본 연구는 개에서 수술적으로 짧은 기간 동안 관절의 불안정성을 최대로 유도하여 수술후 운동 없이 관절의 퇴행성 변화의 유무 및 정도와 골관절염 모델로 적합한지를 평가 하였다. 10두의 비글견을 본 실험에 사용하였다. 실험군은 오른쪽 무릎관절의 앞십자인대 및 내측 곁인대의 절제와 내측 반월 연골 절제술을 시행하였으며, 왼쪽 무릎관절을 대조군으로 사용하였다. 수술 12주 후 연골의 손상, 윤활막의 염증 정도와 윤활액의 생화학적 변화를 평가 하였다. 조직 검사에서 연골의 비후, 연골 세포의 분화, 프로테오글리칸의 소실 및 윤활막의 염증이 대조군과 비교하여 유의성 있는 증가가 관찰되었다. 윤활액의 생화학적 검사에서 유의성 있게 증가된 MMP-2, -9의 농도를 실험군에서 관찰 하였다. 이상의 결과로부터 본 연구에 수행한 관절염 모델은 골관절염 유도가 가능하며, 술후 운동으로 소모되는 시간 및 비용을 줄 일수 있는 장점 있어 골관절염 모델로서 유용하게 활용될 것으로 판단된다.
자외선은 피부 광노화의 주요 요인이며, 효과적인 자외선 차단제가 피부의 건강과 아름다움을 위해 필요하다. 본 연구는 세포 실험을 통하여 자외선에 의해 유도된 세포 사멸, 산화적 스트레스, matrix metalloproteinase 1 발현에 미치는 죽여추출물의 영향을 알아보고자 수행하였다. HaCaT 인간 각질세포를 여러 농도의 죽여추출물 유무 조건에서 자외선을 조사하고 세포의 생존율과 생화학적 과정들의 변화를 분석하였다. 죽여추출물은 자외선을 조사한 세포의 생존율을 증진시켰고, procaspase 3가 활성화 형태로 절단되고, Bax/Bcl-2 비율이 증가하는 세포 자살 과정을 완화시켰다. 죽여추출물은 자외선에 노출된 세포에서 활성산소의 발생과 지질 과산화도 감소시켰다. 또한 죽여추출물은 자외선에 의해 자극된 matrix metalloproteinase 1의 발현과 c-Jun N-terminal kinase의 인산화를 억제하였다. 본 연구는 죽여추출물이 자외선에 의한 세포 사멸, 산화적 스트레스, 그리고 matrix metalloproteinase 1 발현을 억제함을 보여 주었으며, 이 추출물이 피부 광노화의 일부 현상을 억제하는 화장품 원료로 유용함을 시사하였다.
Nuruk contributes to the unique characteristics of Korean alcoholic beverages. In this study, the effects of nuruk extracts (NE) on anti-oxidant characters, melanogenesis, and anti-photoaging activity were investigated. NEs were obtained from the 70% ethanol extracts of six types of nuruk, which have been used in brewing of fermented alcohol beverages in Korea. First, various antioxidant characteristics were identified in terms of 2,2'-azino-bis(3-ethylbenzthiozoline-6-sulphonic acid) (ABTS) radical scavenging activity, superoxide dismutase (SOD) expression, and inhibition of xanthine oxidase activity. NE#4 exhibited potent ABTS radical scavenging activity ($IC_{50}$ = 19.51 ${\mu}g$/mL). Compared with NE#4, relatively lower levels of activity were observed for NE#3 and NE#6, with $IC_{50}$ values of 90.99 and 76.88 ${\mu}g$/mL, respectively. According to results of western blot analysis for determination of SOD expression in $H_2O_2$-treated HepG2 cells, NE#5 and NE#6 induced a dramatic increase in the expression ratio of SOD, compared to the group treated with $H_2O_2$ only. Activity of xanthine oxidase, which converts xanthine into uric acid, generating superoxide ions, was inhibited by NE#4 and NE#6 in a dose-dependent manner. NE#4 induced significant inhibition of mushroom tyrosinase activity. A reduction in cellular melanin contents of 80% was observed in B16F1 melanocytes treated with NE#5 and NE#6; these effects were similar to those of arbutin at 100 ${\mu}M$. In addition, gelatin zymography and reverse transcription-PCR analysis were performed for assessment of anti-photoaging activity of Nuruk. Treatment with NE#6 resulted in dramatically inhibited activities of matrix metalloproteinase (MMP)-2/-9, suppressed expression of MMP-1, and increased expression of type-1 procollagen. Results of gelatin zymography for NE#4 and NE#5 were similar, to a slightly lesser degree. These results suggest the potential of NE#4 and NE#6 as natural ingredients for use in functional foods and cosmetics.
