Le, Huong Giang;Yao, Zhuang;Kim, Jeong A;Lee, Se Jin;Meng, Yu;Park, Ji Yeong;Kim, Jeong Hwan
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.48
no.3
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pp.287-295
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2020
Lactobacillus zymae GU240 was previously isolated from Kimchi, a Korean fermented vegetable, as a strong GABA producer. The strain showed β-galactosidase (β-Gal) activity on MRS agar plates with X-gal. When growth and β-Gal activities of GU240 were measured using MRS (glucose, 2%, w/v) and MRSL (lactose, 2%, w/v) broths, cells were found to grow slowly in MRSL, and the β-Gal activity (36 units at 4 h) was lower than that of cells grown in MRS (94 units at 16 h). The highest OD600 value of the culture in MRS was 1.6 at 24 h at 37℃, whereas that of the culture in MRSL was 0.6 at 16 h. β-Gal activity of the culture in MRS reached the maximum (95.6 u/ml) at 16 h, decreased thereafter, and was not detected at 48 h. β-Gal activity for culture in MRSL reached its highest (36 u/ml) at 4 h and decreased gradually, but some activity (11.05 u/ml) still remained at 72 h. The structural gene encoding β-Gal in L. zymae GU240 was cloned as a 3.1 kb fragment, and DNA sequencing confirmed the presence of complete lacLM genes. lacLM genes from L. zymae GU240 showed 98-99% homologies in nucleotide sequences with other lacLM genes from L. brevis. Reverse transcription (RT)-PCR confirmed the operon structure of lacLM. The results indicated that L. zymae GU240 might be in the process of losing the ability to grow rapidly on lactose-containing medium, such as milk, due to adaptations to plant environments, including kimchi.
Sixteen lactic acid bacterial strains were isolated from silage and cow dung samples, and characterized to identify their potential as silage additives. They were identified as the members of the genera Lactobacillus, Enterococcus, and Weissella, and clustered into nine groups based on the sequences of the genes for 16S rRNA, RNA polymerase alpha subunit, 60-kDa heat shock protein, and phenylalanyl-tRNA synthase alpha subunit. Among them, the three strains which were genetically similar to L. plantarum showed the fastest growth and pH decrease in MRS and rye extract media, the highest numbers of available carbohydrates, and the widest ranges of pH, temperature, and salinity for growth. In addition, they showed no amplified DNA products in the PCR examination targeting the genes for the production of biogenic amines, and the MRS media where they had been cultured showed relatively high inhibition effect against the growth of silage-spoiling microorganisms, including fungi, yeast, and clostridia. The results suggest that these strains are good candidates for silage additives. However, the rye extract media where the lactic acid bacteria had been cultured had no effect on or stimulated the growth of the silage-spoiling microorganisms, and the causes must be established for the practical use of the lactic acid bacteria as silage additives.
Methicillin-resistant Staphylococcus (MRS) can be colonized in various body sites and is more frequently isolated in healthcare associated persons. This study aimed to evaluate the contamination rate of MRS in a high school environment, those living with closed life style. Staphylococcus aureus was isolated from only the hands of 2 students among a sample of 28 students, and S. aureus were susceptible to methicillin antibiotics. Coagulase negative Staphylococci (CoNS) were isolated from the hands of 26 students (26/28, 92.9%), and among them, 14 (53.8%) isolates were methicillin-resistant CoNS (MRCoNS). Among the 14 MRCoNS, S. warneri was the most common (8/14, 57%) and susceptible to most $non-{\beta}-lactam$ antibiotics, such as clindamycin, erythromycin, ciprofloxacin, tetracycline, gentamicin, and vancomycin. In a culture of 31 desks, S. aureus was not isolated but CoNS were isolated from 26 desks (26/31, 83.6%), which did not harbor the mecA gene. The other bacteria isolated from the hands and desks were Micrococcus and Bacillus spp. In conclusion, methicillin-resistant S. aureus was not isolated from the hands and desks of high school students. However, the frequency of MRCoNS harboring mecA gene were high in the hands of high school students. Therefore, to prevent and to control the transfer of infection, intensifying preventive education, such as hand washing, and active surveillance systems, such as an investigation of contamination or carrier rate of resistant bacteria are necessary.
