석류는 오래전부터 임상치료 및 식품원료로 사용되었으며 많은 피토에스트로겐 성분을 함유하고 있다. 그 성분으로는 에스트론, 에스트라디올, 에스트리올, 베타-시토스테롤, 엘라그산 등이 였으며 이러한 성분으로 인해 과즙, 껍질, 오일 등은 약한 에스트로겐 활성을 나타낸다고 보고되었으며, 이로 인해 석류는 여성 갱년기 치료용 원료로 많이 사용되고 있다. 그러나 에스트로겐 성분의 존재 유무에 대한 견해의 차이가 나타나고 있어 본 연구는 LC/MS/MS를 이용하여 석류추출물 중의 에스트로겐 분석을 통해 이를 확인하고자 하였으며, 간편하고 정확한 분석법을 모색하고자 하였다. 3개 롯트 시료의 에스트로겐을 분석한 결과, 에스트론 83.5ppb, 에스트라디올 10.9ppb 및 에스트리올 38.6ppb로 검출되었다.
Objectives : Natural products containing bioactive compounds with high antioxidant activity are potentially important sources that can contribute to the improvement of various diseases. Therefore, the aim of this study was to investigate phenolic compounds of Cinnamomum cassia (C. cassia) ethanolic extract (CCEE). And then we evaluated the antioxidant effect. Methods : We used liquid chromatography with tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) to identify the compounds in CCEE. LC-MS/MS was performed in positive ion mode using Shimadzu, Nexera HPLC system and IDA TOF mass system. Solvent A was distilled water and solvent B was acetonitrile as mobile phase. The analysis was performed at a flow rate of 0.5 ml/min, column temperature of 35 ℃ and wavelength of 284 nm. The antioxidant effect of CCEE was analyzed using DPPH (2,2-diphenyl-2-picrylhydrazyl free radical) and ABTS (2,2'-azino-bis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)). In addition, total phenolics and total flavonoids contents were measured to determine antioxidant effects. Results : Analysis using LC-MS/MS identified four compounds: Coumarin, Trans-cinnamaldehyde, Trans-cinnamic acid, and 2-Methoxycinnamaldehyde. Free radicals decreased in a concentration-dependent manner starting from 10 ㎍/ml of CCEE, and decreased to a level similar to Ascorbic acid (AA) from a concentration of 60 ㎍/ml onwards. Conclusions : Based on the findings, CCEE exhibits strong antioxidant activity as evidenced by the presence of Coumarin, Trans-cinnamaldehyde, Trans-cinnamic acid, and 2-Methoxycinnamaldehyde. Consequently, this study suggests that CCEE can serve as an important source of natural antioxidants and can be efficiently used in the management of oxidative stress diseases.
본 연구는 대사증후군 유병률을 조사하고, 대사증후군 대상자들의 영양소 섭취의 특성과 성별과 연령별에 따른 영양소 섭취의 차이를 분석하기 위하여 수행되었다. 1) 대사증후군 유병률은 남자 17%, 여자 4.5%로 전체 평균 10.3%를 나타냈다. 2) 조사대상자의 평균 연령은 정상군 39.0세, 대사증후군 42.8세였으며, BMI는 정상군 22.5 $kg/m^2$보다 대사증후군 대상자등이 27.5 $kg/m^2$로 대사증후군이 유의적으로 높았다(p<0.01). 혈당, 중성지방, 이완기 혈압에서 정상군보다 대사증후군 대상자들이 유의적으로 높았다(p<0.001). 3) 영양소 섭취에서 열량은 정상군 1,699.5 kcal보다 대사증후군 대상자들이 2,047.1 kcal로 유의적으로 높았으며(p<0.001), 동물성지방(p<0.01), 콜레스테롤(p<0.001), 나트륨(p<0.05)의 섭취도 유의적으로 높은 섭취량을 나타냈다. 4) 성별에 따라서 대사증후군 대상자들의 영양소 섭취의 특성은 남녀 모두 정상군보다 대사증후군대상자들의 열량섭취가 높았다. 남자는 지방(p<0.05), 콜레스테롤(p<0.01)에서, 여자는 탄수화물(p<0.05), 단백질(p<0.05)에서 정상군보다 대사증후군 대상자들이 높은 섭취량을 나타냈다. 5) 연령별에 따라서 대사증후군 대상자들의 영양소 섭취의 특성을 살펴보면 30대는 열량, 동물성지방, 콜레스테롤에서, 40대는 지방과 콜레스테롤에서, 50대는 열량, 탄수화물, 식물성지방에서 정상군보다 대사증후군 대상자들이 유의적으로 높은 섭취량을 나타냈다. 본 연구 결과 전체대상자의 영양소 섭취 특성은 총열량, 동물성지방, 콜레스테롤, 나트륨에서 정상군보다 대사증후군 대상자들이 유의적으로 높은 섭취량을 나타냈다.
