• 한국발생생물학회지:발생과생식
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• 제14권3호
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• pp.207-214
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• 2010

The tremendous changes of uterine endometrium are observed during early pregnancy and protease and their inhibitors are involved in regulation of cell proliferation and remodeling of the tissues through remodeling the extracellular matrix (ECM). Some of the proteases and protease inhibitors have been suspected to a factor in endometrial changes but many parts of their expression profiles and the physiological roles are not uncovered. To evaluate the functional roles of them, in this study the expression profiles of proteases and protease inhibitors were analyzed using real-time quantitative PCR analysis. Mmp9 (matrix metalloproteinase 9) mRNA levels peaked on day 4 at the time of implantation. On the other hand, Ela2 (neutrophil elastase, NE) mRNA levels were peaked on day 2 of pregnancy. Its expression were decreased until day 4 of pregnancy but increased rapidly until day 7 of pregnancy and decreased again. NE inhibitor Slpi (secretory leukocyte protease inhibitor, SLPI) mRNA levels were related with the implantation stage and with the levels of Ela2. At the time of implantation the expression levels of Slpi mRNA were about 5 times higher than the Ela2 mRNA in the uterus. In the implantation stage embryos, Mmp9 specific mRNA was only detected at the blastocyst. On the other hand, the expression level of SLPI was higher than that of the Ela2 mRNA at blastocyst and 4.5 day p.c. embryos. Based on these results it is suggested that MMP9, SLPI, and NE have important physiological role in embryo implantation both in uterus and embryos.

• Biomolecules & Therapeutics
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• 제20권1호
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• pp.57-61
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• 2012

The matrix metalloproteinase (MMP) family is involved in the breakdown of the extracellular matrix during normal physiological processes such as embryonic development, reproduction, and tissue remodeling, as well as in disease processes such as pathological aging, arthritis, and metastasis. Oxidative conditions generate reactive oxygen species (ROS) (e.g., hydrogen peroxide [$H_2O_2$]) in cells, which subsequently induce the synthesis of matrix metalloproteinase-1 (MMP-1). MMP-1, an interstitial collagenase, in turn stimulates an aging phenomenon. In this study, baicalein (5,6,7-trihydroxyfl avone) was investigated for its in vitro activity against $H_2O_2$-induced damage using a human skin keratinocyte model. Baicalein pretreatment signifi cantly inhibited $H_2O_2$-induced up-regulation of MMP-1 mRNA, MMP-1 protein expression and MMP-1 activity in cultured HaCaT keratinocytes. In addition, baicalein decreased the transcriptional activity of activator protein-1 (AP-1) and the expression of c-Fos and c-Jun, both components of the heterodimeric AP-1 transcription factor. Furthermore, baicalein reduced phosphorylation of extracellular signal-regulated kinase (ERK) and c-Jun-N-terminal kinase (JNK), which are upstream of the AP-1 transcription factor. The results of this study suggest that baicalein is involved in the inhibition of oxidative stress-induced expression of MMP-1 via inactivation of the ERK/JNK/AP-1 signaling pathway.

• Tuberculosis and Respiratory Diseases
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• 제56권1호
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• pp.51-66
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• 2004

