가장 높은 암세포 증식억제 효과를 보였으며, 암예방 QR유도 활성을 HepG2 세포주를 이용하여 실험한 결과에서도, 다른 분획층에 비해 비극성 용매층인 SLMEE층에서 유의적으로 QR유도 활성을 증가시키는 것으로 나타났다. 이상의 실험 결과를 미루어 볼 때, 극성과 비극성을 둘 다 가지는 SLMEA층에서의 항균활성 물질과 비극성 용매층인 SLMEE 층에서의 암 예방 물질의 단계적인 분리 동정을 통한 생리활성 물질의 개발이 기대되어진다.

발프로익산이 인체 테논낭 섬유아세포의 생존에 미치는 영향 (Effects of Valproic Acid on the Survival of Human Tennon's Capsule Fibroblasts)

  • 이시은;김재우
    • 대한안과학회지
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    • 제59권11호
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    • pp.1056-1061
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    • 2018
  • 목적: 발프로익산이 배양된 인체 테논낭 섬유아세포의 생존에 미치는 영향에 대해 알아보고자 하였다. 대상과 방법: 일차배양한 섬유아세포에 0, 0.25, 0.5, 1.0 mM 발프로익산과 0, 1.0, $2.5{\mu}g/mL$ 미토마이신 C에 각각 또는 동시에 5일간 노출시킨 후 MTT (3-[4, 5-dimethylthiazol-2-yl]-2, 5-diphenyltetrazolium bromide) assay를 이용하여 세포의 생존을 측정하였고, annexin-V/propidium iodide 이중염색 후 유세포 분석을 이용하여 세포고사의 정도를 측정하였다. 결과: 발프로익산은 농도에 비례하여 섬유아세포의 생존을 유의하게 저하시켰으며, 미토마이신 C를 추가한 경우 섬유아세포의 생존을 더욱 저하시켰다. 두 약제 모두 섬유아세포의 세포고사를 유발하였으나 발프로익산은 미토마이신 C에 비해 세포고사를 적게 유발하였다. 결론: 발프로익산은 섬유아세포의 생존을 저하시키며 세포고사를 유발한다. 또한 미토마이신 C를 병용한 경우 섬유아세포에 대한 항증식효과가 더 나타날 것으로 생각된다.

내탁천금산(內托千金散)이 RAW 264.7 대식세포주에서 항염증 활성에 미치는 영향 (Effects of Naetakcheongeum-san on Anti-inflammatory Activities in RAW 264.7 cells)

  • 김태준;김용민;김희택
    • 한방안이비인후피부과학회지
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    • 제31권1호
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    • pp.12-21
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    • 2018
  • Objectives : Inflammation is one of the self-protective abilities against tissue injury, and it has clinical symptoms like redness, heat, swelling, pain, and loss of function. The purpose of this study is to examine inhibitory effects of Naetakchunkeum-san (NTCKS) on nitric oxide (NO), Prostaglandin E2 (PGE2), inducible NOS (iNOS), cyclooxygenase-2 (COX-2), and phosphorylation of extracellular signal-regulated kinase 1/2 (ERK1/2), which play a major role in inflammatory response. Methods : The experiment was performed using Raw 264.7 cells pretreated with NTCKS extracts. Cell viability was determined by MTT assay. To evaluate anti-inflammatory effects of NTCKS, we examined NO and $PGE_2$ production in LPS-induced macrophages. We also investigated effects of NTCKS on iNOS, Cox-2, and ERK1/2 expression using western blot. Results : In MTT assay, no cytotoxicity of NTCKS (50, 100, 150, $200{\mu}g/ml$) on RAW 264.7 cell was found. LPS-induced NO production was decreased after treatment with NTCKS (150, $200{\mu}g/ml$)(p<0.05). $PGE_2$ was decreased after treatment with NTCKS (150, $200{\mu}g/ml$)(p<0.05). NTCKS inhibited LPS-induced expressions of iNOS and COX-2 in a dose-dependent manner. Increased phosphorylation of ERK1/2 by LPS was decreased by NTCKS in a dose-dependent manner. Conclusions : According to above experiments, NTCKS may be applied to inflammatory diseases such as atopic dermatitis, rheumatoid arthritis, and inflammatory bowel disease.