한약과 기능성식품으로 널리 활용되는 감초의 지표물질인 glycyrrhizin과 liquiritin을 HPLC-MS/MS 로 정성, 정량분석을 실시하였다. 두 가지 지표성분 모두 positive ion mode에서 검출이 가능하였고, precursor ion과 product ion을 조합한 multiple-reaction monitoring (MRM) mode에서 liquiritin은 m/z $436.2{\rightarrow}257.0$로 관찰되었고, glycyrrhizin은 m/z $823.4{\rightarrow}453.4$ 로 각각 검지되었다. 감초 물 추출물을 분무건조기로 건조한 분말에서 glycyrrhizin의 경우 5.8%, liquiritin의 경우 2.3% 각각 함유되어 있었다. 회수율은 103-113%였고, 일간, 일내 정밀도 실험에서 상대표준편차는 0.95-1.8% 였다. 본 실험 조건에서 liquiritin과 glycyrrhizin의 검출한계는 각각 0.4 ng/mL과 0.01 ng/mL 이었다.
A rapid and simple analytical method, using liquid chromatography tandem mass spectrometry (LC-MS/MS), was developed to detect myo-inositol (MI) in infant formulas. For protein removal: acid hydrolysis and lipid removal through organic solvent extraction. The operating conditions for instrumental analysis were determined based on previously reported analogous methods that used LC-MS/MS. Quantitative analysis was used for the detection limit test, infant formula recovery test, and standard reference material (SRM) 1849a to verify the validity of our LC-MS/MS analytical method, which was developed to quantify MI. For validation, the results of our method were compared with the results of quantitative analyses of certified values. The test results showed that the limit of detection was 0.05 mg/L, the limit of quantitation was 0.17 mg/L, and the method detection limit was 17 mg/kg. The recovery test exhibited a recovery between 98.07-98.43% and a relative standard deviation between 1.93-2.74%. Therefore, the result values were good. Additionally, SRM 1849a was measured to have an MI content of 401.84 mg/kg and recovery of 98.25%, which is comparable to the median certified value of 409 mg/kg. From the aforementioned results, we judged that the instrumental analysis conditions and preparation method used in this study were valid. The rapid analytical method developed herein could be implemented in many laboratories that seek to save time and labor.
This study aimed to develop analytical method for 8-isoprostanes as biomarkers for oxidative stress with LC/MS/MS technique and to apply the method for human urine samples. Analyzed compounds for urinary oxidative stress markers were 7 stereo-isomers of prostaglandins and the internal standard (iso-$PGF_{2{\alpha}}-d_4$) was used to adjust the recovery rate. The method for determining urinary iso-$PGF_{2{\alpha}}$ consisted of solid phase extraction and LC/MS/MS detection. Separation of isomers of prostaglandins completed by porous graphitic carbon column and buffer solution. Detection limits for urinary markers of oxidative stress, iso-$PGF_{2{\alpha}}$ with LC/MS/MS were 0.01 ng/ml by S/N ratio 3 and 0.028 ng/ml by calculated as to FDA method. The recovery (92.8~101.9%) and precision (8.8~20.7%) of analysis were feasible for detecting iso-$PGF_{2{\alpha}}$ in real human urine samples. We detected 4 isomers of prostaglandins in human urine samples. Mean (standard deviation) of urinary iso-$PGF_{2{\alpha}}$ concentration were 0.231 (0.117) ng/mg creatinine for smoking group and 0.154 (0.082) ng/mg creatinine for non-smoking group.
A solid phase microextraction (SPME) method in combination with gas chromatography/mass spectrometric techniques was used for the extraction and quantification of 12 selected agrochemical residues in tobacco. The parameters such as the type of SPME fiber, adsorption/desorption time and the extraction temperature affecting the precision and accuracy of the SPME method were investigated and optimized. Among three types of fibers investigated, polyacrylate (PA), polydimethylsiloxane (PDMS) and polydimethylsiloxane-divinylbenzene (PDMS-DVB), PDMS fiber was selected for the extractions of the agrochemicals. The SPME device was automated and on-line coupled to a gas chromatograph with a mass spectrometer. Mass spectrometry (MS) was used and two different instruments, a quadrupole MS and triple quadrupole MS-MS mode, were compared. The performances of the two GC-MS instruments were comparable in terms of linearity (in the range of 0.01$\sim$0.5 $\mu$g/mL) and sensitivity (limits of detection were in the low ng/mL range). The triple quadrupole MS-MS instrument gave better precision than that of quadrupole MS system, but generally the relative standard deviations for replicates were acceptable for both instruments (< 15%). The LODs was fully satisfied the requirements of the CORESTA GRL. Recoveries of 12 selected agrochemicals in tobacco yielded more than 80% and reproducibility was found to be better than 10% RSD so that SPME procedure could be applied to the quantitative analysis of agrochemical residues in tobacco.