연구배경 : 폐 섬유화증의 진행에는 세포외 간질의 대사에 관여하는 gelatinase가 중요한 역할을 하는 것으로 알려져 있으며, gelatinase의 작용은 사이토카인을 비롯한 여러 가지 요소에 의해 조절되는 것으로 알려져 있다. 지금까지 $interferon-{\gamma}$($IFN-{\gamma}$)는 폐섬유화를 억제하는 것으로 알려져 있지만 gelatinase의 작용에 $IFN-{\gamma}$가 미치는 영향은 잘 밝혀져 있지 않다. 이에 저자들은 bleomycin 유도 백서 폐 섬유화 모델에서 $IFN-{\gamma}$가 폐 섬유화에 미치는 영향과MMP-2, -9과 이의 길항제인 TIMP-1, -2 그리고 Th-2 사이토카인의 변화에 미치는 영향을 조사함으로써, $IFN-{\gamma}$가 폐 섬유화증에 미치는 영향과 기전을 연구하고자 하였다. 재료 및 방법 : Sprague-Dawley계의 수컷 흰쥐를 정상 대조군, bleomycin 군, bleomycin+$IFN-{\gamma}$ 군의 세 군으로 나누어, bleomycin 군 과 bleomycin+$IFN-{\gamma}$ 군은 bleomycin sulfate를 생리식염수에 섞어 기관 내로 주입하였고(6 U/kg), bleomycin+$IFN-{\gamma}$ 군은 $IFN-{\gamma}$를 14일간 근육주사 하였다($2{\times}105U/kg$). 실험동물은 3, 7, 14, 28일에 폐를 얻어 hematoxylineosin 염색과 Masson's trichrome 염색을 하여 폐의 염증 반응과 섬유화 정도를 관찰하였고, 폐 조직 내의 hydroxyproline 함량, MMP-2, -9, TIMP-1, -2에 대한 Western blot, zymography와 reverse zymography, IL-4와 IL-13에 대한 ELISA검사를 시행하였다. 결 과 : 1. 폐 염증은 bleomycin 투여 7일째에는 $IFN-{\gamma}$를 투여한 경우 더 심하게 일어났으나(bleomycin 군 : bleomycin+$IFN-{\gamma}$ 군=$2.08{\pm}0.15:2.74{\pm}0.29$, P<0.05), 폐 섬유화는 bleomycin 투여 후 28일째 $IFN-{\gamma}$ 투여에 의해 유의하게 감소되었다(bleomycin 군 : bleomycin+$IFN-{\gamma}$ 군=$3.94{\pm}0.43:2.46{\pm}0.13$, P<0.05). 2. 폐 내 hydroxyproline 함량은 bleomycin 투여 28일 후 $IFN-{\gamma}$ 투여에 의해 유의하게 감소되었다(bleomycin 군 : bleomycin+$IFN-{\gamma}$ 군=$294.04{\pm}31.73{\mu}g/g:194.92{\pm}15.51{\mu}g/g$, P<0.05). 3. Bleomycin 투여에 의해 MMP-2 단백질의 양이 증가되는 소견이 Western blot에서 관찰되었는데 MMP-2의 증가는 bleomycin 투여 14일에 최고에 이르렀으며, $IFN-{\gamma}$의 투여에 의해 bleomycin에 의한 MMP-2의 증가는 억제되었으나 대조군 수준으로 감소하지는 않았다. 4. Zymography 검사에서 bleomycin 투여 3일째에는 활성화된 형태의 MMP-2가 $IFN-{\gamma}$에 의해 유의하게 증가되었으나(bleomycin 군 : bleomycin+$IFN-{\gamma}$ 군=$209.63{\pm}7.60%:407.66{\pm}85.34%$, P<0.05), 투여 14일 후에서는 $IFN-{\gamma}$에 의해 활성화된 상태의 MMP-2가 유의하게 감소되었다(bleomycin 군 : bleomycin+$IFN-{\gamma}$ 군=$159.36{\pm}20.93%:97.23{\pm}12.50%$, P<0.05). 5. Bleomycin을 투여한 후 bleomycin 군과 bleomycin+$IFN-{\gamma}$ 군 모두에서 IL-4의 양이 감소되었으나, 두 군간 차이는 통계적으로 유의하지는 않았고, IL-13은 별 다른 차이가 없었다. 결 론 : Bleomycin에 의한 백서 폐 섬유화 모델에서 $IFN-{\gamma}$는 초기 폐 염증을 증가시키지만 후기 폐 섬유화는 억제시킨다는 것을 알 수 있었다. $IFN-{\gamma}$가 폐 섬유화를 억제하는 것은 MMP-2의 활성화를 억제하기 때문인 것으로 생각한다. 또한 $IFN-{\gamma}$에 의한 MMP-2의 기능 억제는 Th-2 사이토카인을 억제하여 이루어지는 것 같지는 않았다. 본 논문을 기초로 향후 $IFN-{\gamma}$가 MMP-2의 활성화를 조절하는 기전과 MMP-2의 활성화가 폐섬유화에 미치는 영향에 대한 연구가 필요할 것으로 생각한다.