만성폐쇄성폐질환에서 상피중간엽이행 조절을 통한 Celecoxib의 폐 손상 개선효과 (Effect of Celecoxib on Lung Injury Improvement by Controlling Epithelial-Mesenchymal Transition(EMT) in Chronic Obstructive Pulmonary Disease(COPD))

  • 이선경
    • 융합정보논문지
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    • 제11권11호
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    • pp.248-255
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    • 2021
  • 본 연구는 만성폐쇄성폐질환(COPD)의 동물 모델을 이용하여 Celecoxib의 폐 손상 개선효과를 연구하였다. COPD는 LPS와 담배연기추출물(CSE)로 유도하여 in vitro와 in vivo에서 병행 연구하였다. In vitro는 인간 섬유아세포(MRC5)에서 MTT assay, real-time PCR를 하였고 in vivo는 mRNA 발현, 기관지폐포세척액(BALF), collagen content, 단백질 발현을 확인하였다. 실험을 통해 Celecoxib는 BALF에서 염증세포 수의 감소와 사이토카인, soluble protein의 축적을 감소시켰고 동물모델에서는 체중과 폐 무게를 감소시켰으며, 폐 콜라젠 축적도 개선하였다. 또 웨스턴 블로팅과 real-time PCR을 통해 EMT 표지자의 감소를 확인하였다. 결과적으로 Celecoxib는 EMT를 조절하여 LPS+CSE로 유도된 COPD의 폐 손상에서 개선제로 작용할 수 있을 것으로 사료된다.

키토산을 이용한 탄진수 응집제 개발 및 평가 (Development and Evaluation of Coal-dust Water Flocculant using Chitosan)

  • 홍웅길;나재운;정경원
    • 공업화학
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    • 제32권2호
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    • pp.139-142
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    • 2021
  • 석탄 화력발전소는 석탄을 주원료로 사용하고 있으며, 석탄 이동 시에 석탄의 분진 및 자연 발화가 발생하게 되는데, 이를 방지하기 위해 물을 분사하는 작업을 수행한다. 이로 인해 석탄의 분진과 물이 함께 섞여 흘러나오는 일명 '탄진수(coal-dust water)'라고 불리는 폐수가 흘러나와 환경오염을 초래한다. 본 연구에서는 이러한 문제점을 해결하기 위해 미세한 분진까지 응집하여 물을 정화할 수 있는 키토산 기반의 천연 응집제를 개발하고, 그 응용성을 입증하고자 하였다. 탄진수에 다양한 농도의 응집제를 투여하여 최적의 흡착농도가 4 ppm임을 규명하였고, 투과도 및 탄진 제거효율을 통해 개발된 물질의 탄진 응집능이 매우 우수함을 확인하였다. 또한, MTT assay를 통해 응집제의 세포독성을 평가하여 독성이 전혀 없음을 입증함으로써, 본 연구에서 개발된 응집제가 인간 및 자연 생태계에 영향을 주지 않고 효과적으로 탄진을 응집할 수 있는 물질임을 규명하였다.

우슬의 에탄올 추출물이 모발 성장에 미치는 영향 (Effect of ethanol extract from Achyranthis Radix on hair growth)