우리나라 자생식물인 산호수 (Ardisia pusilla DC)를 기내에서 대량증식하기 위하여 초대배양으로 산호수 경정을 MS, 1/2MS 배지에 BA와 TDZ의 농도를 달리하여 첨가된 배지에 치상하여 배양하였다. 무기염류를 달리한 배지와 생장조절물질 농도를 다르게 한 배지 중 1/2MS 배지에 BA 0.5mL가 첨가된 배지가 신초 수 7개 이상으로 증식이 양호하여 산호수의 초대배양에 적정배지로 나타났다. TDZ를 첨가한 배지에서는 캘러스형성이 과다하여 부정아 형성을 오히려 방해하여 BA 첨가배지보다 신초증식이 양호하지 못하였다. 신초의 증식을 위해 1/2 MS 배지에 BA 0.5 mg와 sucrose의 농도를 달리하여 첨가한 결과, sucrose 농도 20 g/L를 첨가한 배지에서 신초의 증식, 생장 및 다아체 형성이 양호하였다. 형성된 신초의 발근은 1/2MS 배지에 IBA, NAA를 각각 첨가한 배지를 사용하였는데 두 가지 옥신류에서 0.5 mg의 농도에서 신초의 생장과 발근이 양호하였다. 잎과 뿌리가 잘 발달한 유식물체를 원예용 상토에 옮겨 키웠을 때 모든 개체가 정상적인 형태로 성장하였다.
본 연구에서는 쇠고기 및 돼지고기 중 의약품인 메타미졸(metamizol)의 잔류량을 LC/MS/MS를 이용하여 정량하는 방법을 개발하였다. 분석은 그 주대사체인 4-methylaminoantipyrin (MAA)을 대상으로 하였으며, 식육에서 acetonitrile로 추출하여 간단한 정제를 거쳐 multiple reaction monitoring (MRM) 법으로 분석하였다. 정량을 위해 바탕시료에 MAA를 첨가한 식육을 추출하여 검정곡선을 작성하였다. MAA의 검량선의 결정계수는 위 두 가지의 시료에 대해 > 0.99 이었다. 개발된 시험법으로 본 실험실 내에서 6회 반복실험을 실시하였고 타 기관 두 곳에 의뢰하여 실험실간 비교 시험을 실시하였다. 쇠고기 분석의 실험실내 정확도는 78-102% (CV 5.5-9.1%), 실험실간 정확도 98% (CV 14%), 돼지고기 분석의 실험실내 정확도는 95-99% (CV 3.9-5.6%), 실험실간 정확도는 111% (CV 13%)를 보였다.
Whether the $FTO$ polymorphisms interact with environmental factors has not yet been evaluated in associations with metabolic syndrome (MS) risk. The present study investigated the association of the $FTO$ rs9939609 genotypes, body mass index (BMI), and lifestyle-related factors including smoking, alcohol drinking, physical activity, and diet with MS incidence. A population-based prospective cohort study comprised 3,504 male and female Koreans aged 40 to 69 years. At the beginning of the study, all individuals were free of MS and known cardiovascular disease. Incident cases of MS were identified by biennial health examinations during a follow-up period from April 17, 2003 to April 15, 2009. Pooled logistic regression analysis was applied to obtain relative odds (RO) of MS with its 95% confidence interval (CI). After controlling for potential MS risk factors, we observed no association between the rs9939609 genotypes and MS incidence. In analysis stratified by BMI, however, carriers with the $FTO$ risk allele whose BMI is $29kg/m^2$ or greater showed an approximately 6-fold higher RO (95% CI: 3.82 to 9.30) compared with non-carriers with BMI less than $25kg/m^2$. In particular, the association between the rs9939609 variants and MS risk was significantly modified by high BMI (P-value for interaction < 0.05). Such significant interaction appeared in associations with central obesity and high blood pressure among the MS components. Because carriers of the $FTO$ risk alleles who had BMI of $29kg/m^2$ or greater are considered a high risk population, we suggest that they may need intensive weight loss regimens to prevent MS development.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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