Purpose : To investigate the phosphorus metabolic abnormalities in skeletal muscle of patients with mitochondrial myopathy using in vivo $^{31}P$ magnetic resonance spectroscopy(MRS). Materials and Methods : Patients with mitochondrial myopathy(N=10) and normal control subjects (N=10) participated. All in vivo $^{31}P$ MRS examinations were performed on 1.5T whole-body MRI/MRS system by using an image selected in vivo spectroscopy (ISIS) pulse sequence that provided a $4{\times}4{\times}4{\;}cm^{3}$ volume of interest (VOI) in the right thigh muscle tissue. Peak areas for each phophorus methabolite were measured using a Marquart algorithm. Results : The specific features in patients with mitochondrial myopathy were a significant increase of Pi/PCr ratio (p=0.003) and a significant decrease of ATP/PCr ratio (p=0.004) as compared with normal controls. In particular, the ${\beta}-ATP/PCr$ ratio between controls and patients with mitochondrial myopathy was predominantly altered. Conclusions : In vivo $^{31}P$ MRS may be a useful modality in the clinical evaluation of patients with mitochondrial myopathy based on ATP/PCr and Pi/PCr ratios in skeletal muscle tissue and provides a valuable information in further understanding disorders of muscle metabolism.
Alginate lyase from Streptomyces violaceoruber was purified by DEAE sephacel chromatography and SP sepharose chromatography. The specific activity of the purified enzyme was 14.6 units/mg protein, representing a 40.6-fold purification of the crude extract. The final preparation thus obtained showed a single band on Tricine-SDS polyacrylamide gel electrophoresis whose molecular weight was determined to be 23.3 kDa. The polyMG block of sodium alginate was hydrolyzed by the purified alginate lyase and then separated by activated carbon column chromatography and bio gel P-2 gel filtration. The main hydrolysates were composed of hetero type M/G-oligosaccharides with the degrees of polymerization (D.P.) being 6 and 8. To investigate the effects of hetero type M/G-oligosaccharides from the sodium alginate on the growth of some intestinal bacteria, cells were cultivated individually on the modified-MRS medium containing D.P. 6 and 8 M/G-oligosaccharides. B. longumgrew 4.25-fold and 6.44-fold more effectively by the treatment of D.P. 6 and 8 M/G-oligosaccharides compared with those of standard MRS medium. In addition, B. bifidumgrew 3.3-fold and 5.4-fold more effectively by the treatment of D.P. 6 and 8 M/G-oligosaccharides. In conclusion, D.P. 8 was more effective than D.P. 6 hetero M/G-oligosaccharides as regards the growth of Bifidobacteriumspp. and Lactobacillus spp.
Park, Jeong-Gyu;Song, Won-Ho;Hong, Sung-Moon;Kim, Cherl-Hyun
Food Science of Animal Resources
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v.28
no.5
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pp.580-586
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2008
Conjugated linoleic acid (CLA) is a mixture of positional and geometric isomers of linoleic acid with conjugated double bonds. These conjugated dienes were found to be responsible for many biological properties related to health. The objective of this study was to evaluate the production of cis-9, trans-11 CLA by Lactobacillus acidophilus isolated from breast-fed infants. Nine different cultures were tested for their ability to produce cis-9, trans-11 CLA from free linoleic acid in MRS broth and 8% reconstituted skim milk medium supplemented with linoleic acid at $37^{\circ}C$ for 48 hr. cis-9, trans-11 CLA was not detected or detected in very small amount when cell pellets of strains grown in MRS broth and 8% reconstituted skim milk supplemented with linoleic acid of $200{\mu}g/mL$. However, free cis-9, trans-11 CLA was produced in both media. It appeared that 8% reconstituted skim milk produced more cis-9, trans-11 CLA than MRS broth. L. acidophilus NB 203 and NB 209 produced more cis-9, trans-11 CLA than other tested cultures. The inhibitory effects of supplemented linoleic acid on the growth of L. acidophilus NB 203 and NB 209 were not detected up to $3,000{\mu}g/mL$ linoleic acid addition during the growth at $37^{\circ}C$ for 48 h. The production of cis-9, trans-11 CLA by these two L. acidophilus strains increased in the logarithmic growth phase until 24 hr incubation. Under this experimental condition, the best yield of CLA isomers for L. acidophilus NB 203 and NB 209 could be obtained from medium supplemented with $500{\mu}g/mL$ linoleic acid at $37^{\circ}C$ after 24 hr of incubation. These results indicate that the use of lactic acid bacteria producing free CLA in fermented dairy products may have potential health or nutritional benefits.