• 대한화장품학회지
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• 제30권2호
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• pp.235-240
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• 2004

해양 천연물 유래의 신규 광노화 방지소재의 개발을 위해 항산화 활성과 matrix metalloproteinase-1 (MMP-1) 발현 억제활성을 갖는 잘피(Zostera marina L.)를 선별하였다. 에탄올 추출물로부터 3개의 화합물(compound 1과 2, 3)을 분리하였으며 각각 apigenin-7-O-$\beta$-D-glucoside (1)과 chrysoeriol (2), luteolin (3)으로 동정하였다. 이 화합물들은 1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl radical에 대하여 각각 0,18mM과 0.68mM, 0.01mM의 $SC_{50}$/ 값을 나타내었으며, xanthine과 xanthine oxidase의 반응으로 생성되는 superoxide radical에 대하여 각각 0.04mM과 0.03mM, 0.01mM의 $SC_{50}$/ 값을 나타내었다. 특히 compound 3은 MMP-1에 대해 35.0$\mu$M의 농도에서 44% 이상의 발현 억제황성을 나타내었으며 MMP-1 발현을 유도하는 신호전달물질로 알려 있는 interleukin 6의 생성도 억제하였다. 또한 잘피 추출물을 함유한 제품이 주름 개선효과를 측정하였다. 추출물을 3.0% 함유한 크림을 8주간 적용하여 미세주름과 피부거칠음의 현저한 개선효과를 확인하였다. 결론적으로, 잘피 추출물에서 분리된 화합물들은 우수한 항산화 활성과 MMP-1 발현 억제활성을 가지며, 이 추출물을 함유한 제품은 피부주름의 감소효과를 나타내었다. 따라서, 잘피 추출물은 화장품의 새로운 항노화 소재로서 적용될 수 있을 것이다.

• 대한한의학회지
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• 제23권2호
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• pp.211-224
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• 2002

Background and Objective : In order to investigate the effects of Gilgyunglwedok-tang (GRT) on antitumor activity and antimetastatic activity, studies were done experimentally. Materials and Methods : Experimental studies were perfonned for the cytotoxic effect on BALB/c mouse lung fibroblast cells, the proliferating effect of splenic lymphocyte, the expression of CD3e/CD4, CD3e/CD8, and B220 in peripheral blood mononuclear cells (PBMCs), the cytotoxic effect on A549, SK-OV-3, SK-MEL-2, MCF-7 cells, the inhibitory effect on the activity of DNA topoisomerase I, the T/C% in ICR mice bearing S-180, the inhibitory effect of Cell adhesive of A549 Cells and SK-OY-3 Cells to complex extracellular matrix, the inhibitory effect on lung colonies, the change of lung tissue, the antiangiogenic activity, and the effect on MMP-2 and MMP-9 gene expression in the RT1080 cell line. Results and Conclusion : The results were obtained as follows : 1. In the cytotoxic effect on BALB/C mouse lung fibroblast Cell, GHT didn't show the significant cytotoxic effect on BALB/C mouse lung fibroblast cell compared to the control group. 2. In thymidine uptake assay, GHT showed the significant proliferating effect of splenic lymphocyte in proportion to the concentration. 3. In the expression of CD3e/CD4, CD3e/CD8, and B220 in peripheral blood mononuclea cells (PBMCs) of mice, GRT had no significant change to the normal group in CD4. However, GRT showed an increase to the normal group in CD8 and GHT in the only $1\mu\textrm{g}/ml$ category showed an increase to the normal group in B220. 4. In the cytotoxic effect of GRT on A549, SK-OY-3, SK-MEL-2 and MCF-7 cells, there was no significant cytotoxic effect compared to the control group. 5. In the inhibitory effect on the activity of DNA topoisomerase I, GHT in the $10\mu\textrm{g}/ml$ category showed the inhibitory effect on the activity of DNA topoisomerase I in proportion to the concentration. 6. In the T/C% in ICRmice bearing S-180, GHTtreated group showed 123.7% of T/C% compared to the control group. 7. In the inhibitory effect of cell adhesive of A549 Cells and SK-OV-3 Cells to complex extracellular matrix, GRT in the only $100\mu\textrm{g}/ml$ category showed the significant inhibitory effect compared to the control group. 8. In the inhibitory effect on lung colonies, GHT showed the significant inhibitory effect on lung colonies compared to the control group. 9. In the change of lung tissue, GHT showed a significant decrease of lung cancer growth, interalveolar fibrosis and hyaline material compared to the control group. In the development of lymphocyte around lung cancer cells and lung parenchymal, GHT showed the significant inducement efficacy compared to the control group. 10. In CAM assay, the antiangiogenic activity of GHT showed 30%. 11. In the effect on MMP-2 and MMP-9 gene expression in the RT1080 cell line, GHT had no significant inhibitory effect on MMP-2 and MMP-9 gene expression compared to the control group. According to the above results, it could be suggested that GHT has an antitumor activity and antimetastatic activity.