  • 이미자;최문열;김유진;김미려;유왕근
    • 대한본초학회지
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    • 제36권4호
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    • pp.1-7
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    • 2021
  • Objective : As more and more people are interested in appearance in modern society, the increasing number of hair loss population can have an important impact on psychological and social problems such as depression and inappropriate interpersonal symptoms. Therefore, much research is being done on treatments for alopecia using herbal extracts with relatively few side effects. This study was investigated about the effect of Achyranthis Radix (AR) extract with ethanol solvent on hair growth. Methods : We determined the promoting efficacy of AR-ethanol extract compared with minoxidil (MNXD) on the growth of human hair dermal papilla cells (HDPCs). Cell viability was measured by MTT assay and cell proliferation was confirmed by cell cycle analysis from flow cytometry in HDPCs. Also, we monitored the safe concentration range through MTT assay. And protein expression of hair growth-related genes (insulin-like growth factor 1 (IGF-1), Wnt3a, Protein kinase B (Akt), Extracellular signal-regulated kinase (Erk)) was monitored by western blot. Results : On cell cycle analysis, the G2/M phase was higher than that of the DW group in AR ethanol extract group at 0.05 and 0.1 mg/㎖. All protein expression levels of HDPCs were increased in AR ethanol extract groups and the MNXD group, compared to the DW group, respectively. Conclusion : As mentioned above, AR extract increased cell proliferation and the protein expression of IGF-1, Wnt3a, Akt, Erk in HDPCs. These results suggest that AR ethanol extract has promoted hair growth and it might be potential hair growth supplement.

ABT-737 ameliorates docetaxel resistance in triple negative breast cancer cell line

  • Hwang, Eunjoo;Hwang, Seong-Hye;Kim, Jongjin;Park, Jin Hyun;Oh, Sohee;Kim, Young A;Hwang, Ki-Tae
    • Annals of Surgical Treatment and Research
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    • 제95권5호
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    • pp.240-248
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    • 2018
  • Purpose: This study aimed to validate the synergistic effect of ABT-737 on docetaxel using MDA-MB-231, a triple negative breast cancer (TNBC) cell line overexpressing B-cell lymphoma-2 (Bcl-2). Methods: Western blot analysis was performed to assess expression levels of Bcl-2 family proteins and caspase-related molecules. Cell viability was assessed by 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay. Cell cycle distribution was determined by flow cytometry analysis. Benzyloxycarbonyl-Val-Ala-Asp(OMe)-fluoromethylketone (z-VAD-fmk) was used for pretreatment to assess the role of caspases. Results: Cell viability of MDA-MB-231 after combination treatment with ABT-737 and docetaxel was significantly lower than that after docetaxel or ABT-737 monotherapy based on MTT assay (both P < 0.001), with a combination index of 0.41. The proportion of sub-G1 population after combination treatment was significantly higher than that after docetaxel or ABT-737 monotherapy (P = 0.001, P = 0.003, respectively). Pretreatment with z-VAD-fmk completely restored cell viability of MDA-MB-231 from apoptotic cell death induced by combination therapy (P = 0.001). Although pro-caspase-8 or Bid did not show significant change in expression level, pro-casepase-9 showed significantly decreased expression after combination treatment. Cleaved caspase-3 showed increased expression while poly (ADP-ribose) polymerase cleavage was induced after combination treatment. However, hypoxia-inducible factor 1-alpha and aldehyde dehydrogenase 1 totally lost their expression after combination treatment. Conclusion: Combination of ABT-737 with docetaxel elicits synergistic therapeutic effect on MDA-MB-231, a TNBC cell line overexpressing Bcl-2, mainly by activating the intrinsic pathway of apoptosis. Therefore, adjunct of ABT-737 to docetaxel might be a new therapeutic option to overcome docetaxel resistance of TNBCs overexpressing Bcl-2.

시스플라틴과 지방산을 결합한 퓨전 항암제 (Fusion anti-cancer drugs of cisplatin analogue and fatty acids for multi-targeted cancer treatment)

  • 변홍주;이향렬
    • 한국응용과학기술학회지
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    • 제35권4호
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    • pp.1386-1392
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    • 2018
  • 시스플라틴은 지난 몇 십년간 가장 많이 사용되고 있는 항암제 중 하나이다. 2가의 시스플라틴의 가장 큰 단점은 암세포 뿐만 아니라 정상세포도 공격하여 부작용을 나타낸다. 본 연구에서는 이러한 단점을 줄이기 위해 목표로 한 타겟을 공격하여 빠른 시간 내에 암세포를 죽일 수 있는 4가의 백금화합물 3과 4를 합성하였다. 합성된 $Pt(IV)-Bu_2$ 3 and $Pt(IV)-Val_2$ 4는 NMR과 질량분석기를 통하여 구조를 확인하였다. 합성된 Pt(IV) 화합물 3과 4는 위암세포주인 MCF-7을 대상으로 한 MTT assay를 통해 항암효과를 조사하였다. 그 결과 시스플라틴은 39%, $Pt(IV)-Bu_2$ 3와 $Pt(IV)-Val_2$ 4는 $50{\mu}M$ 농도에서 각각 54%와 84%의 세포사멸을 보였다.