Yogurt containing high ${\gamma}$-aminobutyric acid (GABA) was developed using lactic acid bacteria and germinated brown rice. Lactobacillus acidophilus, L. plantarum, and L. brevis OPY-1 strains were inoculated into Lactobacillus MRS broth for use as yogurt starter. After treatment with 5% monosodium glutamate in MRS broth, L. brevis OPY-1 strain isolated from Kimchi produced GABA concentration of 8,003.28 nmol/mL. Starter was inoculated into fermentation substrate mixture containing germinated brown rice extract and blend of powdered whole milk and skim milk. Samples were incubated, and viable cell colonies were counted. Highest number of lactic acid bacteria was reached between 16 and 20 hr. Concentrated rice milk fermented with high GABA-producing strain contained GABA concentrations of $137.17\;{\mu}g/g$ D.W., whereas concentrated fermented milk prepared by conventional method contained GABA of $1.29\;{\mu}g/g$ D.W. Sensory evaluation panelists gave favorable ratings to fermented rice milk containing high GABA concentration.
The MRS medium is widely used as an optimized medium for the growth of Lactobacillus spp. and also used for the growth of Leuconostoc spp. Leuconostoc mesenteroides shows quite different physicochemical properties compared to Lactobacilli spp. and it is one of the major strain of kimchi fermenting microorganisms with its usefulness in our traditional foods and availability in biotechnology in the future, specifically tailor-made medium is necessary for the growth of Leuconostoc mesenteroides. Sequential experimental designs (Plackett-Burman, fractional factorial, steepest ascent, central composite design and response surface methodology) were introduced to optimize and improve the Leuconostoc medium. Fifteen medium ingredients were investigated and fructose, sodium acetate and ammonium citrate were determined to give a critical and positive effect for cell-growth. The yield of biomass using the optimal medium was improved more than that of the MRS medium and the result of fed-batch culture showed the capability of the improvement in cell mass similar to the E.coli system.
Proceedings of the Korean Society for Applied Microbiology Conference
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1986.12a
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pp.513.3-514
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1986
유산균을 종균으로 하여 유제품을 만드는 경우에 종균의 취급관리는 매우 중요한 일이다. 종균을 취급하는 과정에서 어떤 원인으로 인하여 종균의 활력 특히 산생성력이 감퇴되어 종균으로 사용할 수 없는 경우가 발생한다. 이러한 경우의 원인을 분석하여 그 예방책을 수립하기 위한 기초 연구로써 발효유의 종균으로 사용하고 있는 L. casei YIT9018의 spontaneous lac 변이주의 발생빈도 및 이러한 Lac 변이주의 특성을 검토하였다. parent colony에서의 Lac의 발생빈도는 MRS 배지에서 400 coloney중에서 1개, 10% 환원 탈지분유에서는 984개중 1개의 배율로 나타났다. 분리된 Lac 변이주중에는 Lac Gal도 검출되었다 대부분의 Lac를 탈지유배지에 배양할 경우 10일이 지나면 우유를 응고시켰으나 Lac Gal는 30일이 지난뒤에 응고시켰다. Lac변이주를 MRS-lactose 배지의 plate에 도말하여 배양하면 4일 이후부터는 revertant가 나타났으나 Lac Gal Cell에서는 인정되지 않았다. 얻어진 Lac 변이주의 plasmid를 분리하여 parent와 비교한 결과 plasmid DNA가 소실되었음을 확인하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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