• 동의생리병리학회지
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• 제28권1호
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• pp.22-28
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• 2014

Flos Sophorae, the dried flower bud of Sophora japonica L, possesses anti-inflammatory properties, prevents and treats blood capillary and hypertension diseases and can also be used as a hemostat. However, the effect of Flos Sophorae on breast cancer invasion is unknown. Matrix metalloproteinase-9 (MMP-9), which degrades the extracellular matrix, is a major component in cancer cell invasion. In this study, we investigated the inhibitory effect of Flos Sophorae extract (FSE) on 12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate (TPA)-induced Matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) expression and cell invasion, as well as the molecular mechanisms involved in Michigan Cancer Foundation-7 (MCF-7) cells. FSE inhibited the TPA-induced transcriptional activation of nuclear factor-kappa B (NF-${\kappa}B$). These results indicate that FSE-mediated inhibition of TPA-induced MMP-9 expression and cell invasion involves the suppression of NF-${\kappa}B$ pathway in MCF-7 cells. Thus, FSE may have therapeutic potential for controlling breast cancer invasiveness.

• 생명과학회지
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• 제32권12호
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• pp.938-946
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• 2022

본 연구는 대풍자 에탄올 추출물에 대한 항산화 활성 및 주름생성 억제 활성을 확인하고자 하였다. 대풍자 에탄올 추출물의 항산화 활성을 확인하기 위하여 DPPH와 ABTS⁺ radical 소거능을 측정하였고 그 결과 추출물 1,000 ㎍/ml 농도에서 각각 73.5%와 74.4%의 높은 소거능을 나타냈다. 주름생성 억제 활성을 확인하기 위하여 collagenase 저해 활성을 실험하였으며, 그 결과 추출물 1,000 ㎍/ml 농도에서 78.8%의 유의할만한 우수한 결과를 보였다. 또한 추출물에 대한 세포의 독성을 확인하기 위해 MTT assay를 수행하였으며, 50 ㎍/ml 이하의 농도에서 약 91.7%의 생존율을 보여, 이후의 세포 실험은 50 ㎍/ml 이하의 농도에서 진행하였다. 섬유아세포인 CCD-986sk에 UVB (20 mJ/cm²)의 자극을 주고 대풍자 에탄올 추출물을 농도별로 처치한 후 procollagen type I과 MMP-1의 발현에 대한 영향을 확인하고자 ELISA 및 RT-PCR 분석을 하였다. 그 결과 대풍자 에탄올 추출물은 PIP의 생합성과 mRNA 발현은 농도의존적으로 증가하였으며, 특히 UVB만 자극한 Cont (각각의 생합성율은 50.3%와 45.8%)과 비교하였을 때 50 ㎍/ml의 농도에서 각각 약 64.2%와 83.4%의 생합성을 보였다. MMP-1의 protein과 mRNA 발현에 대한 결과는 농도의존적으로 감소했음을 확인하였으며, 50 ㎍/ml의 농도에서 각각 약 48.7%와 35.9%의 낮은 발현율을 보였다. 이와 같은 결과를 바탕으로 본 연구는 대풍자 에탄올 추출물이 주름억제 기능성 소재로써의 활용 가능성을 제시해 줄 것으로 사료된다.