메틸말리올라이드의 NRF2/ARE 유도를 통한 피부 세포 보호 효과 (Skin Protective Effect of Methylated Marliolide through Induction of NRF2/ARE)

  • 이준;김기성;이현기;박창호;구민수;금영삼
    • 대한화장품학회지
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    • 제44권4호
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    • pp.375-379
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    • 2018
  • 본 연구진은 메틸말리올라이드가 인간 피부 세포주인 HaCaT 세포에서 NRF2를 유도하고 이를 통하여 항산화 효과를 나타내는지 알아보았다. MTT assay를 통하여 메틸말리올라이드는 $10{\mu}M$ 농도에서 24 h 동안 HaCaT 세포에 처리하여도 HaCaT 세포 독성을 나타내지 않는 것을 확인하였다. 본 연구진이 구축한 HaCaT-ARE-GFP-luciferase 세포에 메틸말리올라이드를 처리하고 루시퍼라아제 활성을 측정한 결과 메틸말리올라이드는 양성 대조군인 레스베라트롤보다 ARE 결합에 따른 루시퍼라아제 활성을 더욱 강하게 증가시키는 것을 확인하였다. 또한 HaCaT 세포에 메틸말리올라이드 처리 시 NRF2에 의하여 유도되는 항산화 단백질인 HO-1과 NQO1 mRNA 및 단백질 발현이 통계적으로 유의하게 증가하였다. 마지막으로 메틸말리올라이드는 HaCaT 세포에서 TPA에 의해서 유도된 DNA 및 지질의 산화를 강력하게 억제하였다. 결론적으로 본 연구는 메틸말리올라이드가 NRF2 유도를 통하여 피부 산화적 스트레스를 억제하며 이는 메틸말리올라이드가 신규 항산화 화장품의 소재로 적합하다는 것을 시사한다.

Surface characteristics and bioactivity of minocycline-treated Ti-6Al-4V alloy

  • Lee, Jung-Hyuk;Sun, Young-Gon;Na, Eui-Ri;Moon, Jong-Wook;Kim, Young-Joon
    • 구강생물연구
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    • 제42권4호
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    • pp.187-197
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    • 2018
  • Chemical agents such as minocycline (MC) and citric acid (CA) were suggested in the treatment of contaminated implant surface. In this study, MC-HCl treatment was performed to enhance surface characteristics of titanium alloy surface. The purpose of this study was to assess the characteristics and the biocompatibility of Ti-6Al-4V surface treated by MC. Alpha-beta titanium alloy (Ti-6Al-4V) samples were prepared and they were divided into 6 groups according to chemical concentration and treatment time. These groups include 1) group I, non-treated smooth titanium alloy; 2) group II, MC 1.5 mg/mL for 1 hour; 3) group III, MC 1.5 mg/mL for 24 hours; 4) group IV, MC 15 mg/mL for 10 minutes; 5) group V, MC 100 mg/mL for 5 minutes; 6) group VI, pH1 CA for 3 minutes. The analysis of the surface characteristics of MC-treated titanium alloy was executed using scanning electron microscopy, roughness test, and X-ray photoelectron spectroscopy (XPS). Cell adhesion and MTT assay was done using MC3T3 cell. Titanium surfaces treated with MC indicated a more smoothened surface microstructure. For group II and III, the new peaks of rutile TiO2 were found. Group II and V have more basic group of Ti-OH form in XPS. In MTT assay, all MC-treated groups showed significantly higher cell viability compared to control. The surface roughness, crystal structure, surface hydrophilicity, cell viability of smooth titanium surface was improved by MC treatment. Compared with the control experiment and CA-treated group, smooth titanium surface treated with MC showed improved surface characteristics and cell biocompatibility.