본 연구는 방사선 형질전환 차조기와 백출복합물(차조기 복합물)이 퇴행성관절염 관련 매개체에 미치는 영향을 확인하고자 MIA(monosodium iodoacetate)로 퇴행성관절염을 유도한 랫드로 평가하였다. 차조기 복합추출물을 2주 동안 25, 50, 100 mg/kg/day의 용량으로 경구 투여하고 랫드의 우측관절 내 공간에 MIA를 주입한 후 동일 용량을 4주 동안 지속 투여하였다. 이후, 혈청 바이오마커와 무릎 관절 분석의 형태학 및 조직병리학적 분석에 기초한 치료 효과를 평가하였다. 대조군 랫드와 비교하였을 때 차조기 복합추출물은 혈청 내 염증 및 골 대사 마커(TNF-α, MMP-3, COX-2, PGE2, COMP, Aggrecan)의 생성량을 유의하게 감소시켰다. 이와는 반대로 연골 흡수 매개체인 CTX-2 생성을 증가시켰으며, 방사선 형질전환 차조기는 무릎 연골과 활막을 효과적으로 보존하였다. 그 결과, 차조기 복합물은 퇴행성관절염 증상을 개선하였다. 따라서, 차조기 복합물은 퇴행성관절염 관리를 위한 식품소재로 사용될 수 있다.
Objectives: This study was performed to evaluate the effect of Dokhwalgisaengtang-gami water extract(DGG) on osteoporosis. Methods: The osteoclastogenesis and gene expression were determined in RANKL-stimulated RAW 264.7 cell. And osteoblastogenesis was also determined in rat calvarial cell. Results: The results were summarized as followes. 1. DGG decreased the number of TRAP positive cell in RANKL-stimulated RAW 264.7 cell. 2. DGG inhibited TRAP activity in RANKL-stimulated RAW 264.7 cell. 3. DGG decreased the expression of NAFTc1, MITF in RANKL-stimulated RAW 264.7 cell. 4. DGG increased the expression of iNOS, COX-2, IL-6 in RANKL-stimulated RAW 264.7 cell. 5. DGG decreased the expression of cathepsin K, MMP-9, TRAP in RANKL-stimulated RAW 264.7 cell. 6. DGG increased cell proliferation of rat calvarial cell. 7. DGG increased ALP activity in rat calvarial cell 8. DGG increased bone matrix protein, collagen synthesis and nodule formation in rat calvarial cell. Conclusions: It is concluded that DGG might decrease the bone resorption resulted from decrease of osteoclast differentiation and it's related gene expression. And DGG might increase the bone formation resulted from increase of osteoblast function.
Periodontitis is an inflammatory disorder of the periodontium, characterized by destruction of the tooth supporting tissues including alveolar bone and mediated by various pro-inflammatory mediators. Here, we demonstrated that HP08-0106, composed of four crude drugs-Gardenia jasminoides Grandiflora, Angelica gigas Nakai, Rehmannia glutinosa, and Schizonepeta tenuifolia in a weight ratio of 2:2:1:2, perturbs inflammatory responses, osteoclast formation in LPS-induced RAW 264.7 cells and alveolar bone resorption in ligature-induced periodontitis. HP08-0106 decreased the protein level of iNOS and COX2 as well as the secreted level of IL-$1{\beta}$, indicating that HP08-0106 has antiinflammatory effects. HP08-0106 also inhibited the expression of genes associated with osteoclastogenesis including c-Fos, MMP-9 and TRAP. Moreover, HP08-0106 exhibited a protective effect from alveolar bone loss in ligature-induced periodontitis animal models. Our results strongly suggest that HP08-0106 represent an important therapeutic tool to treat inflammatory disorders associated with bone loss such as periodontitis.
지금까지 태반에서 monoamine들을 재 흡수할 수 있는 몇 가지 membrane transporter들이 발현됨이 보고되었다. 그러나 카테콜라민 트렌스포터(norepinephrine transporter, NET)의 발현과 부인과 질환을 포함한 태반 발달과의 연관성에 관한 연구는 거의 보고된 것이 없다. 본 연구의 목적은 태반에서 NET의 발현을 동정하고, 그 기능을 알아보고자 하였다. 이를 위해 정상과 자간전증(preeclampsia) 태반에서 각각 NET 단백질을 동정하고, 영양막세포주인 HTR8-SV/neo 영양막 세포에 NET 유전자를 주입 후 그 기능을 분석하였다. NET 발현을 분석하고자 태반조직에서 다음과 같이 환자를 분류하여 semi-quantitative RT-PCR과 면역조직화학 방법을 사용하였다. 분만 고통이 없는 산모의 태반을 중심으로(none underwent labor): 1) 만기 정상 태반(term normal placenta)(n=15); 2) 만기 자간전증 태반(term with preeclamptic placenta)(n=15); 3) 중기 자간전증 태반(pre-term preeclamptic placenta)(n=11)을 수집하여, NET 발현을 RNA 수준에서 분석한 결과, mRNA 분석에서는 NET 유전자가 정상 태반 조직보다 자간전증 태반에서 낮게 발현되는 것을 확인하였다. 그러나 Western blot을 통한 NET 단백질의 변화는 거의 없는 것으로 확인되었다. HTR8-SV/neo 영양막세포를 이용하여, NET 유전자의 기능을 알아보고자 NET 유전자의 플라스미드(a plasmid vector for NET gene)와 siRNA(NET gene-specific siRNA)을 HTR8-SV/neo 영양막 세포에 24시간 동안 각각 핵 내 주입하고, NET 유전자 발현에 따른 침윤은 NET 유전자를 증가시킨 경우 대조군보다 2.5배(p<0.05) 촉진시키는 것으로 확인됐으며, NET 유전자를 감소시킨 경우는 침윤능력이 감소하는 경향이 관찰되었다. 또한 NET의 과도한 고발현 또는 저발현은 MMP-2와 MMP-9 발현과 활성을 저해하는 것이 관찰하였다. 따라서 자간전증에서 NET의 발현 감소는 영양막세포의 침윤능력을 억제하는 요인이 될 수 있다. 그러므로 이러한 결과들은 영양막세포의 침윤 기전뿐만 아니라 자간전증을 포함한 부인과 질환의 기초 연구에 지침을 제공할 것이다.