• 농업생명과학연구
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• 제50권2호
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• pp.151-160
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• 2016

염증성 사이토카인은 파골세포형성과정에서 중요한 요인이며, 뼈의 흡수는 자주 골다공증과 연결된다. 설포라판은 보로콜리의 화뢰로 부터 분리된 물질로 염증성 사이토카인을 억제한다고 알려져 있다. 본 실험에서는 Receptor activator of nuclear factor kappaB ligand(RANKL)로 자극된 세포에서 설포라판이 파골세포 형성 억제에 대한 효과를 측정하였다. 설포라판은 대식세포인 RAW 264.7 세포에서 파골세포 특이 마커 유전자인 tartrate-resistant acid phosphatase(TRAP), Cathepsin K, matrix metalloproteinase 9(MMP-9), calcitonin receptor을 저해하였으며, TRAP, MMP-9, tumor necrosis factor receptor-associated factor 6(TRAF6)와 전사인자인 nuclease factor of activated T cells(NFATc1)의 단백질 발현과 RANKL로 자극하였을 때 전자인사인 nuclear factor kappaB(NF-kappaB)의 전사활성도 억제 하였다. 이와 같은 결과로 설포라판이 NF-kappaB의 전사활성 억제뿐만 아니라, 파골세포형성인자(TRAP, cathepsin K, MMP-9, calcitonin, NFATc1)와 NFATc1의 발현을 억제시키는 효과가 있음을 확인하였다.

• Tuberculosis and Respiratory Diseases
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• 제51권4호
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• pp.303-314
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• 2001

연구배경 : 특발성 폐섬유회증은 병리학적으로 폐구조가 파괴되면서 섬유아세포 및 교원질이 간질 및 폐포내에 침작하는 질환으로 교원질의 침착은 cytokine 및 성장촉진인자들에 의한 교원질생성의 증가 뿐 아니라 교원질의 분해흡수의 감소도로 초래될 수 있다. IPF의 또 다른 특징인 폐구조의 파괴 및 폐보내 섬유화 현상은 기저막 파괴로 인한 섬유아세포 등의 폐포내 유입 및 비정상적 증식이 기전으로 생각되므로 기저막의 주요 성분인 제4형 교훤질올 분해하는 Matrix metalloproteinase(MMP)-2와 MMP-9이 IPF의 발병기전에 중요한 역할을 할 것으로 추정되고 있다. 또한 병이 계속 활발히 진행되는 상태에서는 이들 효소의 농도도 높올 것이 예상되므로 본 연구는 특발성 폐섬유화증에서 질병의 진행파정에 따른 기관지폐포세척액(BALF)내 MMP 농도 및 BALF내 세포분포와의 IPF에서 MMP의 역할 및 예후인자로서의 가능성을 규명하고자 시행되었다. 방 법 : 서울중앙병원에서 진단된 41명(연령 $59.82{\pm}1.73$세, 남:여=23:18)의 IPF환자들과, IPF진단은 받았으나 1년 이상 치료하지 않고도 병이 진행되지 않았던 안정군 16명($63.6{\pm}2.8$세, 남:여=13:3) 및 정상 대조군 7명을 대상으로 BAL액과 AM배양 배지에서 MMP-2와 MMP-9농도를 zymography와 densitometry에 의한 정량분석을 시행하였고, TIMP-1 농도는 상업용 ELISA kit로 측정하였다. 결 과 : 1) BAL 액내 총 세포수(${\times}10^6/ml$)는 IPF환자군($3.40{\pm}0.20$), 안정군($2.92{\pm}0.39$), 대조군($0.91{\pm}0.15$)간 유의한 차이를 보였고 AM수효(${\times}10^5/ml$)와 호중구 수(${\times}10^5/ml$)는 IPF 환자군($24.74{\pm}1.88$, $2.15{\pm}0.35$)과 안정군($19.16{\pm}2.26$, $0.63{\pm}0.11$)에서 대조군($7.36{\pm}1.04$, $0.052{\pm}0.038$)에 비하여 유의하게 높았다(p<0.05). 호산구비율도 IPF 환자군($2.83{\pm}0.66%$)과 안정군($1.50{\pm}0.42%$)에서 대조군($0{\pm}0%$)에 비하여 유의하게 높았으나(p<0.05), 림파구수나 비율은 차이가 없었다. 2) Zymography에 의한 육안적 관찰에서 IPF환자군은 34/41(82.9%), 안정군은 9/15(60%), 각각 band를 관찰하여 대조군 0/6(0%)과 차이를 보였다. 3) BALF내 MMP-2는 IPF환자군($1.36{\pm}0.28$)은 안정군($0.46{\pm}0.13$)에 비하여, 또 안정군도 대조군($0.08{\pm}0.09$)에 비하여 유의하게 높았다. MMP-9은 IPF 환자군($0.31{\pm}0.058$)과 안정군($0.22{\pm}0.078$)에서 대조군($0.002{\pm}0.004$)보다 높았다. TIMP-1도 IPF환자군($36.34{\pm}8.62{\mu}g/ml$)과 안정군($20.83{\pm}8.53{\mu}g/ml$)에서 대조군($2.80{\pm}1.05{\mu}g/ml$)에 비하여 유의하게 높았다(p<0.05). 4) AM배양액에서는 MMP-9만이 역시 IPF군에서($0.80{\pm}0.10$) 대조군보다($0.23{\pm}0.081$) 높았다. 5) BALF내 MMP-2는 전체 세 포수(r=0.298)와 호중구수(r=0.357)와 유의한 상관관계를 보였으나(p<0.05), AM수(r=0.096)나 임파구수(r=0.100)와는 상관관계가 없었고, MMP-9은 호중구수(r=0.407) 및 임파구수(r=0.574)와 유의한 상관관계를 보였다. TIMP-1은 전체 세포수(r=0.338, p<0.05) 및 호중구수(r=0.449, p=0.059)와 상관관계의 경향을 보였다. 결 론 : 본 연구의 결과로 MMP와 TIMP는 IPF의 병인에 있어서 중요한 역할을 하며, BALF내 MMP농도는 IPF의 활성도와 연관이 었을 것으로 추정된다.

• Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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• 제16권7호
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• pp.2719-2724
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• 2015

Objective: The aim of this study was to investigate the clinical significance of annexin a1 (ANXA1) and provide molecular evidence to support that decreased ANXA1 expression could enhance cancer migration and invasion in pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC). Materials and Methods: Immunohistochemistry of a tissue microarray with 162 surgically resected PDAC specimens was performed to examine the expression of ANXA1. We also investigated the relationship between ANXA1 expression and clinicopathological factors and prognosis of PDAC patients. We further studied the role of ANXA1 in PDAC cell proliferation, migration and invasion by cell proliferation assay, migration assay and matrigel invasion assay with reduced ANXA1 expression by RNAi. Western blotting was used to detect matrix metalloproteinase-9 (MMP-9), and tissue inhibitor of metalloproteinase-1 (TIMP-1) expression. We also detected MMP-9 enzyme activity by gelatin zymography. Results: Decreased expression of ANXA1 was significantly associated with poor differentiation, lymph node metastasis and advanced TNM stage of PDAC patients (p<0.05). Moreover, decreased expression of ANXA1 was correlated with poor survival (p<0.05). Furthermore, we found that ANXA1 knockdown inhibited cell proliferation, induced G1 phase cell cycle arrest, increased PDAC cell migration and invasion capacity compared with controls. In addition, Western blotting showed that ANXA1 knockdown increased the MMP-9 protein level and decreased TIMP-1 expression. Gelatin zymography showed that MMP-9 enzyme activity was also elevated. Conclusions: Negative ANXA1 expression is a most unfavorable prognostic factor for PDAC patients. ANXA1 knockdown inhibits cell proliferation by inducing G1 phase cell cycle arrest and increases migration and invasion of PDAC cells through up-regulating MMP-9 expression and activity, implying that ANXA1 may serve as a promising prognostic biomarker and therapeutic target for PDAC.