Objective : Ikiyangeumhaedoc-tang(IYHT) has an effect of nourishing Yin(陰) and Jin(津), and has been used to cancer patient effectively. In order to prove the anticancer's and antimetastic effect of IYHT experimentally, studies were done. Methods : We evaluated the cytotoxic activity on HT-1080 cells as well as inhibitory effect on activity of DNA topoisomerase Ⅰ, cell adhesion, cell invasion and proliferation of HUVEC cells induced by bFGF and measured the expression of mRNA(uPA, MMP2, TIMP2), p-ERK protein, recovery effect of gap junctional intercellular communication by $H_{2}O_2$ and survival time of ICR mice bearing sacoma-180. Results : IYHT showed the inhibitory effect on DNA topoisomerase Ⅰ in the concentration of $100{\mu}g/ml,\;500{\mu}g/ml$ and the dosage-dependent inhibitory effect on the adhesion of HT-1080. The concentration of 1mg/ml of IYHT inhibited 15% of adhesion compared with control. IYHT decreased the expression of uPA, but not in MMP2, TIMP2 by RT-PCR and inhibited the expression of p-ERK effectively in the concentration of more than $500{\mu}g/ml.$ IYHT recovered the inhibited gap junctional intercellular communication by $H_{2}O_2$ to the level of 60% of normal control in the concentration of $400{\mu}g/ml$ but, did not extended the mean survival time of sarcoma 180-bearing mouse. Conclusions : It was concluded that IYHT could be applied usefully for prevention and treatment of human cancer, And also experimental study for the evaluation of molecular biological study and antimetastatic research would be recommended in the near future.
Objectives : This study was performed to investigate the anti-fibrogenic effect of greater celandine on cultured rat hepatic stellate cells. Materials and Methods : Hepatic stellate cells (HSC-T6) were treated with various concentrations of greater celandine extract for 24, 48, and 72 hours. The extraction was done with distilled water. After the treatment, cell viability, proliferation, mRNA of the ${\alpha}SMA$, TIMP-1, TIMP-2, collagen I ${\alpha}$ 1, MMP-2, IL-6, TGF-${\beta}1$, PDGFr-${\beta}1$, Bcl-2, Bax, Bcl-xl, caspase-3, caspase-9 and the activities of SOD and catalase were measured by using MTT assay, BrdU assay, real-time PCR, superoxide dismutase assay and catalase assay. Results : The viability, proliferation, mRNA expression and synthesis of collagen of the hepatic stellate cells were inhibited as the concentration increased, which indicates the herb has an inhibitory effect on fibrogenesis of the liver by regulating the fibrosis associated genes in transcription. Conclusions : These results suggest that greater celandine would be beneficial in the treatment of fibrotic patients as well as for patients with chronic hepatitis.
Vaccinium uliginosum L. (VU) is a flowering plant in the genus Vaccinium has berry fruit. This study was performed to investigate the effect of water extract of Vaccinium uliginosum L. and fractions on inhibition of melanogenesis and wrinkle formation. One hundred grams of the Vaccinium uliginosum L. was extracted with 2,000 mL of water ($90^{\circ}C$, 16h, 2 times). The water extracts were lyophilized and stored at $4^{\circ}C$ until used. Vaccinium uliginosum L. extracts showed scavenger activities on DPPH radical, superoxide anion radical, hydroxyl radical, hydrogen peroxide and singlet oxygen radical, dose dependently. And VU extract and fractions reduced melanin contents on B16F10 melanoma and inhibited the expression of melanogenesis-related proteins, tyrosinase, tyrosinase-related protein (TRP-1) and dapachrometa utomerase (Dct, TRP-2). Moreover VU extract and fractions stimulated procollagen production and inhibited MMP-1 production in human fibroblast. And it decreased degree of wrinkle formation in hairless mouse skin that induced by DVB irradiation for 9 weeks. From the above results, it is possible that Vaccinium uliginosum L. may be developed to be the health functional food and functional cosmetics that have anti-melanogenesis and anti-wrinkle effect.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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